摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第1章 酚类对肝脏的毒性效应机制及抑制消减杂交技术 | 第9-16页 |
1. 内分泌干扰物的研究概况 | 第9-11页 |
·内分泌干扰物的概念及分类 | 第9页 |
·EDCs对雌激素受体的作用 | 第9-11页 |
2. 酚类化合物对肝脏的影响 | 第11-14页 |
·烷基酚类化合物 | 第11-12页 |
·酚类化合物对肝脏结构与功能的影响 | 第12-14页 |
3. 抑制消减杂交技术 | 第14-15页 |
·抑制消减杂交的基本原理 | 第14页 |
·抑制消减杂交技术在筛选肝脏基因差异表达中的应用 | 第14-15页 |
4. 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
第2章 中国林蛙辛基酚暴露后肝脏中差异表达基因的筛选和分析 | 第16-54页 |
1. 引言 | 第16页 |
2. 材料和方法 | 第16-33页 |
·材料 | 第16-17页 |
·仪器和试剂 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-33页 |
3. 结果与分析 | 第33-49页 |
·RNA的提取 | 第33-34页 |
·cDNA的合成 | 第34-35页 |
·cDNA的酶切、纯化和加接头 | 第35页 |
·消减产物第二次PCR扩增 | 第35-36页 |
·消减效率检测 | 第36-37页 |
·消减cDNA片段的克隆、文库质粒的提取和酶切检测 | 第37页 |
·血清白蛋白和纤维蛋白原γ基因的半定量RT-PCR分析 | 第37-38页 |
·实时定量PCR检测血清白蛋白和纤维蛋白原γmRNA的表达量 | 第38-40页 |
·表达序列标签(EST)的同源性比对 | 第40页 |
·已知基因的功能分类 | 第40-49页 |
4. 讨论 | 第49-54页 |
·中国林蛙OP暴露后差减cDNA文库的评价 | 第49页 |
·OP诱导中国林蛙肝细胞差异表达基因 | 第49-54页 |
总结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读学位期间研究成果 | 第64页 |