| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·课题的提出 | 第12-13页 |
| ·影响根癌农杆菌介导遗传转化的因素 | 第13-15页 |
| ·高效的组织培养体系是转化体系的基础 | 第13页 |
| ·转化受体 | 第13-14页 |
| ·农杆菌类型、预培养和共培养 | 第14页 |
| ·抽真空处理和SAAT处理 | 第14-15页 |
| ·转化过程中的干燥处理 | 第15页 |
| ·抗除草剂基因转化的概述 | 第15-23页 |
| ·除草剂的作用机理 | 第16-17页 |
| ·抗除草剂基因的抗性机理 | 第17-18页 |
| ·获得转抗除草剂基因植物的方法 | 第18-20页 |
| ·基因枪介导的基因转移 | 第18-19页 |
| ·花粉管通道法接到的基因转移 | 第19页 |
| ·PEG介导的基因转移 | 第19页 |
| ·农杆菌介导的基因转移 | 第19-20页 |
| ·抗草丁膦和草甘膦转基因作物研究进展 | 第20-23页 |
| ·抗草丁膦的转基因作物 | 第20-21页 |
| ·抗草甘膦的转基因作物 | 第21-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·转化受体材料 | 第24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·转化试验中用到的培养基配方 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·再生体系优化 | 第26-27页 |
| ·不同浓度NAA对胚性愈伤状态的影响 | 第26页 |
| ·高浓度2,4-D对胚性愈伤状态的影响 | 第26-27页 |
| ·植物凝胶对愈伤状态的影响 | 第27页 |
| ·转化体系优化 | 第27-28页 |
| ·干燥处理对GFP瞬时表达率的影响 | 第27页 |
| ·不同的菌液制备方法对GFP瞬时表达率的影响 | 第27页 |
| ·纤维素酶和果胶酶处理对转化影响的初步探索 | 第27-28页 |
| ·根癌农杆菌介导的BAR和EPSPs基因转化盾叶薯蓣 | 第28-33页 |
| ·盾叶薯蓣胚性愈伤对筛选试剂草丁膦的敏感性实验 | 第28页 |
| ·盾叶薯蓣胚性愈伤对筛选试剂草甘膦的敏感性实验 | 第28页 |
| ·农杆菌介导的盾叶薯蓣遗传转化 | 第28-29页 |
| ·转BAR基因和EPSPs基因再生植株的PCR检测 | 第29-30页 |
| ·转BAR基因再生植株的Southern分析 | 第30-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-43页 |
| ·不同浓度NAA对胚性愈伤诱导率的影响 | 第33页 |
| ·高浓度2,4-D对胚性愈伤诱导率的影响 | 第33-34页 |
| ·植物凝胶对愈伤状态的影响 | 第34页 |
| ·干燥处理对GFP瞬时表达的影响 | 第34-36页 |
| ·不同的菌液制备方法对GFP瞬时表达率的影响 | 第36页 |
| ·纤维素酶和果胶酶处理对转化影响的初步探索 | 第36-37页 |
| ·盾叶薯蓣胚性愈伤对筛选剂草丁膦和草甘膦的敏感性实验 | 第37-39页 |
| ·转基因再生植株的获得 | 第39-41页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第41页 |
| ·转BAR基因再生植株的Southern分析 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| ·再生体系和转化体系的优化 | 第43页 |
| ·酶处理提高转化效率的可行性 | 第43-44页 |
| ·对抗除草剂BAR基因和EPSPs基因的看法 | 第44页 |
| ·选择合适的筛选剂浓度是转基因成功的关键 | 第44-45页 |
| ·不同基因型的农杆菌对转化的影响 | 第45页 |
| ·抗除草剂基因转化效率低、假阳性多的原因分析 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
