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PVY和PVA实时荧光定量RT-PCR检测技术研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
第一章 前言第9-21页
   ·马铃薯病毒病概况第10页
   ·马铃薯主要病毒简介第10-13页
     ·马铃薯Y病毒(PVY)第10-12页
     ·马铃薯A病毒(PVA)第12-13页
   ·马铃薯病毒检测技术第13-19页
     ·指示植物法第13页
     ·电子显微镜技术第13-14页
     ·血清学检测技术第14-15页
     ·分子生物学检测技术第15-19页
   ·本课题的研究目的和意义第19-20页
   ·本课题研究内容第20-21页
第二章 实验材料与方法第21-39页
   ·实验材料第21-23页
     ·供试马铃薯病毒样品第21页
     ·供试菌株与载体第21页
     ·试剂与仪器第21-22页
     ·常用溶液和抽提溶液的配置第22-23页
   ·马铃薯病毒的初步鉴定第23-26页
     ·症状观察第23页
     ·我国PVY和PVA分离物的常规RT-PCR鉴定第23-26页
   ·病毒胁迫下马铃薯常用内参基因表达稳定性研究及内标基因的筛选第26-28页
     ·植物材料第26-27页
     ·RNA提取和cDNA合成第27页
     ·马铃薯内参基因的特异性引物第27页
     ·内参基因表达稳定性的定量PCR分析第27-28页
     ·数据处理和分析第28页
   ·PVY实时荧光定量RT-PCR检测技术研究第28-29页
     ·马铃薯总RNA的提取第28页
     ·cDNA合成体系及条件第28页
     ·引物设计第28-29页
     ·Real-time PCR反应体系及条件第29页
     ·Real-time PCR标准曲线的制定和结果计算第29页
   ·PVA实时荧光定量RT-PCR检测技术研究第29-30页
     ·马铃薯总RNA的提取第29页
     ·cDNA合成体系及条件第29-30页
     ·引物设计第30页
     ·Real-time PCR反应体系及条件第30页
     ·Real-time PCR标准曲线的制定和结果计算第30页
   ·不同血清型的PVY分离物间分子变异情况分析及PCR鉴定方法研究第30-39页
     ·不同血清型的PVY分离物间分子变异情况分析第30-31页
     ·我国PVY分离物血清型鉴定第31-33页
     ·我国不同血清型的PVY分离物CP基因的克隆与分析第33-37页
     ·利用荧光定量PCR技术鉴定我国不同血清型的PVY分离物第37-39页
第三章 结果与分析第39-72页
   ·马铃薯病毒样本的初步鉴定第39-42页
     ·症状观察第39-40页
     ·我国PVY和PVA分离物的常规RT-PCR鉴定第40-42页
   ·病毒胁迫下马铃薯常用内参基因表达稳定性研究及内标基因的筛选第42-45页
   ·PVY实时荧光定量RT-PCR检测技术研究第45-50页
     ·PVY Real-time PCR检测标准曲线的建立第45-46页
     ·PVY Real-time PCR定量检测的准确性分析第46-50页
     ·Real-time PCR定量检测的重现性分析第50页
   ·PVA实时荧光定量RT-PCR检测技术研究第50-55页
     ·PVA Real-time PCR检测标准曲线的建立第50-51页
     ·PVA Real-time PCR定量检测的准确性分析第51-55页
     ·Real-time PCR定量检测的重现性分析第55页
   ·不同血清型的PVY分离物间分子变异情况分析及PCR鉴定方法研究第55-72页
     ·不同血清型的PVY分离物间分子变异情况分析第55-64页
     ·我国PVY分离物血清型鉴定第64-65页
     ·我国不同血清型的PVY分离物CP基因的克隆与分析第65-70页
     ·利用荧光定量PCR技术鉴定我国不同血清型的PVY分离物第70-72页
第四章 讨论第72-74页
   ·马铃薯病毒的初步鉴定第72页
   ·病毒胁迫下马铃薯常用内参基因表达稳定性研究及内标基因的筛选第72页
   ·PVY和PVA实时荧光定量RT-PCR检测技术研究第72页
   ·不同血清型的PVY分离物间分子变异情况分析及PCR鉴定方法研究第72-74页
第五章 结果第74-76页
参考文献第76-82页
致谢第82-83页
附录第83-84页
个人简历第84页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第84页

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