| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子生物学研究进展 | 第1-20页 |
| 1 PRRSV的生物学特性 | 第7-8页 |
| 2 PRRSV的基因组结构 | 第8-10页 |
| ·开放阅读框架 | 第8页 |
| ·亚基因组结构 | 第8-9页 |
| ·3'端非编码序列 | 第9页 |
| ·先导序列和先导序列连续位置上的保守序列 | 第9-10页 |
| 3 病毒蛋白 | 第10-13页 |
| ·非结构蛋白 | 第10页 |
| ·GP2蛋白 | 第10-11页 |
| ·GP3蛋白 | 第11页 |
| ·GP4蛋白 | 第11页 |
| ·GP5蛋白 | 第11-12页 |
| ·M蛋白 | 第12页 |
| ·N蛋白 | 第12-13页 |
| 4 病毒的变异 | 第13-14页 |
| 5 流行病学 | 第14-15页 |
| 6 PRRSV的分子生物学诊断 | 第15-16页 |
| ·RT-PCR技术 | 第15-16页 |
| ·核酸探针技术 | 第16页 |
| 7 猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗的研究 | 第16-19页 |
| ·基因疫苗 | 第17-18页 |
| ·活载体疫苗 | 第18页 |
| ·抗独特型抗体疫苗 | 第18页 |
| ·亚单位疫苗 | 第18-19页 |
| 8 结语 | 第19-20页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定与生物学特性研究 | 第20-29页 |
| 摘要 | 第20页 |
| 1 材料 | 第20-22页 |
| ·病料 | 第20-21页 |
| ·血清与病毒 | 第21页 |
| ·细胞 | 第21页 |
| ·MEM培养基及配制 | 第21页 |
| ·犊牛血清 | 第21页 |
| ·PRRSV抗体诊断试剂盒 | 第21页 |
| ·主要对剂 | 第21页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-24页 |
| ·病毒的分离与培养 | 第22页 |
| ·间接荧光抗体试验(IFA) | 第22页 |
| ·病毒纯化与电镜观察 | 第22页 |
| ·病毒TCID_(50)滴定及中和试验 | 第22-23页 |
| ·RT-FPCR检测 | 第23-24页 |
| ·代谢抑制试验 | 第24页 |
| ·细胞适应性试验 | 第24页 |
| ·动物回归试验 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-27页 |
| ·病毒分离培养 | 第24-25页 |
| ·间接荧光抗体试验(IFA) | 第25-26页 |
| ·TCID_(50)滴定及中和试验结果 | 第26页 |
| ·分离病毒的PCR鉴定 | 第26页 |
| ·代谢抑制试验 | 第26页 |
| ·细胞适应性结果 | 第26-27页 |
| ·动物回归试验结果 | 第27页 |
| 4 讨论 | 第27-28页 |
| ·关于PRRSV的分离培养 | 第27-28页 |
| ·关于PRRSV的鉴定 | 第28页 |
| 5 小结 | 第28-29页 |
| 第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒分离毒株LX株和Jx株全基因组序列测定与分析 | 第29-53页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| 1 材料 | 第30-32页 |
| ·病毒 | 第30-31页 |
| ·载体和菌株 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·主要溶液的配制 | 第31页 |
| ·PRRSV分离株核苷酸序列 | 第31-32页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-37页 |
| ·引物设计与合成 | 第32-34页 |
| ·感染细胞总RNA提取 | 第34页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第35页 |
| ·PCR产物的克隆与序列测定 | 第35-37页 |
| ·基因组不同区域序列比对与分析 | 第37页 |
| ·5'-UTR RNA二级结构分析 | 第37页 |
| ·系统发育进化树的绘制 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-51页 |
| ·各个基因片段的RT-PCR扩增结果 | 第37-38页 |
| ·重组质粒DNA PCR鉴定 | 第38-39页 |
| ·序列测定与拼接 | 第39页 |
| ·序列分析 | 第39-40页 |
| ·分离株5’-UTR核苷酸序列比对结果 | 第40-41页 |
| ·不同分离株Nsp2核苷酸及推导氨基酸序列比对结果 | 第41-42页 |
| ·不同分离株ORF2-7核苷酸及推导氨基酸序列比对结果 | 第42-48页 |
| ·不同分离株5’-UTR二级结构预测与比较 | 第48-50页 |
| ·系统发育进化树的绘制 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| ·关于PRRSV基因组与病毒变异 | 第51页 |
| ·关于PRRSV的基因分型 | 第51-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 第四章 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(LX株)的研制与应用 | 第53-69页 |
| 摘要 | 第53-54页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| ·毒种 | 第54页 |
| ·Marc-145细胞 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·实验动物 | 第54-55页 |
| ·PRRSV抗体诊断试剂盒 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-58页 |
| ·生产用毒种制备与鉴定 | 第55页 |
| ·制苗材料的选择 | 第55页 |
| ·制苗用细胞毒液的繁殖 | 第55页 |
| ·灭活 | 第55-56页 |
| ·半成品检验 | 第56页 |
| ·乳化 | 第56页 |
| ·安全性试验 | 第56-57页 |
| ·免疫攻毒试验 | 第57页 |
| ·最小免疫剂量测定 | 第57页 |
| ·免疫产生期与免疫持续期试验 | 第57-58页 |
| ·疫苗中间试剂 | 第58页 |
| ·疫苗的临床应用 | 第58页 |
| ·新兽药申报 | 第58页 |
| 3 结果 | 第58-68页 |
| ·毒种的繁殖与鉴定 | 第58-59页 |
| ·半成品检验 | 第59页 |
| ·安全性试验结果 | 第59-61页 |
| ·免疫攻毒试验结果 | 第61-62页 |
| ·最小免疫剂量试验结果 | 第62-63页 |
| ·免疫持续期试验 | 第63-65页 |
| ·中间试制 | 第65-66页 |
| ·临床应用 | 第66-67页 |
| ·新兽药申报 | 第67-68页 |
| 4 小结与讨论 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附件 农业部兽药审评中心评审文件 | 第76-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
