中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-25页 |
·植物细胞信号转导 | 第14页 |
·植物 MAPK 级联途径 | 第14-17页 |
·植物中的 MAPKKK | 第15-16页 |
·植物中的 MAPKK | 第16页 |
·植物中的 MAPK | 第16-17页 |
·植物 MAPK 级联途径的功能 | 第17-24页 |
·MAPK 级联途径参与调控生物胁迫响应 | 第17-18页 |
·MAPK 级联途径参与调控非生物胁迫响应 | 第18页 |
·MAPK 级联途径与 ROS | 第18-19页 |
·MAPK 级联途径参与调控植物激素信号转导 | 第19-22页 |
·MAPK 级联途径与生长素信号传导 | 第19-20页 |
·MAPK 级联途径与 ABA 信号传导 | 第20页 |
·MAPK 级联途径与乙烯信号传导 | 第20-21页 |
·MAPK 级联途径与茉莉酸信号传导 | 第21页 |
·MAPK 级联途径与水杨酸信号传导 | 第21-22页 |
·MAPK 级联途径参与生长发育调控 | 第22-24页 |
·MAPK 级联途径参与调控气孔发育 | 第22页 |
·MAPK 级联途径参与调控胞质分裂 | 第22-23页 |
·MAPK 级联途径参与调控植物衰老 | 第23页 |
·MAPK 级联途径参与调控根的发育 | 第23页 |
·MAPK 级联途径参与调控花粉囊的形成、开花和胚胎发育 | 第23-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-48页 |
·实验材料 | 第25-32页 |
·植物材料 | 第25页 |
·植物材料培养与处理 | 第25-26页 |
·菌株与质粒 | 第26页 |
·PCR 引物 | 第26-28页 |
·酶与各种生化试剂 | 第28页 |
·培养基 | 第28-32页 |
·实验方法 | 第32-48页 |
·植物材料总 RNA 的提取 | 第32-33页 |
·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第33页 |
·ZmMPK5 基因的克隆 | 第33页 |
·琼脂糖凝胶回收 | 第33-34页 |
·连接反应 | 第34页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第34-35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第35页 |
·DNA 序列测定 | 第35页 |
·大肠杆菌中质粒 DNA 的提取 | 第35-36页 |
·植物基因组 DNA 提取 | 第36页 |
·荧光定量 PCR | 第36页 |
·洋葱表皮亚细胞定位 | 第36-40页 |
·pBI121-ZmMPK5-GFP 表达载体的构建 | 第36-37页 |
·pBI121-ZmMPK5-GFP 质粒的提取(碱法) | 第37-38页 |
·pBI121-ZmMPK5-GFP 质粒的纯化 | 第38-39页 |
·基因枪轰击洋葱表皮观察 pBI121-ZmMPK5-GFP 重组蛋白亚细胞定位 | 第39-40页 |
·根癌农杆菌介导的转化 | 第40-42页 |
·表达载体的构建 | 第40-41页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第41-42页 |
·农杆菌介导的烟草转化 | 第42页 |
·转基因烟草植株鉴定 | 第42页 |
·基因组水平的鉴定 | 第42页 |
·转录水平的鉴定 | 第42页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第42-43页 |
·拟南芥转化 | 第42-43页 |
·转基因拟南芥鉴定 | 第43页 |
·转基因烟草植株生理指标测定 | 第43-47页 |
·烟草种子萌发及幼苗生长实验 | 第43-44页 |
·拟南芥种子萌发及幼苗生长实验 | 第44页 |
·H_2O_2含量测定 | 第44页 |
·DAB 和 NBT 染色 | 第44页 |
·抗氧化酶活性测定 | 第44-45页 |
·游离脯氨酸含量测定 | 第45-46页 |
·可溶性糖含量测定 | 第46页 |
·叶绿素含量测定 | 第46页 |
·MDA 含量测定 | 第46页 |
·相对电导率的测定 | 第46-47页 |
·PVX 病原菌的侵染 | 第47页 |
·拟南芥植株叶片气孔孔径的观察与测定 | 第47页 |
·干旱胁迫处理及失水率测定 | 第47页 |
·统计分析 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-69页 |
·玉米促分裂原活化蛋白激酶 ZmMPK5 基因的分离 | 第48页 |
·ZmMPK5 基因的序列分析 | 第48-49页 |
·ZmMPK5 的亚细胞定位 | 第49-50页 |
·ZmMPK5 在玉米中的表达分析 | 第50-53页 |
·ZmMPK5 在玉米不同部位的表达分析 | 第50-51页 |
·ZmMPK5 在各种胁迫和不同信号分子处理下的表达分析 | 第51-52页 |
·H_2O_2影响 NaCl 和 ABA 诱导的 ZmMPK5 的表达 | 第52-53页 |
·ZmMPK5 基因在烟草和拟南芥中的转化 | 第53-55页 |
·转基因表达载体的构建 | 第53页 |
·转基因烟草的鉴定 | 第53-54页 |
·转基因拟南芥的鉴定 | 第54-55页 |
·过表达 ZmMPK5 增强转基因烟草植株对盐胁迫的抗性 | 第55-60页 |
·过表达 ZmMPK5 增强转基因烟草在盐胁迫条件下种子萌发及幼苗生长 | 第55-56页 |
·过表达 ZmMPK5 的烟草调控盐胁迫条件下 ROS 的积累 | 第56-57页 |
·过表达 ZmMPK5 提高了盐胁迫下转基因烟草中脯氨酸和可溶性糖的含量 | 第57-58页 |
·过表达 ZmMPK5 降低了盐胁迫下转基因烟草的相对电导率及 MDA 的含量 | 第58页 |
·过表达 ZmMPK5 提高了盐胁迫下转基因烟草抗氧化酶的活性 | 第58-59页 |
·过表达 ZmMPK5 的转基因烟草提高了盐胁迫诱导的相关基因的表达量 | 第59-60页 |
·过表达 ZmMPK5 增强转基因烟草的抗氧化能力 | 第60-62页 |
·过表达 ZmMPK5 增强转基因烟草的抗病能力 | 第62-63页 |
·ZmMPK5 参与 ABA 信号转导 | 第63-68页 |
·过表达 ZmMPK5 转基因拟南芥参与 ABA 介导的种子萌发及幼苗生长 | 第63-65页 |
·过表达 ZmMPK5 的转基因拟南芥增强 ABA 诱导的气孔关闭 | 第65页 |
·过表达 ZmMPK5 的转基因拟南芥调控 ABA 响应基因的表达 | 第65-66页 |
·过表达 ZmMPK5 的转基因拟南芥影响 ROS 的动态平衡 | 第66-68页 |
·过表达 ZmMPK5 增强转基因拟南芥的抗旱能力 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-77页 |
5 结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第100页 |