摘要 | 第1-3页 |
SUMMARY | 第3-5页 |
缩略词表 | 第5-9页 |
第一章 引言 | 第9-22页 |
1 盐分对植物的影响 | 第9-12页 |
2 植物的耐盐性 | 第12页 |
3 植物耐盐机理的研究 | 第12-14页 |
4 植物耐盐基因工程研究进展 | 第14-17页 |
5 植物甜菜碱合成酶基因研究进展 | 第17-19页 |
6 植物基因分离的方法 | 第19-20页 |
7 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
8 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 四翅滨藜甜菜碱醛酸脱氢酶基因(BADH)的克隆及序列分析 | 第22-34页 |
1 材料与方法 | 第22-29页 |
·植物材料及处理 | 第22页 |
·菌种和质粒 | 第22页 |
·工具酶和试剂 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·电泳滞后带检测 | 第27-28页 |
·重组转化子的PCR、酶切鉴定 | 第28-29页 |
·DNA 序列分析及同源性比较 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-32页 |
·总RNA 的完整性和纯度 | 第29页 |
·BADH 基因PCR 扩增及回收 | 第29页 |
·BADH 基因重组子蓝白斑筛选与电泳滞后检测 | 第29-30页 |
·重组质粒的PCR、酶切鉴定 | 第30页 |
·重组质粒测序结果及分析 | 第30-32页 |
3 讨论 | 第32-34页 |
·总RNA 的提取 | 第32-33页 |
·PCR 引物设计 | 第33页 |
·测序结果 | 第33-34页 |
第三章 BADH 基因植物表达载体的构建 | 第34-39页 |
1 材料与方法 | 第34-36页 |
·菌种和质粒 | 第34页 |
·工具酶和试剂 | 第34页 |
·方法 | 第34-36页 |
2 结果与分析 | 第36-37页 |
·目的基因和线性载体的准备 | 第36页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第36页 |
·重组质粒PCR 和酶切鉴定 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-39页 |
·目的基因和线性载体的准备 | 第37-38页 |
·重组质粒的鉴定 | 第38-39页 |
第四章 植物表达载体 pBI121-BADH 转化烟草 | 第39-47页 |
1 材料与方法 | 第39-43页 |
·试剂及菌种 | 第39页 |
·植物材料 | 第39页 |
·方法 | 第39-43页 |
2 结果与分析 | 第43-45页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第43页 |
·植物表达载体的PCR 检测 | 第43-44页 |
·转化烟草及转化植株的分子检测 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
·工程菌的鉴定 | 第45页 |
·烟草转化 | 第45-47页 |
第五章 结论 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |
导师简介 | 第57-58页 |
附录:BADH 基因测序结果 | 第58-60页 |