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南荻高效再生系统建立及纤维素合成相关基因的克隆

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 前言第9-17页
 1 南荻组织培养技术的研究第9-11页
   ·南荻概述第9-10页
   ·南荻组织培养研究进展第10-11页
 2 纤维素合成相关基因的研究第11-16页
   ·纤维素及纤维素乙醇第11-13页
   ·植物纤维素合成酶基因研究进展第13-15页
   ·关于纤维素合成的调控第15-16页
 3 本研究的目的与意义第16-17页
第二章 南荻高效再生系统的建立及遗传转化初探第17-29页
 1 材料与方法第17-20页
   ·材料第17页
   ·方法第17-20页
     ·南荻高效再生体系的建立第17-19页
     ·农杆菌介导的南荻快速转化初探第19-20页
 2 结果与分析第20-25页
   ·不同基本培养基对南荻愈伤组织诱导的影响第20页
   ·不同培养条件对愈伤组织诱导与生长的影响第20-21页
   ·不同植物生长物质浓度配比对南荻幼穗愈伤组织诱导的影响第21-23页
   ·不同植物生长物质浓度配比对愈伤组织分化率的影响第23-24页
   ·不同植物生长物质浓度配比对试管苗生根的影响第24页
   ·不同基质对试管苗移栽成活的影响第24-25页
   ·抗性愈伤的筛选及分化第25页
   ·转基因南荻分子检测第25页
 3 讨论第25-29页
   ·外植体与培养基第25-26页
   ·植物生长调节剂第26-27页
   ·光照条件对愈伤组织生长的影响第27页
   ·不同的继代时间对胚性愈伤组织生长的影响第27-28页
   ·炼苗移栽第28页
   ·农杆菌介导法遗传转化第28-29页
第三章 南荻纤维素合成相关基因CESA、UGAD的克隆第29-48页
 1 材料与试剂第29-30页
   ·材料和菌株第29页
   ·缓冲液第29页
   ·酶和其它试剂第29-30页
   ·主要实验仪器设备第30页
 2 方法第30-37页
   ·简并引物的设计第30页
   ·南荻总RNA的提取和纯化第30-31页
     ·Trizol(Invitrogen)法提取纯南荻总RNA第30-31页
     ·DNaseⅠ处理第31页
   ·cDNA第一链的合成第31-32页
   ·CesA与UGAD基因的PCR扩增第32-36页
     ·引物最佳退火的确定第32页
     ·切胶回收目的片段第32-33页
     ·PCR产物的TA克隆与测序第33页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和热激转化感受态细胞第33-34页
     ·目的基因的鉴定及测序第34-36页
   ·分析方法第36-37页
     ·核酸序列分析第36页
     ·纤维素合成相关酶基因的蛋白结构的分析第36-37页
 3 结果与分析第37-46页
   ·南荻CesA和UGAD基因的克隆第37-39页
     ·南荻总RNA的提取第37页
     ·南荻CesA基因的PCR扩增、克隆及鉴定第37-38页
     ·南荻UGAD基因的PCR扩增、克隆及鉴定第38-39页
   ·南荻CesA和UGAD基因的生物信息学分析第39-46页
     ·核酸序列分析第39-42页
     ·序列阅读框的分析第42-43页
     ·蛋白结构的分析第43-46页
 4 讨论第46-48页
第四章 全文总结第48-49页
 1 论文小结第48页
 2 后续设想第48-49页
参考文献第49-55页
致谢第55-56页
作者简介第56页

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