| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-27页 |
| ·MAPK 级联组份概述 | 第15-17页 |
| ·植物对干旱胁迫的响应与信号转导 | 第17-23页 |
| ·干旱胁迫信号分子 | 第17-18页 |
| ·植物对干旱胁迫信号的感知 | 第18-19页 |
| ·干旱胁迫信号转导途径 | 第19-21页 |
| ·干旱胁迫应答基因 | 第21-22页 |
| ·干旱胁迫信号转导机制 | 第22-23页 |
| ·植物对生物胁迫的响应与信号转导 | 第23-26页 |
| ·病原信号转导组份 | 第24-25页 |
| ·病原信号的感知 | 第25页 |
| ·MAPK 级联途径在生物胁迫响应中的作用 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-46页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-46页 |
| ·RNA 的提取与反转录 | 第28-29页 |
| ·试剂盒提取 RNA | 第28-29页 |
| ·RNA 的反转录 | 第29页 |
| ·载体构建 | 第29-33页 |
| ·PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·DNA 回收 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30-31页 |
| ·质粒提取和酶切 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第32-33页 |
| ·表达载体的构建 | 第33页 |
| ·原核表达诱导、蛋白纯化和抗体制备 | 第33-37页 |
| ·原核表达诱导 | 第33-35页 |
| ·His::ZmSIMK1 重组蛋白的纯化 | 第35页 |
| ·ZmSIMK1 抗血清的制备 | 第35页 |
| ·抗体特异性的检测 | 第35页 |
| ·Western blot 分析 | 第35-37页 |
| ·酵母转化及胁迫耐性分析 | 第37-38页 |
| ·酵母转化 | 第37页 |
| ·转录激活分析 | 第37页 |
| ·蛋白诱导表达及检测 | 第37-38页 |
| ·酵母胁迫耐性分析 | 第38页 |
| ·烟草的转化及转基因烟草的鉴定 | 第38-41页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第38-39页 |
| ·植物基因组的提取与纯化 | 第39-40页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第40页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第40页 |
| ·实时定量 PCR | 第40-41页 |
| ·转基因植物 GUS 组织化学染色分析 | 第41页 |
| ·ZmSIMK1 蛋白亚细胞定位 | 第41-42页 |
| ·洋葱表皮瞬时表达定位分析 | 第41-42页 |
| ·烟草叶片中稳定表达定位分析 | 第42页 |
| ·生理指标测定 | 第42-44页 |
| ·丙二醛（MDA）含量的测定 | 第42页 |
| ·相对电导率(REL)的测定 | 第42页 |
| ·抗氧化酶活性的测定 | 第42-43页 |
| ·游离脯氨酸（Pro）含量的测定 | 第43-44页 |
| ·抗坏血酸（AsA）含量的测定 | 第44页 |
| ·离体叶片失水率的测定 | 第44页 |
| ·NBT 和 DAB 染色分析 | 第44页 |
| ·植物对细菌病原体抗性分析 | 第44-46页 |
| ·超敏反应（HR）检测 | 第44页 |
| ·细菌生物量统计 | 第44-45页 |
| ·ABA 和 SA 含量的测定 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-63页 |
| ·原核表达及抗体制备 | 第46-47页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第46页 |
| ·重组蛋白的原核表达和纯化 | 第46-47页 |
| ·抗体制备及特异性检测 | 第47页 |
| ·ZmSIMK1 的酵母表达及胁迫耐性分析 | 第47-50页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第47页 |
| ·酵母表达的转录激活分析及诱导 | 第47-48页 |
| ·ZmSIMK1 在酵母中表达提高了其对渗透胁迫的耐性 | 第48-50页 |
| ·ZmSIMK1 的转录模式分析 | 第50-51页 |
| ·ZmSIMK1 启动子分析及 GUS 染色 | 第51-54页 |
| ·ZmSIMK1 启动子扩增及序列分析 | 第51-52页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第52-54页 |
| ·ZmSIMK1 蛋白的亚细胞定位 | 第54-55页 |
| ·GFP 表达载体的构建 | 第54页 |
| ·ZmSIMK1 蛋白亚细胞定位 | 第54-55页 |
| ·ZmSIMK1 转化烟草研究 | 第55-56页 |
| ·转基因和野生型烟草植株的干旱胁迫抗性分析 | 第56-60页 |
| ·过表达 ZmSIMK1 提高了转基因烟草的抗氧化酶活性 | 第57-58页 |
| ·过表达 ZmSIMK1 提高了转基因烟草的脯氨酸及抗坏血酸含量 | 第58页 |
| ·过表达 ZmSIMK1 提高了转基因烟草的干旱胁迫相关基因表达水平 | 第58-59页 |
| ·过表达 ZmSIMK1 提高了转基因烟草的 ABA 含量及降低了失水速率 | 第59-60页 |
| ·转基因和野生型烟草植株的生物胁迫抗性分析 | 第60-63页 |
| ·过表达 ZmSIMK1 增强了转基因烟草对病原体 Pst DC3000 的抵抗能力 | 第60-61页 |
| ·ZmSIMK1 过表达上调转基因烟草中参与抗病相关基因表达水平 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| ·ZmSIMK1 在酵母中过表达增强了其渗透胁迫耐性 | 第63页 |
| ·ABA 反馈调节转基因烟草中 ZmSIMK1 的活性 | 第63-64页 |
| ·ZmSIMK1 过表达增强转基因烟草干旱胁迫耐性 | 第64-65页 |
| ·ZmSIMK1 过表达激活了转基因烟草 SAR | 第65页 |
| ·ZmSIMK1 过表达提高了转基因烟草对生物及非生物胁迫的双重抗性 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第80页 |
