| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-25页 |
| ·中度嗜盐菌 | 第10页 |
| ·中度嗜盐菌的应用 | 第10-12页 |
| ·在酶制剂生产方面的应用 | 第11页 |
| ·在基因工程和化妆品生产方面的应用 | 第11-12页 |
| ·在食品中的应用 | 第12页 |
| ·在多聚体生产方面的应用 | 第12页 |
| ·在环境污染和生物修复方面的应用 | 第12页 |
| ·中度嗜盐菌的耐盐机制研究 | 第12-13页 |
| ·嗜盐四联球菌 | 第13-19页 |
| ·small Hsps（sHsps） | 第16-17页 |
| ·Hsp 70 家族 | 第17页 |
| ·Hsp 100 家族（caseinolytic protease，Clp） | 第17-18页 |
| ·HrcA/CIRCE 的负调作用 | 第18-19页 |
| ·相容性溶质与甜菜碱运输系统 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的原理 | 第20-22页 |
| ·实时荧光定量 PCR 主要包括染料类 SYBR Green 和探针类 TaqMan 两种 | 第21页 |
| ·TaqMan 和 TaqMan MGB 探针技术 | 第21-22页 |
| ·双杂交探针技术 | 第22页 |
| ·分子信标技术 | 第22页 |
| ·实时荧光定量的定量方法 | 第22-23页 |
| ·绝对定量法 | 第22页 |
| ·相对定量法 | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量 RT-PCR 的应用 | 第23页 |
| ·本论文的研究意义与主要内容 | 第23-25页 |
| 第二章 嗜盐四联球菌 CICC10469 | 第25-40页 |
| ·菌株和培养基 | 第25页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·试剂和仪器 | 第25-27页 |
| ·溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-33页 |
| ·菌株的活化与扩大培养 | 第27-28页 |
| ·菌株耐盐情况及生长曲线的测定 | 第28页 |
| ·镜检 | 第28页 |
| ·嗜盐四联球菌基因组提取 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·基因克隆 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态制备，PCR 产物纯化，转化及测序 | 第31-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-38页 |
| ·菌体形态镜检结果 | 第33-34页 |
| ·clpB 基因，dnaK 基因，hrcA 基因序列测序结果 | 第34-38页 |
| ·小结 | 第38-40页 |
| 第三章 RT-PCR 检测 CLPB,DNAK 和 HRCA 基因的转录水平与盐浓度变化的关系 | 第40-73页 |
| ·菌株和试剂 | 第40-43页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·培养基和试剂 | 第40-41页 |
| ·试剂盒 | 第41页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第41-43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| ·RT-PCR 引物的设计 | 第43-44页 |
| ·RNA 提取方法 | 第44页 |
| ·RNA 浓度与纯度的检测 | 第44-45页 |
| ·反转录反应（cDNA 的合成） | 第45-46页 |
| ·纯化后的 RNA 和 cDNA 质量的验证 | 第46页 |
| ·RT-PCR | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-55页 |
| ·RT-PCR 引物的设计与合成 | 第47-48页 |
| ·RNA 的提取与检测结果 | 第48页 |
| ·RNA 的提取与检测 | 第48-49页 |
| ·RNA 的纯化(去除基因组 DNA 污染)与 cDNA 的合成 | 第49-50页 |
| ·RT—PCR 检测嗜盐四联球菌 CICC10469 培养 12 小时后 clpB 基因，dnak 基因，hrcA 基因在不同 NaCl 浓度下的相对表达量 | 第50-55页 |
| · | 第55-60页 |
| ·RNA 的提取与检测 | 第55-56页 |
| ·RT—PCR 检测 clpB 基因在不同 NaCl 浓度下的相对表达量 | 第56-60页 |
| · | 第60-64页 |
| ·RNA 的提取与检测 | 第60-61页 |
| ·RT—PCR 检测 clpB 基因在不同 NaCl 浓度下的相对表达量 | 第61-64页 |
| · | 第64-70页 |
| ·RNA 的提取与检测 | 第64-65页 |
| ·RT—PCR 检测 clpB 基因在不同 NaCl 浓度下的相对表达量 | 第65-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 结论与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 附件 | 第83页 |
