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日本血吸虫肌醇单磷酸酶SjIM的克隆、表达及动物免疫保护效果评估

中文摘要第1-8页
Abstract第8-12页
第一章 绪论第12-22页
 1.日本血吸虫生活史第12-14页
   ·日本血吸虫生活史第12-13页
   ·日本血吸虫童虫第13页
   ·日本血吸虫致病第13-14页
 2.日本血吸虫疫苗研制现状第14-21页
   ·血吸虫疫苗研制的必要性和可行性第14-15页
   ·血吸虫疫苗研制现状第15-21页
 3.结语第21-22页
第二章 日本血吸虫SjIM基因的构建、克隆及表达第22-48页
 摘要第22-23页
 1.试验材料第23-27页
   ·试验试剂和酶第23页
   ·试验仪器第23页
   ·菌种、实验动物和寄生虫第23页
   ·主要试剂配置第23-26页
   ·主要引物第26-27页
 2.试验方法第27-36页
   ·感受态细胞的制备第27-28页
   ·重组质粒的抽提第28-29页
   ·虫体蛋白的提取第29页
   ·琼脂糖凝胶电泳第29页
   ·转化步骤第29-30页
   ·PCR产物回收纯化第30页
   ·虫体mRNA的提取第30-31页
   ·DNaseⅠ消化mRNA中的基因组DNA第31页
   ·纯化消化后的mRNA第31页
   ·合成虫体cDNA第31-32页
   ·SjIM基因的扩增第32-33页
   ·SjIM基因的生物信息学分析第33页
   ·构建重组质粒SjIM-pET-28a及其酶切鉴定第33-34页
   ·重组质粒SjIM-pET-28a的表达时相分析第34页
   ·重组质粒SjIM-pET-28a的原核表达条件摸索第34-35页
   ·重组蛋白的纯化第35-36页
   ·重组蛋白抗原性和免疫原性的鉴定第36页
   ·SjIM基因在不同时期虫体内的表达分析第36页
 3.试验结果第36-46页
   ·SjIM基因的克隆和生物信息学分析第36-41页
   ·SjIM基因的表达和纯化第41-45页
   ·SjIM-pET-28a重组蛋白的抗原性鉴定第45-46页
   ·SjIM在不同发育期虫体中表达量的分析第46页
 4.讨论第46-48页
第三章 日本血吸虫SjIM-pET-28a重组抗原的免疫保护试验第48-54页
 摘要第48页
 1.试验材料第48页
   ·试验试剂第48页
   ·菌株、实验动物及寄生虫第48页
 2.试验方法第48-50页
   ·重组抗原的制备第48-49页
   ·BALB/c小鼠的分组及感染第49页
   ·虫体计数和肝脏减卵率第49页
   ·ELISA方法检测小鼠血清特异性抗体IgG及其亚型IgG1和IgG2a的水平第49-50页
 3.试验结果第50-53页
   ·BALB/c小鼠血清抗SjIM-pET28a特异性IgG抗体的检测第50页
   ·BALB/c小鼠血清抗SjIM-pET28a特异性IgG1及IgG2a抗体的检测第50-52页
   ·BALB/c小鼠免疫保护效果第52-53页
 4.讨论第53-54页
第四章 日本血吸虫pVAX1-SIM的构建及其DNA疫苗的免疫保护试验第54-62页
 摘要第54页
 1.试验材料第54-55页
   ·试验试剂和酶第54页
   ·试验仪器第54页
   ·菌种、实验动物和寄生虫第54-55页
 2.试验方法第55-56页
   ·SjIM与pVAX1空质粒连接第55页
   ·大量抽提质粒第55页
   ·pVAX1-SjIM真核重组质粒的动物保护实验第55-56页
 3.试验结果第56-60页
   ·重组真核质粒pVAX1-SjIM的构建第56-57页
   ·BALB/c小鼠血清抗SjIM特异性IgG、IgG1及IgG2a抗体的检测第57-59页
   ·BALB/c小鼠的免疫保护试验结果第59-60页
 4.讨论第60-62页
全文总结第62-63页
参考文献第63-72页
致谢第72-73页
附录第73-74页

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