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牛磺酸抑制心肌成纤维细胞的增殖作用及机制研究

前言第1-6页
中文摘要第6-10页
Abstract第10-20页
第1章 绪论第20-42页
   ·心肌纤维化研究第21-26页
     ·心脏纤维化概述第22页
     ·心肌纤维化时胶原代谢改变第22-26页
   ·心肌纤维化的分子生物学机制第26-36页
     ·PKC 家族第27-30页
     ·NOS 家族第30页
     ·HSP 家族第30-31页
     ·MAPK 信号第31-32页
     ·ROS第32-36页
   ·预防和逆转心肌纤维化途径第36-38页
     ·阻断肾素-血管紧张素-醛固酮系统第36-37页
     ·抗氧化剂第37页
     ·中医药第37页
     ·阻断肾上腺素受体第37页
     ·钙拮抗剂第37页
     ·抑制脯氨酰羟化酶第37页
     ·抑制基质金属蛋白酶第37页
     ·内皮素受体阻断剂第37-38页
   ·牛磺酸抑制和逆转心肌纤维化的研究进展第38-39页
     ·牛磺酸的抗纤维化效应第38页
     ·牛磺酸的抗炎效应第38-39页
     ·牛磺酸抗炎抗纤维化效应的分子机制第39页
   ·本文的主要研究目的、内容和意义第39-42页
第2章 牛磺酸抑制 ISO 诱导 MF 作用的在体实验研究第42-52页
   ·实验的材料第42-43页
     ·实验的药品与试剂第42页
     ·实验动物第42页
     ·仪器第42-43页
   ·实验方法第43-45页
     ·Iso 造模、分组与给药第43页
     ·实验标本的制备第43页
     ·实验指标的检测第43-45页
   ·统计学处理第45-46页
   ·实验结果第46-50页
     ·Tau 对心脏重量指数的影响第46页
     ·Tau 对 Hyp 含量的影响第46页
     ·Tau 对 Iso 诱导 MF 时心肌组织 HE 染色的影响第46-47页
     ·Tau 对心肌组织 SOD 活性和 MDA 含量的影响第47-48页
     ·免疫组织化学染色检测 Tau 对心肌组织中 TGF-β1的影响第48页
     ·Western blot 检测 Tau 对 PKCα在胞膜表达的影响第48-49页
     ·Western blot 检测 Tau 对心肌组织中 iNOS 蛋白在胞浆表达的影响第49-50页
   ·小结第50-52页
第3章 牛磺酸抑制 MYOFBS 增殖实验的初步研究第52-64页
   ·实验材料第52-55页
     ·药品与试剂第52-53页
     ·主要溶液的配制第53-54页
     ·实验动物第54页
     ·主要仪器第54-55页
   ·实验方法第55-58页
     ·MyoFbs 的分离和培养第55页
     ·分组及给药第55-56页
     ·观察细胞形态第56页
     ·检测 myoFbs 的增殖力第56页
     ·I 型胶原、III 型胶原含量的测定(ELISA)第56页
     ·CTGF 和 TGF-β1蛋白的测定 (ELISA 法)第56页
     ·Tau 对 myoFbs 的 iNOS 活力及 NO 含量的影响第56-57页
     ·采用流式细胞仪分析 myoFbs 周期的分布第57页
     ·Western blot 检测 p-PKCα蛋白的表达第57-58页
     ·流式细胞仪检测 p-ERK1/2 蛋白的表达第58页
     ·统计学分析第58页
   ·结果第58-63页
     ·MyoFbs 的细胞鉴定第58-59页
     ·Tau 对 myoFbs 形态学的影响第59页
     ·Tau 对 myoFbs 增殖的影响第59-60页
     ·Tau 对 myoFbs 分泌 I 和 III 型胶原含量的影响第60页
     ·Tau 对 TGF-β1和 CTGF 蛋白含量的影响第60页
     ·Tau 对 myoFbs 的 iNOS 活力及 NO 含量的影响第60-61页
     ·流式细胞术检测 myoFbs 周期分布第61页
     ·流式细胞仪检测 p-ERK1/2 在核的蛋白表达第61-62页
     ·Western blotting 检测 p-PKCα蛋白的表达第62-63页
   ·小结第63-64页
第4章 TAU通过 PKCΑ-INOS 途径抑制 MYOFBS 的增殖第64-76页
   ·实验材料第64页
     ·实验药品与试剂第64页
     ·实验动物第64页
     ·实验仪器第64页
   ·实验的方法第64-67页
     ·大乳鼠 myoFbs 的培养第64页
     ·实验细胞的分组第64页
     ·MTT 法检测 myoFbs 增殖活力第64-65页
     ·流式细胞术对 myoFbs 周期分布的检测第65页
     ·Tau 对细胞培养液中 iNOS 活力及 NO 含量的影响第65页
     ·免疫细胞化学染色检测 PKCα和 iNOS 蛋白的表达第65-66页
     ·荧光共聚焦检测 p-PKCα和 iNOS 蛋白的表达第66页
     ·Western blot 检测 p-PKCα和 iNOS 蛋白的表达第66-67页
     ·统计学进行分析第67页
   ·实验结果第67-74页
     ·MTT 法检测 myoFbs 增殖活力第67页
     ·流式细胞仪检测 myoFbs 周期的分布第67-68页
     ·Tau 和 D4681 对 myoFbs 的 iNOS 活力及 NO 含量的影响第68-69页
     ·免疫细胞化学染色和荧光共聚焦检测 PKCα的膜转位及蛋白的表达第69-70页
     ·荧光共聚焦和免疫化学染色检测胞浆中 iNOS 的表达第70-71页
     ·Western blott 检测 p-PKCα和 iNOS 蛋白的表达第71-74页
   ·小结第74-76页
第5章 TAU 通过 PKCΑ-ERK1/2 途径抑制 MYOFBS 的增殖第76-86页
   ·实验的材料与方法第76页
     ·实验药品与试剂第76页
     ·实验动物第76页
     ·实验仪器第76页
   ·实验方法第76-78页
     ·Wistar 乳鼠 myoFbs 分离与培养第76页
     ·实验分组第76-77页
     ·MTT 法检测细胞存活率第77页
     ·流式细胞术检测 myoFbs 周期分布第77页
     ·免疫细胞化学染色检测 p-PKCα和 p-ERK1/2 蛋白的表达第77-78页
     ·荧光共聚焦检测 p-PKCα膜转位和 p-ERK1/2 的核转位及表达第78页
     ·Western blot 检测 myoFbs 内的 p-PKCα和 p-ERK1/2 的表达第78页
     ·统计学分析第78页
   ·实验结果第78-84页
     ·MTT 检测 D4681 和 PD98095 对 myoFbs 生长及增殖率的影响第78-79页
     ·D4681 和 PD98095 对 myoFbs 周期分布的影响第79页
     ·免疫细胞化学染色检测 p-PKCα和 p-ERK1/2 的表达第79-81页
     ·荧光共聚焦检测 p-PKCα和 p-ERK1/2 的表达第81-82页
     ·Western blot 检测 p-PKCα和 p-ERK1/2 表达第82-84页
   ·小结第84-86页
第6章 TAU通过 ROS 途径抑制 MYOFBS 的增殖第86-92页
   ·实验材料与方法第86页
     ·实验试剂与药品第86页
     ·实验动物第86页
     ·实验仪器第86页
   ·实验方法第86-87页
     ·Wistar 乳鼠 myoFbs 培养第86页
     ·实验分组第86页
     ·MTT 法检测细胞存活率第86页
     ·MyoFbs 内·OH 含量测定:第86页
     ·MyoFbs内ROS的测定第86-87页
     ·免疫细胞化学染色检测 PKCα膜转位和表达第87页
     ·荧光共聚焦检测 p-PKCα膜转位和表达第87页
     ·统计学分析第87页
   ·实验结果第87-90页
   ·小结第90-92页
第7章 讨论第92-106页
第8章 结论第106-108页
参考文献第108-125页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第125-126页
致谢第126页

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