| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-17页 |
| 1 引言 | 第17-24页 |
| ·皮肤与周围神经系统的发育 | 第17-18页 |
| ·皮肤神经的发育可塑性 | 第18-19页 |
| ·miRNAs概述 | 第19-21页 |
| ·miRNAs与皮肤 | 第21-22页 |
| ·本论文的研究设想与意义 | 第22-24页 |
| 2 小鼠羊水中miRNAs表达谱检测 | 第24-35页 |
| ·设备与材料 | 第24-26页 |
| ·仪器设备 | 第24-25页 |
| ·试剂与耗材 | 第25-26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·小鼠胚胎的分离 | 第26-27页 |
| ·羊水的采集与处理 | 第27页 |
| ·胚胎组织DNA提取 | 第27-28页 |
| ·PCR | 第28-29页 |
| ·miRNAs表达谱检测 | 第29-30页 |
| ·miRNAs差异表达分析 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·胎鼠性别鉴定 | 第30页 |
| ·miRNAs差异表达分析 | 第30-31页 |
| ·差异表达miRNAs的筛选 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-35页 |
| 3 不同方法处理胚胎组织的RT-qPCR方法学评价 | 第35-53页 |
| ·设备与材料 | 第35-37页 |
| ·仪器设备 | 第35-36页 |
| ·试剂与耗材 | 第36页 |
| ·实验动物 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-43页 |
| ·小鼠胚胎的分离 | 第37页 |
| ·胚胎组织取材与固定 | 第37页 |
| ·总RNA提取 | 第37页 |
| ·RNA的甲醛去修饰 | 第37-38页 |
| ·RNA质量评估与DNase处理 | 第38页 |
| ·茎环法RT-qPCR | 第38-41页 |
| ·RT-qPCR | 第41-43页 |
| ·qPCR数据处理 | 第43页 |
| ·统计学分析 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-49页 |
| ·胚胎不同处理方法对RNA质量的影响 | 第43-44页 |
| ·茎环法RT-qPCR扩增特异性 | 第44-45页 |
| ·胚胎不同处理方法对RNA可扩增性的影响 | 第45-46页 |
| ·3种胚胎组织中miR-206-3p的定量检测 | 第46-48页 |
| ·胚胎不同处理方法间基因表达稳定性比较 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-53页 |
| 4 miR-206-3p与皮肤神经发育的关系 | 第53-70页 |
| ·设备与材料 | 第53-56页 |
| ·仪器设备 | 第53页 |
| ·试剂与耗材 | 第53-56页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-62页 |
| ·组织取材与RNA提取 | 第56页 |
| ·RT-qPCR | 第56-57页 |
| ·从TRIzol~(?)有机相中提取蛋白质 | 第57页 |
| ·BCA法蛋白定量 | 第57-58页 |
| ·western blotting | 第58-60页 |
| ·冰冻切片 | 第60页 |
| ·H-E染色 | 第60页 |
| ·ISH | 第60-61页 |
| ·IHC | 第61-62页 |
| ·统计学分析 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-66页 |
| ·miR-206-3p在皮肤与肌肉发育过程中的表达 | 第62-63页 |
| ·Bdnf在皮肤发育过程中的表达 | 第63-64页 |
| ·miR-206-3p与皮肤神经发育的关系 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-70页 |
| 5 皮肤中miR-206-3p的细胞来源 | 第70-79页 |
| ·设备与材料 | 第70-71页 |
| ·仪器设备 | 第70页 |
| ·试剂与耗材 | 第70-71页 |
| ·实验动物 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-73页 |
| ·皮肤KC与DF细胞的原代培养 | 第71-72页 |
| ·钙离子诱导KC体外分化 | 第72-73页 |
| ·细胞总RNA与蛋白的提取 | 第73页 |
| ·基因表达检测 | 第73页 |
| ·统计学分析 | 第73页 |
| ·结果 | 第73-76页 |
| ·皮肤KC与DF的原代培养 | 第73-74页 |
| ·miR-206-3p与Bdnf在皮肤KC与DF中的表达 | 第74-75页 |
| ·miR-206-3p与Bdnf在KC体外分化前后的表达 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| 6 miR-206-3p在成体皮肤创伤修复中的表达分析 | 第79-85页 |
| ·设备与材料 | 第79页 |
| ·仪器设备 | 第79页 |
| ·试剂与耗材 | 第79页 |
| ·实验动物 | 第79页 |
| ·方法 | 第79-80页 |
| ·手术致皮肤损伤 | 第79-80页 |
| ·皮肤损伤修复组织的取材 | 第80页 |
| ·基因表达检测 | 第80页 |
| ·组织学检查 | 第80页 |
| ·统计学分析 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-82页 |
| ·讨论 | 第82-85页 |
| 结论与展望 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 在学期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第96页 |
