中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 水稻广亲和基因S5-n功能分析及作用机理研究 | 第14-64页 |
1 文献综述 | 第14-29页 |
·水稻籼粳杂种不育和广亲和基因研究进展 | 第14-23页 |
·水稻籼粳杂种不育现象的提出 | 第14-15页 |
·水稻籼粳杂种不育的研究进展 | 第15-21页 |
·籼粳遗传分化与杂种不育的关系 | 第15页 |
·遗传模型的提出 | 第15-17页 |
·水稻籼粳亚种间杂种不育的细胞学研究 | 第17-19页 |
·籼粳亚种组合偏分离现象研究 | 第19-21页 |
·水稻广亲和基因研究进展 | 第21-23页 |
·水稻广亲和概念的提出 | 第21页 |
·广亲和基因的定位 | 第21-22页 |
·广亲和基因S5的精细定位 | 第22-23页 |
·植物雌配子体发育研究进展 | 第23-28页 |
·植物雌配子体的发育过程 | 第23-25页 |
·植物雌配子体发育相关基因及最新研究进展 | 第25-28页 |
·大孢子发生时期 | 第25-26页 |
·雌配子体发生时期 | 第26-28页 |
·研究基因表达及功能分析的实验方法 | 第28-29页 |
2 本研究的目的与意义 | 第29-30页 |
3 材料和方法 | 第30-39页 |
·获得S5候选基因ORF4和ORF5在三个亲本中的全长cDNA | 第30-34页 |
·使用的水稻品种和材料 | 第30页 |
·RNA的提取 | 第30-31页 |
·使用RACE方法获得ORF4和ORF5的5′和3′UTR序列 | 第31-32页 |
·实验步骤 | 第31页 |
·PCR反应条件 | 第31-32页 |
·设计引物逐步延伸获得ORF4和ORF5全长cDNA序列 | 第32-34页 |
·cDNA的反转录 | 第32-34页 |
·PCR反应条件和体系 | 第34页 |
·表达分析 | 第34-35页 |
·材料 | 第34页 |
·RNA的提取和RT-PCR方法如前所述 | 第34-35页 |
·籼粳差异位点分析 | 第35页 |
·材料 | 第35页 |
·引物 | 第35页 |
·实验步骤 | 第35页 |
·检测ORF5在55个不同基因型材料中的表达量 | 第35-38页 |
·水稻材料 | 第35-37页 |
·实验步骤 | 第37-38页 |
·RNA的抽提和cDNA反转录实验步骤如前所述 | 第37页 |
·Real-time PCR实验步骤和反应体系 | 第37-38页 |
·检测杂种胚囊育性 | 第38-39页 |
·材料 | 第38页 |
·爱氏苏木精整体染色—透明法观察胚囊育性 | 第38-39页 |
4 结果与分析 | 第39-59页 |
·获得S5候选基因ORF4和ORF5在三个亲本中的全长cDNA | 第39-43页 |
·使用RACE方法获得ORF4的5′和3′UTR序列 | 第39页 |
·设计引物逐步延伸获得ORF4全长cDNA序列 | 第39-41页 |
·使用RACE方法获得ORF5的5′和3′UTR序列 | 第41-42页 |
·设计引物逐步延伸获得ORF5全长cDNA序列 | 第42-43页 |
·对ORF5的表达分析 | 第43-51页 |
·三个亲本以及Ballila和南京11杂交F_1代材料表达分析 | 第43-47页 |
·RNA抽提 | 第43页 |
·表达分析 | 第43-47页 |
·ORF5(NJ11-cDNA)转化Ballila的转基因植株T_1代材料表达分析 | 第47-48页 |
·RNA抽提 | 第47-48页 |
·表达分析 | 第48页 |
·ORF5(NJ11-cDNA)转化02428的转基因植株T_1代材料表达分析 | 第48-50页 |
·RNA抽提 | 第48-49页 |
·表达分析 | 第49-50页 |
·超表达植株表达量检测 | 第50-51页 |
·检测ORF5在55个基因型材料中的表达量 | 第51-57页 |
·对ORF4表达分析 | 第57页 |
·籼粳差异位点分析 | 第57-59页 |
5 讨论 | 第59-64页 |
·ORF4和ORF5基因结构和位置探讨 | 第59-60页 |
·ORF4和ORF5编码蛋白讨论 | 第60-62页 |
·ORF4和ORF5作用模式 | 第62-63页 |
·小结和展望 | 第63-64页 |
第二章 光敏核不育基因pms3功能分析及作用机理研究 | 第64-88页 |
6 文献综述 | 第64-73页 |
·植物雄配子体发育研究进展 | 第64-66页 |
·植物雄配子体发育过程 | 第64-65页 |
·植物雄配子体发育相关基因及最新研究进展 | 第65-66页 |
·水稻细胞质雄性不育研究进展 | 第66-69页 |
·水稻细胞质雄性不育机制和类型 | 第66-67页 |
·恢复基因的结构特征 | 第67-69页 |
·水稻光温敏雄性不育研究进展 | 第69-72页 |
·水稻光温敏雄性不育现象的发现和种质资源 | 第69页 |
·光温敏雄性不育水稻的育性转换模式与生理生化特性 | 第69-71页 |
·光温敏雄性不育基因的等位性研究与定位 | 第71-72页 |
·水稻基因组学及生物信息学的研究 | 第72-73页 |
7 本研究的目的与意义 | 第73-74页 |
8 材料和方法 | 第74-76页 |
·获得pms3候选基因Gene M和Gene SNP的全长cDNA及表达谱分析 | 第74-75页 |
·使用的水稻品种和材料 | 第74页 |
·RNA的提取、RT-PCR、Real-time PCR和RACE的实验步骤同第一章 | 第74-75页 |
·原位杂交 | 第75-76页 |
·组织切片 | 第75页 |
·原位杂交步骤 | 第75-76页 |
9 结果与分析 | 第76-84页 |
·获得pms3候选基因Gene M和Gene SNP的全长cDNA | 第76-78页 |
·通过RT-PCR确定Gone M的四条转录本 | 第76-77页 |
·使用RACE方法获得Gene SNP的5′和3′UTR序列 | 第77-78页 |
·Gene M和Gene SNP基因结构比较与分析 | 第78页 |
·表达谱分析 | 第78-83页 |
·通过RT-PCR分析Gene M的四条转录本的表达谱 | 第78-81页 |
·通过Real-time PCR分析Gene SNP和GENE M3的表达谱 | 第81-83页 |
·原位杂交 | 第83-84页 |
10 讨论 | 第84-88页 |
·选择性剪切 | 第84-85页 |
·micro RNA | 第85-86页 |
·pms3候选基因作用模式的一些思考 | 第86-87页 |
·前景与展望 | 第87-88页 |
第三章 水稻Hsp20基因家族分析 | 第88-118页 |
11 文献综述 | 第88-93页 |
·热激蛋白概述 | 第88-89页 |
·热激蛋白的表达调控 | 第89-90页 |
·植物Hsp20家族结构及分类 | 第90-91页 |
·植物Hsp20蛋白结构 | 第90-91页 |
·植物Hsp20基因家族分类 | 第91页 |
·Hsp20基因的功能和最新研究进展 | 第91-93页 |
·Hsp20蛋白具有分子伴侣功能 | 第91-92页 |
·Hsp20蛋白与耐热性相关 | 第92页 |
·Hsp20基因在其他逆境胁迫中发挥作用 | 第92-93页 |
12 本研究的目的与意义 | 第93-94页 |
13 材料和方法 | 第94-97页 |
·数据库搜索 | 第94页 |
·基因染色体分布与基因组倍增 | 第94-95页 |
·基因和蛋白结构的分析 | 第95页 |
·进化树分析 | 第95页 |
·水稻OsHsp20基因热激诱导实验 | 第95-96页 |
·芯片表达谱分析 | 第96-97页 |
14 结果与分析 | 第97-115页 |
·OsHsp20家族在水稻中的数量 | 第97-98页 |
·OsHsp20基因在染色体上的分布和基因组倍增 | 第98-100页 |
·OsHsp20基因和蛋白结构 | 第100-102页 |
·水稻和拟南芥Hsp20家族进化分析 | 第102-104页 |
·OsHsp20基因热激诱导分析 | 第104-105页 |
·OsHsp20基因芯片表达谱分析 | 第105-108页 |
·复制基因表达模式的分析 | 第108-109页 |
·杂种优势分析 | 第109-115页 |
15 讨论 | 第115-118页 |
·热激反应 | 第115-116页 |
·水稻OsHsp20基因进化与功能的关系 | 第116-117页 |
·水稻OsHsp20基因家族都表现出杂种优势现象 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-136页 |
致谢 | 第136-137页 |
附录Ⅰ:部分试验的详细步骤 | 第137-145页 |
附录Ⅱ:附表1、附表2和附表3 | 第145-152页 |
附录Ⅲ:作者简介 | 第152-153页 |