| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 主要符号对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-28页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第10-18页 |
| ·Wnt 配体的加工与分泌运输过程 | 第12-13页 |
| ·经典 Wnt 信号转导途径 | 第13-16页 |
| ·调控 β-catenin 稳定性的研究 | 第16-17页 |
| ·关于 β-catenin 入核的调控机制 | 第17-18页 |
| ·PAK1 激酶相关研究 | 第18-24页 |
| ·PAK 家族成员简介 | 第18-19页 |
| ·PAK1-3 结构特征 | 第19页 |
| ·PAK1-3 激活机制 | 第19-21页 |
| ·PAK1 的生物学功能 | 第21-23页 |
| ·PAK1 在 Wnt 信号通路中的研究进展 | 第23-24页 |
| ·PAK1 小分子抑制剂的研究进展 | 第24页 |
| ·结肠癌发生的相关调控机制 | 第24-27页 |
| ·Wnt/β -catenin 信号与结肠癌发生 | 第24-26页 |
| ·EGFR 信号与结肠癌发生 | 第26-27页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第27-28页 |
| 第2章 材料与方法 | 第28-40页 |
| ·主要实验仪器 | 第28页 |
| ·实验材料 | 第28-31页 |
| ·细胞株 | 第28页 |
| ·菌株 | 第28-29页 |
| ·质粒 | 第29页 |
| ·抗体 | 第29页 |
| ·酶类 | 第29页 |
| ·其它商业试剂 | 第29-30页 |
| ·主要溶液配制 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-40页 |
| ·分子克隆 | 第31-32页 |
| ·定点突变克隆的构建 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌诱导蛋白表达实验 | 第33页 |
| ·细胞培养 | 第33页 |
| ·间接免疫荧光 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE 及免疫印迹 | 第34页 |
| ·免疫共沉淀 | 第34-35页 |
| ·细胞转染 | 第35页 |
| ·免疫组织化学实验 | 第35-36页 |
| ·稳定细胞系的筛选 | 第36页 |
| ·细胞质与细胞核的分离与纯化 | 第36页 |
| ·体外磷酸化 | 第36-37页 |
| ·报告基因检测 | 第37页 |
| ·半定量 RT-PCR 实验 | 第37-38页 |
| ·细胞周期分析 | 第38页 |
| ·克隆形成实验 | 第38-40页 |
| 第3章 Rac1/PAK1 在结肠癌细胞中的功能及作用机制研究 | 第40-66页 |
| ·PAK1 对于结肠癌细胞的增殖是必需的 | 第40-42页 |
| ·PAK1 调节结肠癌细胞中 β-catenin 蛋白水平 | 第42-47页 |
| ·PAK1 结合 β-catenin 并磷酸化其第 675 位丝氨酸 | 第47-53页 |
| ·Ser675 磷酸化的β -catenin 具有更强的稳定性和转录活性 | 第53-58页 |
| ·Rac1 通过 PAK1 调节结肠癌细胞中 -catenin 蛋白水平 | 第58-61页 |
| ·Rac1/PAK1 激活与 APC 失活协同激活 Wnt 信号 | 第61-63页 |
| ·PAK1 高表达与结肠癌组织中β -catenin 积累呈现相关性 | 第63-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 第4章 PAK1 在经典 Wnt 信号通路中的功能初探 | 第66-72页 |
| ·Wnt3a 能够激活 PAK1 | 第66-67页 |
| ·PAK1 参与经典 Wnt 信号传递 | 第67-70页 |
| ·Wnt3a 诱导β -catenin S675 位点磷酸化 | 第70-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 第5章 总结与展望 | 第72-75页 |
| ·总结与讨论 | 第72-74页 |
| ·总结 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·还需要探索的问题 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 附录 A RT-PCR 引物及 siRNA/shRNA 序列 | 第91-92页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第92页 |
