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血管平滑肌细胞与内皮细胞相互交流的力学生物学机制

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-20页
第1章 绪论第20-32页
   ·力学因素与血管重建第21-23页
     ·低切应力与血管重建第21-22页
     ·张应变与血管重建第22-23页
   ·血管重建中内皮细胞与平滑肌细胞的相互交流第23-24页
   ·低切应力诱导血管重建的蛋白质组学和信号转导网络预测第24-32页
     ·低切应力条件下体外培养血管的蛋白质表达谱差异第25-29页
     ·本文的主要研究思路第29-32页
第2章 低切应力条件下 PDGF-BB 和 TGF-β1 在血管平滑肌细胞和内皮细胞相互交流中的作用及其机制第32-70页
   ·引言第32-33页
   ·实验仪器与材料第33-37页
     ·主要的溶剂溶液成分及配制第33-35页
     ·实验动物及实验材料第35-36页
     ·实验仪器第36-37页
   ·实验方法第37-47页
     ·大鼠胸主动脉 ECs 和 VSMCs 原代培养、传代培养和鉴定第37-40页
     ·内皮细胞和血管平滑肌细胞联合培养和平行平板流动腔系统第40-43页
     ·细胞迁移检测(Transwell 法)第43页
     ·细胞增殖检测(BrdU 掺入比色法)第43-44页
     ·重组蛋白刺激和中和抗体封闭实验第44页
     ·siRNA 干扰第44-45页
     ·蛋白免疫印迹(Western blotting)第45-46页
     ·RT-PCR第46页
     ·酶联免疫吸附实验(ELISA)第46-47页
     ·统计学分析第47页
   ·结果第47-65页
     ·低切应力条件下联合培养细胞 PDGF-BB、TGF-β1、LaminA、LOX 和磷酸化 ERK1/2 表达的变化第47-50页
     ·低切应力条件下细胞迁移和增殖的变化第50-51页
     ·重组 PDGF-BB 和 TGF-β1 对细胞 Lamin A,LOX,磷酸化 ERK1/2 表达及迁移、增殖的影响第51-54页
     ·siRNA 干扰对细胞 PDGF-BB、TGF-β、Lamin A、LOX 和磷酸化 ERK1/2 表达以及细胞迁移和增殖的影响第54-62页
     ·联合培养 VSMCs 通过 PDGF-BB 和 TGF-β1 正反馈调控低切应力诱导的 ECs迁移和增殖第62-65页
   ·讨论第65-70页
第3章 高张应变条件下血管平滑肌细胞与内皮细胞相互交流对细胞 Rab28 表达的影响及其机制第70-108页
   ·引言第70-71页
   ·实验仪器与材料第71-73页
     ·主要的试剂溶液成分及配制第71-72页
     ·实验动物和抗体第72-73页
     ·实验仪器第73页
     ·引物和小 RNA第73页
   ·实验方法第73-81页
     ·高血压大鼠模型的建立第73-74页
     ·大鼠颈总动脉取材、原位增殖与凋亡测定、Western blotting第74-75页
     ·大鼠胸主动脉 ECs 和 VSMCs 原代培养、传代培养和鉴定第75-76页
     ·血管细胞的周期性张应变加载第76-77页
     ·细胞增殖、凋亡和迁移检测、Western blotting第77页
     ·条件培养基的制备和使用第77-78页
     ·小 RNA 干扰第78-79页
     ·细胞内囊泡染色第79页
     ·免疫细胞化学染色第79-80页
     ·新生 RNA 标记第80页
     ·免疫共沉淀第80-81页
     ·统计学分析第81页
   ·结果第81-100页
     ·高血压大鼠血管组织的 Rab28 表达及血管细胞的增殖与凋亡第81-85页
     ·高张应变条件下 ECs 和 VSMCs 的 Rab28 表达第85-86页
     ·VSMCs 与 ECs 相互交流对细胞 Rab28 表达的影响第86-88页
     ·VSMCs 条件培养液中血管紧张素 II 的检测和外源性 Ang-II 上调 ECs 的Rab28 表达第88-90页
     ·siRNA 干扰 ECs 的 Rab28 抑制增殖,诱导其凋亡和迁移;抑制 VSMCs 迁移第90-92页
     ·Rab28 在 ECs 中的定位与分布第92-96页
     ·Rab28 与 NF-κB 活化的关系第96-100页
     ·Rab28 与 NF-κB 免疫共沉淀第100页
   ·讨论第100-108页
全文小结第108-109页
文献综述第109-121页
参考文献第121-128页
致谢第128-129页
攻读博士学位期间已发表的学术论文第129页

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