中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
英文缩略表 | 第13-18页 |
第一章 绪论 | 第18-26页 |
·血吸虫生物学概述 | 第18-20页 |
·血吸虫分类及其生活史 | 第18-19页 |
·血吸虫病的致病原理 | 第19-20页 |
·血吸虫疫苗研究 | 第20-22页 |
·血吸虫疫苗研制的必要性和可行性 | 第20页 |
·筛选血吸虫疫苗候选分子的策略 | 第20-21页 |
·辐照致弱(RA)血吸虫疫苗模型研究 | 第21-22页 |
·钙网织蛋白分子的结构与功能 | 第22-23页 |
·钙网织蛋白分子的结构与功能特征 | 第22页 |
·血吸虫钙网织蛋白分子的研究 | 第22-23页 |
·抗原提呈细胞与先天免疫和适应性免疫应答 | 第23-26页 |
·抗原提呈细胞的主要类型和功能 | 第23-24页 |
·血吸虫抗原活化宿主 DC 的功能及其机制 | 第24-26页 |
第二章 SjCRT 的原核表达及抗原性初步分析 | 第26-38页 |
·实验材料 | 第27页 |
·菌种、质粒、引物、试剂和仪器 | 第27页 |
·方法 | 第27-32页 |
·SjCRT 蛋白基因分克隆、重组、鉴定和序列分析 | 第27-30页 |
·SjCRT 蛋白的表达、纯化及免疫原性分析 | 第30-32页 |
·结果 | 第32-37页 |
·SjCRT 基因克隆及表达 | 第32-34页 |
·SjCRT 分子序列分析 | 第34-35页 |
·SjCRT 蛋白的纯化及其免疫原性的鉴定 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第三章 SjCRT 蛋白在血吸虫中的组织定位 | 第38-42页 |
·材料和方法 | 第38-39页 |
·实验材料 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39页 |
·实验结果 | 第39-41页 |
·SjCRT 定位于童虫的体被膜 | 第39-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第四章 SjCRT 基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 | 第42-52页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·细胞,载体和菌株 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-45页 |
·引物设计 | 第43页 |
·pFastBacHTA- SjCRT 转移载体的构建 | 第43页 |
·reBacmid-SjCRT 重组杆状病毒的构建和鉴定 | 第43-44页 |
·reBacmid-SjCRT 转染昆虫细胞 | 第44页 |
·表达蛋白的检测 | 第44页 |
·SjCRT 蛋白的纯化 | 第44-45页 |
·纯化后的 SjCRT 蛋白 Western blot 分析 | 第45页 |
·实验结果 | 第45-50页 |
·PCR 扩增和重组杆状病毒的构建 | 第45-47页 |
·Western blot 及 IFA 分析 SjCRT 蛋白的表达 | 第47-49页 |
·SjCRT 蛋白的纯化 | 第49页 |
·纯化后的 SjCRT 蛋白 Western blot 分析 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
第五章 SjCRT 活化 RAW264.7 细胞的功能分析 | 第52-58页 |
·实验材料 | 第52-53页 |
·实验细胞、主要试剂及仪器 | 第52-53页 |
·实验方法 | 第53-54页 |
·细胞培养 | 第53页 |
·CCK-8 检测细胞增殖实验 | 第53页 |
·流式细胞术检测细胞表面分子 | 第53-54页 |
·实验结果 | 第54-56页 |
·SjCRT 刺激巨噬细胞 RAW264.7 的增殖 | 第54页 |
·SjCRT 上调巨噬细胞 RAW264.7 表面受体分子及 MHCII 分子的表达 | 第54-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
第六章 SjCRT 活化 DC 细胞的功能分析 | 第58-68页 |
·实验材料 | 第58-59页 |
·实验细胞、主要试剂 | 第58-59页 |
·实验仪器 | 第59页 |
·实验动物 | 第59页 |
·实验方法 | 第59-62页 |
·DC 细胞的制备 | 第59-60页 |
·DC 细胞的分选 | 第60-61页 |
·ELISA 检测细胞因子 | 第61页 |
·流式细胞术检测细胞表面标记 | 第61-62页 |
·实验结果 | 第62-65页 |
·SjCRT 上调 DC 表面共刺激分子及 MHCII 分子的表达 | 第62-63页 |
·SjCRT 促进 DC 产生 IFN-γ但降低 IL-6、IL-10、和 TNF-α的分泌 | 第63-65页 |
·讨论 | 第65-68页 |
第七章 全文总结 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
硕士期间取得的研究成果 | 第78页 |