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Deinococcus radiodurans磷酸戊糖途径的缺失突变及其在DNA损伤修复中的功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪 论第12-29页
   ·耐辐射微生物的分离、分类和进化第12-15页
   ·耐辐射异常球菌的特性第15-19页
     ·D. radiodurans的培养与结构特征第15-16页
     ·D. radiodurans的遗传学特性第16-17页
     ·D. radiodurans对大量DNA损伤试剂的极端抗性第17-19页
   ·D. radiodurans的DNA损伤修复机制第19-21页
   ·D. radiodurans的代谢系统第21-23页
     ·糖代谢第21-23页
     ·氨基酸和核苷酸代谢第23页
   ·磷酸戊糖途径(PPP)与细胞辐射抗性的关系第23-26页
     ·葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)第25页
     ·转醛酶(TAL)和转酮酶(TKT)第25-26页
   ·总结和展望第26-27页
   ·研究内容及技术路线第27-29页
第二章 磷酸戊糖途径对细胞生长和DNA损伤的影响第29-53页
   ·材料与方法第30-38页
     ·实验菌株来源第30页
     ·培养基、酶及主要生化试剂第30页
     ·菌株的生长第30-31页
     ·基因组DNA、质粒DNA的提取第31-32页
     ·E.coli感受态细胞的制备与转化第32页
     ·D.radiodurans线性DNA的转化第32-33页
     ·PCR引物第33页
     ·PCR反应体系与反应条件第33-35页
     ·DNA片段的回收与纯化第35-36页
     ·DNA片段的酶切反应第36页
     ·DNA片段的连接第36页
     ·突变株生长能力的测定第36页
     ·?dr1337 生长过程中 D-核糖积累的测定第36-37页
     ·UV辐射生存率的测定第37页
     ·丝裂霉素 C(MMC)和 H_2O_2抗性的测定第37-38页
   ·结果与分析第38-51页
     ·D. radiodurans Δzwf突变株和Δdr1337突变株的构建第38-43页
     ·基因阻断菌株的纯化第43页
     ·倍增时间的测定第43-46页
     ·?dr1337 生长过程中 D-核糖积累的测定第46-48页
     ·UV辐射的抗性第48页
     ·化学损伤试剂的抗性第48-49页
     ·伽玛射线的抗性第49-50页
     ·代谢物补偿生长和修复能力第50-51页
   ·讨论第51-53页
     ·D. radiodurans中PPP对DNA损伤修复能力的关系第51-52页
     ·代谢物补偿突变株第52页
     ·PPP与修复能力的作用途经第52-53页
第三章 一株辐射抗性细菌的筛选和初步鉴定第53-62页
   ·材料与方法第54-57页
     ·实验菌株来源第54页
     ·培养基、酶及主要生化试剂第54页
     ·菌株的生长第54页
     ·样品的富集培养和菌株的分离纯化及其驯化第54-55页
     ·16S rDNA 的克隆和序列分析第55页
     ·PCR引物第55-56页
     ·PCR反应体系与反应条件第56页
     ·DNA片段的酶切反应第56-57页
     ·DNA片段的连接第57页
     ·DNA序列的测定和同源性比较第57页
   ·结果与分析第57-61页
     ·土样的筛选结果第57-58页
     ·16S rDNA 序列的测序和系统发育学分析第58-60页
     ·菌株抗生素抗性的鉴定第60-61页
     ·UV辐射的抗性第61页
   ·讨论第61-62页
第四章 结论第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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