摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-20页 |
第1章 绪论 | 第20-32页 |
·力学因素与血管重建 | 第21-23页 |
·低切应力与血管重建 | 第21-22页 |
·张应变与血管重建 | 第22-23页 |
·血管重建中内皮细胞与平滑肌细胞的相互交流 | 第23-24页 |
·低切应力诱导血管重建的蛋白质组学和信号转导网络预测 | 第24-32页 |
·低切应力条件下体外培养血管的蛋白质表达谱差异 | 第25-29页 |
·本文的主要研究思路 | 第29-32页 |
第2章 低切应力条件下 PDGF-BB 和 TGF-β1 在血管平滑肌细胞和内皮细胞相互交流中的作用及其机制 | 第32-70页 |
·引言 | 第32-33页 |
·实验仪器与材料 | 第33-37页 |
·主要的溶剂溶液成分及配制 | 第33-35页 |
·实验动物及实验材料 | 第35-36页 |
·实验仪器 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-47页 |
·大鼠胸主动脉 ECs 和 VSMCs 原代培养、传代培养和鉴定 | 第37-40页 |
·内皮细胞和血管平滑肌细胞联合培养和平行平板流动腔系统 | 第40-43页 |
·细胞迁移检测(Transwell 法) | 第43页 |
·细胞增殖检测(BrdU 掺入比色法) | 第43-44页 |
·重组蛋白刺激和中和抗体封闭实验 | 第44页 |
·siRNA 干扰 | 第44-45页 |
·蛋白免疫印迹(Western blotting) | 第45-46页 |
·RT-PCR | 第46页 |
·酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第46-47页 |
·统计学分析 | 第47页 |
·结果 | 第47-65页 |
·低切应力条件下联合培养细胞 PDGF-BB、TGF-β1、LaminA、LOX 和磷酸化 ERK1/2 表达的变化 | 第47-50页 |
·低切应力条件下细胞迁移和增殖的变化 | 第50-51页 |
·重组 PDGF-BB 和 TGF-β1 对细胞 Lamin A,LOX,磷酸化 ERK1/2 表达及迁移、增殖的影响 | 第51-54页 |
·siRNA 干扰对细胞 PDGF-BB、TGF-β、Lamin A、LOX 和磷酸化 ERK1/2 表达以及细胞迁移和增殖的影响 | 第54-62页 |
·联合培养 VSMCs 通过 PDGF-BB 和 TGF-β1 正反馈调控低切应力诱导的 ECs迁移和增殖 | 第62-65页 |
·讨论 | 第65-70页 |
第3章 高张应变条件下血管平滑肌细胞与内皮细胞相互交流对细胞 Rab28 表达的影响及其机制 | 第70-108页 |
·引言 | 第70-71页 |
·实验仪器与材料 | 第71-73页 |
·主要的试剂溶液成分及配制 | 第71-72页 |
·实验动物和抗体 | 第72-73页 |
·实验仪器 | 第73页 |
·引物和小 RNA | 第73页 |
·实验方法 | 第73-81页 |
·高血压大鼠模型的建立 | 第73-74页 |
·大鼠颈总动脉取材、原位增殖与凋亡测定、Western blotting | 第74-75页 |
·大鼠胸主动脉 ECs 和 VSMCs 原代培养、传代培养和鉴定 | 第75-76页 |
·血管细胞的周期性张应变加载 | 第76-77页 |
·细胞增殖、凋亡和迁移检测、Western blotting | 第77页 |
·条件培养基的制备和使用 | 第77-78页 |
·小 RNA 干扰 | 第78-79页 |
·细胞内囊泡染色 | 第79页 |
·免疫细胞化学染色 | 第79-80页 |
·新生 RNA 标记 | 第80页 |
·免疫共沉淀 | 第80-81页 |
·统计学分析 | 第81页 |
·结果 | 第81-100页 |
·高血压大鼠血管组织的 Rab28 表达及血管细胞的增殖与凋亡 | 第81-85页 |
·高张应变条件下 ECs 和 VSMCs 的 Rab28 表达 | 第85-86页 |
·VSMCs 与 ECs 相互交流对细胞 Rab28 表达的影响 | 第86-88页 |
·VSMCs 条件培养液中血管紧张素 II 的检测和外源性 Ang-II 上调 ECs 的Rab28 表达 | 第88-90页 |
·siRNA 干扰 ECs 的 Rab28 抑制增殖,诱导其凋亡和迁移;抑制 VSMCs 迁移 | 第90-92页 |
·Rab28 在 ECs 中的定位与分布 | 第92-96页 |
·Rab28 与 NF-κB 活化的关系 | 第96-100页 |
·Rab28 与 NF-κB 免疫共沉淀 | 第100页 |
·讨论 | 第100-108页 |
全文小结 | 第108-109页 |
文献综述 | 第109-121页 |
参考文献 | 第121-128页 |
致谢 | 第128-129页 |
攻读博士学位期间已发表的学术论文 | 第129页 |