摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第11-23页 |
·研究背景与意义 | 第11-12页 |
·蚜虫类生物学特性 | 第12页 |
·豌豆蚜基因组 | 第12-13页 |
·蚜虫唾液腺 | 第13页 |
·RNAi技术的研究概况 | 第13-17页 |
·RNAi的分子作用机制 | 第14-15页 |
·RNAi的功能 | 第15页 |
·RNAi的系统性 | 第15页 |
·RNAi的影响因素 | 第15-16页 |
·RNAi技术的应用 | 第16-17页 |
·荧光定量PCR技术的研究现状 | 第17-21页 |
·FQ-PCR技术的基本原理 | 第17-18页 |
·FQ-PCR的荧光化学 | 第18-19页 |
·FQ-PCR的解析方法 | 第19-20页 |
·参照系的研究 | 第20页 |
·FQ-PCR的应用 | 第20-21页 |
·豌豆蚜RNAi进展 | 第21页 |
·本研究的目的 | 第21页 |
·本研究的创新性 | 第21-23页 |
材料与方法 | 第23-38页 |
·材料 | 第23-24页 |
·供试昆虫 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·常用溶液配制 | 第24-25页 |
·豌豆蚜的准备 | 第25页 |
·豌豆蚜唾液腺基因信息分析 | 第25-26页 |
·豌豆蚜唾液腺未知功能蛋白家族的克隆 | 第26-29页 |
·未知功能蛋白家族的PCR扩增、克隆及序列分析测定 | 第27-29页 |
·豌豆蚜唾液腺未知功能蛋白家族的时空表达 | 第29-31页 |
·不同发育阶段及组织的总RNA提取及cDNA合成 | 第29-30页 |
·SQRT-PCR反应体系与条件 | 第30-31页 |
·豌豆蚜的RNAi | 第31-34页 |
·dsRNA的合成 | 第31-33页 |
·dsRNA的注射 | 第33页 |
·定量分析 | 第33-34页 |
·统计分析 | 第34-38页 |
·生物信息学分析 | 第34-35页 |
·数据统计与分析 | 第35-38页 |
结果与分析 | 第38-49页 |
·豌豆蚜唾液腺基因信息分析 | 第38-39页 |
·豌豆蚜的RNAi结果 | 第39-43页 |
·dsRNA的制备 | 第39-40页 |
·豌豆蚜基因的RNAi | 第40-43页 |
·豌豆蚜唾液蛋白家族的克隆和序列特征 | 第43-45页 |
·RNA纯度的检测 | 第43-44页 |
·未知功能蛋白家族的克隆 | 第44页 |
·未知功能蛋白家族的序列特征 | 第44-45页 |
·未知功能蛋白家族系统进化及基因组分析 | 第45-46页 |
·豌豆蚜唾液腺未知功能蛋白家族的时空表达 | 第46-49页 |
·未知功能蛋白家族的不同发育阶段的表达 | 第46-47页 |
·未知功能蛋白家族的组织分布 | 第47-49页 |
讨论 | 第49-56页 |
·影响豌豆蚜RNAi的因素 | 第49页 |
·影响RNA提取的因素 | 第49-52页 |
·定量PCR检测 | 第52-53页 |
·豌豆蚜唾液腺未知功能蛋白家族的表达模式分析 | 第53-54页 |
·豌豆蚜RNAi的应用与展望 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
附录一:符号说明 | 第57-58页 |
附录二:豌豆蚜RNAi基因序列 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表论文 | 第69页 |