| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 1 绪论 | 第13-33页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·热激蛋白研究进展 | 第13-24页 |
| ·热激蛋白研究简史 | 第13-15页 |
| ·热休克蛋白的分类和定位 | 第15-17页 |
| ·热激反应的特点 | 第17页 |
| ·热激蛋白的功能 | 第17-20页 |
| ·热激蛋白基因的表达调控 | 第20-22页 |
| ·热体克蛋白的检测方法 | 第22页 |
| ·HSP100 家族耐热性研究 | 第22-23页 |
| ·高等植物中的HSP100 家族及其相关基因的克隆 | 第23-24页 |
| ·高等植物启动子研究进展 | 第24-29页 |
| ·启动子类型和应用研究 | 第24-27页 |
| ·克隆植物启动子的方法 | 第27-28页 |
| ·启动子功能和结构研究的策略 | 第28-29页 |
| ·问题与展望 | 第29页 |
| ·本文研究的目的和研究内容 | 第29-33页 |
| ·研究目的 | 第29-30页 |
| ·研究内容 | 第30-31页 |
| ·技术路线 | 第31页 |
| ·本实验创新点 | 第31-33页 |
| 2 挪威鼠 Hspa4 基因的克隆 | 第33-47页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·试验动物 | 第33页 |
| ·主要实验试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-39页 |
| ·挪威鼠总RNA 提取 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·挪威鼠Hspa4 基因RT-PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·PCR 产物回收 | 第36页 |
| ·连接转化 | 第36-37页 |
| ·质粒提取 | 第37页 |
| ·质粒检测 | 第37-38页 |
| ·全长基因获得 | 第38-39页 |
| ·结果分析 | 第39-45页 |
| ·RNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·质粒提取及检测 | 第40-42页 |
| ·全长基因获得 | 第42-43页 |
| ·基因测序结果 | 第43-45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 3 植物启动子基因的克隆 | 第47-52页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·DNA 提取试剂 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·PCR 引物 | 第47页 |
| ·组成型启动子的克隆 | 第47-49页 |
| ·诱导型启动子的克隆 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-51页 |
| ·水稻肌动蛋白Actin 启动子的克隆 | 第49-50页 |
| ·玉米泛素Ubi-1 启动子的克隆 | 第50页 |
| ·拟南芥Rd29A 启动子的克隆 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 4 潮霉素抗性基因的克隆 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·模版材料 | 第52页 |
| ·引物设计 | 第52页 |
| ·潮霉素抗性 Hyg 基因的克隆 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 5 挪威鼠 Hspa4 植物表达载体的构建与鉴定 | 第54-68页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-60页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Act2-GUS 的构建 | 第54-55页 |
| ·植物表达载体pBI121-Ubi-GUS 的构建 | 第55-56页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-GUS 的构建 | 第56-57页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Ubi-Hspa4 构建 | 第57-58页 |
| ·植物表达载体pBI121-Ubi-Hyg-Hspa4 的构建 | 第58-59页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-Hspa4 的构建 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-66页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Act2-GUS 的鉴定 | 第60-61页 |
| ·植物表达载体pBI121-Ubi-GUS 的鉴定 | 第61-62页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-GUS 的鉴定 | 第62页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Ubi-Hspa4 的鉴定 | 第62-64页 |
| ·植物表达载体 pBI121-Ubi-Hyg-Hspa4 的鉴定 | 第64-65页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-Hspa4 的鉴定 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| 6 挪威鼠 Hspa4 基因转化水稻 | 第68-80页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·菌种和质粒 | 第68页 |
| ·生物材料 | 第68页 |
| ·培养基 | 第68页 |
| ·方法 | 第68-71页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第68-69页 |
| ·重组农杆菌PCR 鉴定 | 第69-70页 |
| ·根癌农杆菌转化水稻愈伤 | 第70-71页 |
| ·GUS 组织化学染色检测 | 第71页 |
| ·转基因植株的获得 | 第71页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第71页 |
| ·结果和分析 | 第71-78页 |
| ·水稻胚性愈伤组织的诱导 | 第71-72页 |
| ·预培养和共培养 | 第72-73页 |
| ·筛选抗性愈伤 | 第73页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第73-75页 |
| ·转基因植株的获得 | 第75-76页 |
| ·转基因植株的检测 | 第76-78页 |
| ·小结 | 第78-80页 |
| ·筛选标记的选择 | 第78页 |
| ·乙酰丁香酮的使用 | 第78页 |
| ·农杆菌检测 | 第78页 |
| ·水稻品种的选择 | 第78页 |
| ·受体材料的选择 | 第78页 |
| ·培养基的选择 | 第78-79页 |
| ·共培养时间 | 第79-80页 |
| 7 结论与展望 | 第80-82页 |
| ·主要结论 | 第80页 |
| ·后续研究工作的展望 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 附录 | 第91-96页 |
| A. 试剂配方 | 第91-92页 |
| B. 细菌培养基配方 | 第92-93页 |
| C. 植物培养基配 | 第93-94页 |
| D 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第94页 |
| E 作者在攻读学位期间在GENBANK 中登陆的序列号 | 第94-96页 |
