肠炎沙门氏菌rpoE基因缺陷株的构建与rpoE功能初探
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 致谢 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| ·课题简介 | 第13-22页 |
| ·肠炎沙门氏菌简介 | 第13-14页 |
| ·rpoE基因和σE因子 | 第14-19页 |
| ·Red同源重组技术 | 第19-22页 |
| ·实时荧光定量PCR技术 | 第22页 |
| ·课题来源、内容和意义 | 第22-24页 |
| ·课题来源 | 第22-23页 |
| ·课题内容 | 第23页 |
| ·课题意义 | 第23-24页 |
| 第二章 肠炎沙门氏菌RPOE基因敲除方法的建立 | 第24-40页 |
| ·材料与方法 | 第24-34页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-39页 |
| ·质粒pKD4的提取 | 第34页 |
| ·质粒pKD46的提取 | 第34-35页 |
| ·pKD4-kan的制备 | 第35-36页 |
| ·S.E/pKD46的制备 | 第36页 |
| ·rpoE同源重组鉴定 | 第36-37页 |
| ·抗性基因kan及质粒的消除 | 第37-38页 |
| ·ΔrpoE遗传稳定性的鉴定 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 缺陷株ΔRPOE 在环境胁迫下的生长能力 | 第40-48页 |
| ·材料与方法 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-46页 |
| ·缺陷株和野生株在不同温度条件下的生长曲线 | 第41-43页 |
| ·缺陷株和野生株在酸性条件下的生长曲线 | 第43-44页 |
| ·缺陷株和野生株在氧化条件下的生长曲线 | 第44-45页 |
| ·缺陷株和野生株在高渗条件下的生长曲线 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 第四章 缺陷株ΔRPOE 在转录水平上的表达调控 | 第48-56页 |
| ·材料与方法 | 第48-51页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-55页 |
| ·细菌总RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·RT-qPCR反应 | 第52-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第五章 结论与展望 | 第56-58页 |
| ·主要结论 | 第56页 |
| ·展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63-64页 |
