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日本血吸虫钙网织蛋白活化抗原提呈细胞功能的分析

中文摘要第1-9页
Abstract第9-13页
英文缩略表第13-18页
第一章 绪论第18-26页
   ·血吸虫生物学概述第18-20页
     ·血吸虫分类及其生活史第18-19页
     ·血吸虫病的致病原理第19-20页
   ·血吸虫疫苗研究第20-22页
     ·血吸虫疫苗研制的必要性和可行性第20页
     ·筛选血吸虫疫苗候选分子的策略第20-21页
     ·辐照致弱(RA)血吸虫疫苗模型研究第21-22页
   ·钙网织蛋白分子的结构与功能第22-23页
     ·钙网织蛋白分子的结构与功能特征第22页
     ·血吸虫钙网织蛋白分子的研究第22-23页
   ·抗原提呈细胞与先天免疫和适应性免疫应答第23-26页
     ·抗原提呈细胞的主要类型和功能第23-24页
     ·血吸虫抗原活化宿主 DC 的功能及其机制第24-26页
第二章 SjCRT 的原核表达及抗原性初步分析第26-38页
   ·实验材料第27页
     ·菌种、质粒、引物、试剂和仪器第27页
   ·方法第27-32页
     ·SjCRT 蛋白基因分克隆、重组、鉴定和序列分析第27-30页
     ·SjCRT 蛋白的表达、纯化及免疫原性分析第30-32页
   ·结果第32-37页
     ·SjCRT 基因克隆及表达第32-34页
     ·SjCRT 分子序列分析第34-35页
     ·SjCRT 蛋白的纯化及其免疫原性的鉴定第35-37页
   ·讨论第37-38页
第三章 SjCRT 蛋白在血吸虫中的组织定位第38-42页
   ·材料和方法第38-39页
     ·实验材料第38-39页
     ·实验方法第39页
   ·实验结果第39-41页
     ·SjCRT 定位于童虫的体被膜第39-41页
   ·讨论第41-42页
第四章 SjCRT 基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达第42-52页
   ·实验材料第42-43页
     ·细胞,载体和菌株第42页
     ·主要试剂第42-43页
   ·实验方法第43-45页
     ·引物设计第43页
     ·pFastBacHTA- SjCRT 转移载体的构建第43页
     ·reBacmid-SjCRT 重组杆状病毒的构建和鉴定第43-44页
     ·reBacmid-SjCRT 转染昆虫细胞第44页
     ·表达蛋白的检测第44页
     ·SjCRT 蛋白的纯化第44-45页
     ·纯化后的 SjCRT 蛋白 Western blot 分析第45页
   ·实验结果第45-50页
     ·PCR 扩增和重组杆状病毒的构建第45-47页
     ·Western blot 及 IFA 分析 SjCRT 蛋白的表达第47-49页
     ·SjCRT 蛋白的纯化第49页
     ·纯化后的 SjCRT 蛋白 Western blot 分析第49-50页
   ·讨论第50-52页
第五章 SjCRT 活化 RAW264.7 细胞的功能分析第52-58页
   ·实验材料第52-53页
     ·实验细胞、主要试剂及仪器第52-53页
   ·实验方法第53-54页
     ·细胞培养第53页
     ·CCK-8 检测细胞增殖实验第53页
     ·流式细胞术检测细胞表面分子第53-54页
   ·实验结果第54-56页
     ·SjCRT 刺激巨噬细胞 RAW264.7 的增殖第54页
     ·SjCRT 上调巨噬细胞 RAW264.7 表面受体分子及 MHCII 分子的表达第54-56页
   ·讨论第56-58页
第六章 SjCRT 活化 DC 细胞的功能分析第58-68页
   ·实验材料第58-59页
     ·实验细胞、主要试剂第58-59页
     ·实验仪器第59页
     ·实验动物第59页
   ·实验方法第59-62页
     ·DC 细胞的制备第59-60页
     ·DC 细胞的分选第60-61页
     ·ELISA 检测细胞因子第61页
     ·流式细胞术检测细胞表面标记第61-62页
   ·实验结果第62-65页
     ·SjCRT 上调 DC 表面共刺激分子及 MHCII 分子的表达第62-63页
     ·SjCRT 促进 DC 产生 IFN-γ但降低 IL-6、IL-10、和 TNF-α的分泌第63-65页
   ·讨论第65-68页
第七章 全文总结第68-70页
致谢第70-72页
参考文献第72-78页
硕士期间取得的研究成果第78页

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