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结核分枝杆菌新型诊断标识筛选及牛结核病原学流行病学调查

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第1章 前言第11-27页
   ·问题的由来第11页
   ·研究综述第11-25页
     ·结核分枝杆菌复合群第11-16页
     ·非结核分枝杆菌第16-17页
     ·用于人与动物结核病诊断的分子标识第17-20页
     ·人与动物结核病的分子流行病学第20-25页
   ·目的与意义第25-27页
第2章 材料与方法第27-39页
   ·材料第27-29页
     ·菌种与载体第27页
     ·引物第27-28页
     ·试剂及其配方第28-29页
     ·培养基第29页
     ·血清第29页
   ·方法第29-39页
     ·目的基因查找第29-30页
     ·引物设计第30页
     ·重组质粒的构建第30-33页
     ·阳性血清的吸附第33-34页
     ·筛选第34-35页
     ·蛋白的表达与纯化第35-36页
     ·对潜在蛋白进行复筛第36-37页
     ·临床材料的采集第37页
     ·分枝杆菌的培养与鉴定第37页
     ·分离株的基因型鉴定(Spoligotyping)第37-39页
第3章 结果第39-49页
   ·引物设计第39页
   ·目的基因的克隆与鉴定第39-41页
   ·阳性血清的吸附效果监测第41-42页
   ·阳性克隆子的筛选鉴定第42-44页
   ·蛋白表达与纯化第44-45页
   ·目的蛋白的临床血清检测与验证第45-46页
     ·用western-blot方法对蛋白进行检测第45页
     ·用ELISA方法对蛋白进行检测第45-46页
   ·临床样本细菌分离鉴定第46-47页
     ·对于皮试阳性牛的组织病料的细菌分离第46页
     ·对于皮试阳性牛的鼻拭子和奶样中的细菌分离第46页
     ·对于屠宰场随机样本的细菌分离第46-47页
   ·分离菌株的抗酸染色第47页
   ·临床流行菌株的基因型特征第47-49页
第4章 讨论第49-54页
   ·分子诊断标识的筛选第49-51页
     ·现有诊断方法的不足第49页
     ·阳性血清的非特异性抗体的处理第49-50页
     ·重组质粒的克隆与表达第50页
     ·目的蛋白的提取第50页
     ·目的蛋白的western Blot检测第50-51页
     ·目的蛋白的临床血清样本的检测第51页
   ·结核病的分子流行病学调查第51-54页
     ·带菌率第51-52页
     ·分型的结果第52页
     ·细菌培养方法讨论第52-53页
     ·细菌的染色鉴定第53页
     ·细菌分型方法讨论第53-54页
参考文献第54-60页
附录第60-69页
 附录1 RD区引物序列第60-68页
 附录2 研究生期间所发表的论文第68-69页
致谢第69页

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