摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第1章 前言 | 第11-27页 |
·问题的由来 | 第11页 |
·研究综述 | 第11-25页 |
·结核分枝杆菌复合群 | 第11-16页 |
·非结核分枝杆菌 | 第16-17页 |
·用于人与动物结核病诊断的分子标识 | 第17-20页 |
·人与动物结核病的分子流行病学 | 第20-25页 |
·目的与意义 | 第25-27页 |
第2章 材料与方法 | 第27-39页 |
·材料 | 第27-29页 |
·菌种与载体 | 第27页 |
·引物 | 第27-28页 |
·试剂及其配方 | 第28-29页 |
·培养基 | 第29页 |
·血清 | 第29页 |
·方法 | 第29-39页 |
·目的基因查找 | 第29-30页 |
·引物设计 | 第30页 |
·重组质粒的构建 | 第30-33页 |
·阳性血清的吸附 | 第33-34页 |
·筛选 | 第34-35页 |
·蛋白的表达与纯化 | 第35-36页 |
·对潜在蛋白进行复筛 | 第36-37页 |
·临床材料的采集 | 第37页 |
·分枝杆菌的培养与鉴定 | 第37页 |
·分离株的基因型鉴定(Spoligotyping) | 第37-39页 |
第3章 结果 | 第39-49页 |
·引物设计 | 第39页 |
·目的基因的克隆与鉴定 | 第39-41页 |
·阳性血清的吸附效果监测 | 第41-42页 |
·阳性克隆子的筛选鉴定 | 第42-44页 |
·蛋白表达与纯化 | 第44-45页 |
·目的蛋白的临床血清检测与验证 | 第45-46页 |
·用western-blot方法对蛋白进行检测 | 第45页 |
·用ELISA方法对蛋白进行检测 | 第45-46页 |
·临床样本细菌分离鉴定 | 第46-47页 |
·对于皮试阳性牛的组织病料的细菌分离 | 第46页 |
·对于皮试阳性牛的鼻拭子和奶样中的细菌分离 | 第46页 |
·对于屠宰场随机样本的细菌分离 | 第46-47页 |
·分离菌株的抗酸染色 | 第47页 |
·临床流行菌株的基因型特征 | 第47-49页 |
第4章 讨论 | 第49-54页 |
·分子诊断标识的筛选 | 第49-51页 |
·现有诊断方法的不足 | 第49页 |
·阳性血清的非特异性抗体的处理 | 第49-50页 |
·重组质粒的克隆与表达 | 第50页 |
·目的蛋白的提取 | 第50页 |
·目的蛋白的western Blot检测 | 第50-51页 |
·目的蛋白的临床血清样本的检测 | 第51页 |
·结核病的分子流行病学调查 | 第51-54页 |
·带菌率 | 第51-52页 |
·分型的结果 | 第52页 |
·细菌培养方法讨论 | 第52-53页 |
·细菌的染色鉴定 | 第53页 |
·细菌分型方法讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录 | 第60-69页 |
附录1 RD区引物序列 | 第60-68页 |
附录2 研究生期间所发表的论文 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |