| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| ·牛结核病的重要性 | 第15-17页 |
| ·牛结核病的发现 | 第15页 |
| ·发达国家牛结核病的防控经验 | 第15-16页 |
| ·牛结核病在发展中国家的流行现状 | 第16页 |
| ·牛结核病在我国的流行状况 | 第16-17页 |
| ·牛分枝杆菌的感染途径与感染剂量 | 第17-18页 |
| ·牛分枝杆菌对人类健康的威胁 | 第18-19页 |
| ·牛结核病的诊断方法 | 第19-22页 |
| ·细菌分离鉴定 | 第19页 |
| ·PCR 检测方法 | 第19-20页 |
| ·皮内变态反应试验 | 第20页 |
| ·IFN-γ释放试验 | 第20-21页 |
| ·血清学检测方法 | 第21-22页 |
| ·重组蛋白在牛结核病诊断中的应用 | 第22-24页 |
| ·研究目的 | 第24-25页 |
| 第二章 牛分枝杆菌抗原蛋白的克隆、表达及纯化 | 第25-41页 |
| 摘要 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·菌株和载体 | 第25页 |
| ·主要试剂耗材 | 第25页 |
| ·溶液及试剂配置方法 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-34页 |
| ·牛分枝杆菌抗原的克隆 | 第26-31页 |
| ·牛分枝杆菌抗原的表达与纯化 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白的 T 细胞活性鉴定 | 第32页 |
| ·重组蛋白的 B 细胞活性鉴定 | 第32-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-40页 |
| ·牛分枝杆菌抗原的克隆 | 第34-35页 |
| ·牛分枝杆菌抗原的表达及纯化 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白 T 细胞活性鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白间接 ELISA 检测方法的建立 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白 B 细胞活性鉴定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 重组蛋白在皮内变态反应中的应用 | 第41-58页 |
| 摘要 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·主要试剂耗材 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| ·豚鼠模型评价重组蛋白作为皮内变态反应刺激原活性 | 第42-43页 |
| ·实验动物筛选 | 第43页 |
| ·皮内变态反应试验 | 第43页 |
| ·IFN-γ释放试验 | 第43-44页 |
| ·巢式 PCR 检测 | 第44页 |
| ·基于重组蛋白的皮内变态反应检测方法建立 | 第44-46页 |
| ·基于重组蛋白的皮内变态反应检测方法临床试验及其评价 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-56页 |
| ·豚鼠八点轮回试验评价重组蛋白活性 | 第46-47页 |
| ·巢式 PCR 检测结果 | 第47-48页 |
| ·基于重组蛋白的皮内变态反应检测方法的建立 | 第48-50页 |
| ·基于重组蛋白混合物的皮内变态反应试验的特异性 | 第50-51页 |
| ·基于重组蛋白的皮内变态反应 ROC 分析 | 第51-52页 |
| ·基于重组蛋白的皮内变态反应与传统检测方法检测结果之间的相关性分析 | 第52-54页 |
| ·基于重组蛋白的皮内变态反应检测方法临床试验及其评价 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 重组蛋白在 IFN-γ释放试验中的应用 | 第58-65页 |
| 摘要 | 第58页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·主要试剂耗材 | 第58页 |
| ·主要仪器设备 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59页 |
| ·重组蛋白 CE 作为 IFN-γ释放试验刺激原的浓度优化 | 第59页 |
| ·重组蛋白 CE 作为 IFN-γ释放试验刺激原检测方法的 cutoff 值确定 | 第59页 |
| ·重组蛋白 CE 作为 IFN-γ释放试验刺激原检测方法的临床应用 | 第59页 |
| ·结果及分析 | 第59-63页 |
| ·重组蛋白 CE 作为 IFN-γ释放试验刺激原的浓度优化 | 第59-62页 |
| ·重组蛋白 CE 作为 IFN-γ释放试验刺激原检测方法的 cutoff 值确定 | 第62页 |
| ·重组蛋白 CE 作为 IFN-γ释放试验刺激原检测方法的临床应用 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 牛结核病发展过程中不同诊断方法的比较研究 | 第65-88页 |
| 摘要 | 第65页 |
| ·实验材料 | 第65-67页 |
| ·菌株及标准血清 | 第65页 |
| ·主要试剂耗材 | 第65页 |
| ·主要试剂配置 | 第65-66页 |
| ·主要仪器设备 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-71页 |
| ·菌株复苏及定量 | 第67页 |
| ·实验动物筛选及人工感染 | 第67页 |
| ·样品采集及制备 | 第67-68页 |
| ·结核菌素皮内变态反应试验 | 第68页 |
| ·重组蛋白皮内变态反应试验 | 第68页 |
| ·IFN-γ释放试验 | 第68-69页 |
| ·血清学诊断方法 | 第69页 |
| ·实验牛痰液的巢式 PCR 检测 | 第69-70页 |
| ·病原分离及培养 | 第70页 |
| ·组织病理学切片观察 | 第70-71页 |
| ·结果及分析 | 第71-85页 |
| ·结核菌素皮内变态反应试验 | 第71页 |
| ·重组蛋白皮内变态反应试验 | 第71-72页 |
| ·IFN-γ释放试验 | 第72-74页 |
| ·抗体水平的动态监测 | 第74-76页 |
| ·实验牛痰液的巢式 PCR 检测 | 第76页 |
| ·病原分离及培养 | 第76页 |
| ·组织病理学切片观察 | 第76-85页 |
| ·讨论 | 第85-88页 |
| 第六章 全文总结 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 作者简介 | 第99页 |
