根癌农杆菌介导的CaNZ基因转化烟草的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 主要英文缩略词 | 第7-11页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| ·植物基因工程进展 | 第11页 |
| ·植物基因的转化方法 | 第11-15页 |
| ·DNA直接转化法 | 第11-12页 |
| ·植物生殖细胞转化 | 第12-13页 |
| ·脂质体介导转化 | 第13页 |
| ·病毒载体转化 | 第13页 |
| ·农杆菌介导的植物转化 | 第13-15页 |
| ·钙调蛋白研究进展 | 第15-19页 |
| ·钙调蛋白 | 第15-16页 |
| ·钙调蛋白的功能 | 第16-19页 |
| ·CaN基因的研究进展 | 第19-23页 |
| ·钙调磷酸酶 | 第19-20页 |
| ·钙调磷酸酶的结构组成与性质 | 第20-23页 |
| ·本实验的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-33页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株、植物转化载体 | 第25页 |
| ·主要的化学试剂及仪器设备 | 第25-26页 |
| ·常用储存溶液 | 第26页 |
| ·生化试剂与配制 | 第26页 |
| ·工具酶及其它分子试剂 | 第26-27页 |
| ·植物培养基 | 第27页 |
| ·细菌培养基 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-33页 |
| ·烟草再生体系的建立 | 第27-28页 |
| ·抗生素对选择压力的测定 | 第28页 |
| ·转化子检测 | 第28页 |
| ·根癌农杆菌增殖曲线的测定 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第29-30页 |
| ·转化条件的优化 | 第30页 |
| ·转化植株的组织学观察 | 第30-32页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-45页 |
| ·烟草再生体系的建立 | 第33-36页 |
| ·不同激素组合对烟草再生的影响 | 第33-34页 |
| ·激素浓度对诱导生根的影响 | 第34-35页 |
| ·外植体叶龄对外植体再生能力的影响 | 第35-36页 |
| ·抗生素对选择压力的测定 | 第36-37页 |
| ·卡那霉素对愈伤组织形成的选择压力 | 第36页 |
| ·卡那霉素对生根的选择压力 | 第36-37页 |
| ·羧苄青霉素(Cb)脱菌浓度的确定 | 第37页 |
| ·转化子的检测 | 第37-38页 |
| ·根癌农杆菌增殖曲线的测定 | 第38页 |
| ·转化条件的优化分析 | 第38-41页 |
| ·叶片预培养对转化的影响 | 第38-39页 |
| ·菌液浓度对转化产生的影响 | 第39-40页 |
| ·浸染时间对转化的影响 | 第40-41页 |
| ·共培养时间及方法对转化 | 第41页 |
| ·组织学结果观察 | 第41-43页 |
| ·转化植株PCR检测的结果 | 第43-44页 |
| ·转基因植株的表型鉴定 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| ·培养基中的激素效应 | 第45页 |
| ·组织培养中的褐化现象 | 第45-46页 |
| ·抗生素筛选浓度的确定 | 第46页 |
| ·农杆菌对外植体的转化 | 第46-47页 |
| ·农杆菌菌株对转化的影响 | 第46页 |
| ·农杆菌浸染时间对转化效率的影响 | 第46-47页 |
| ·菌液浓度对转化的影响 | 第47页 |
| ·农杆菌与外植体的共培养 | 第47-48页 |
| ·共培养的方法 | 第47页 |
| ·最佳共培养时间 | 第47-48页 |
| ·PCR检测 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 附录一 | 第60-61页 |
| 附录二 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
