拟南芥rd29A启动子驱动的BADH基因植物表达载体的构建及其转化烟草的研究
| 摘要 | 第1-3页 |
| Summary | 第3-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-18页 |
| 1 启动子研究进展 | 第8-11页 |
| ·组成型启动子 | 第8-9页 |
| ·组织特异性启动子 | 第9-11页 |
| 2 诱导型启动子 | 第11-14页 |
| ·物理因素诱导表达的启动子 | 第11-12页 |
| ·化学因素诱导表达的启动子 | 第12-13页 |
| ·激素诱导表达启动子 | 第13页 |
| ·创伤诱导表达启动子 | 第13页 |
| ·真菌诱导启动子 | 第13-14页 |
| ·低温、干旱和盐胁迫诱导启动子 | 第14页 |
| 3 rd29A 功能 | 第14-16页 |
| ·胁迫基因功能 | 第14-15页 |
| ·胁迫诱导基因的调控与表达 | 第15-16页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 5 试验技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 rd29A 启动子的克隆 | 第18-27页 |
| 1 材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌种和质粒 | 第18页 |
| ·工具酶和试剂 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-22页 |
| ·拟南芥基因组DNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| ·PCR 扩增及回收 | 第19-20页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第20页 |
| ·连接产物的转化 | 第20-21页 |
| ·重组质粒的篮白斑筛选 | 第21页 |
| ·重组质粒的酶切和PCR 鉴定 | 第21-22页 |
| ·DNA 序列测定及序列比较分析 | 第22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-26页 |
| ·拟南芥提取DNA 的电泳检测 | 第22-23页 |
| ·rd29A 启动子PCR 扩增及回收 | 第23页 |
| ·rd29A 启动子重组子蓝白斑筛选 | 第23页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第24页 |
| ·重组质粒测序结果与分析 | 第24-26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| ·测序结果 | 第26页 |
| ·rd29A 基因 | 第26-27页 |
| 第三章 植物表达载体构建 | 第27-38页 |
| 1 材料 | 第28页 |
| ·菌种和质粒 | 第28页 |
| ·工具酶和试剂 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-32页 |
| ·构建植物表达载体pBI-rd29A-GUS | 第28-30页 |
| ·构建植物表达载体pBI-rd29A-BADH | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-36页 |
| ·构建植物表达载体pBI-rd29A-GUS | 第32-34页 |
| ·构建植物表达载体pBI-rd29A-BADH | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| ·启动子及其对基因表达的调控 | 第36-37页 |
| ·影响酶切和连接的因素 | 第37页 |
| ·载体构建 | 第37-38页 |
| 第四章 植物表达载体转化烟草 | 第38-46页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-41页 |
| ·提取质粒DNA | 第38页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌感受态细胞 | 第38页 |
| ·转化菌的鉴定 | 第38-39页 |
| ·工程菌转化烟草 | 第39-41页 |
| ·转基因植株检测 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌结果 | 第41-42页 |
| ·PCR 检测 | 第42页 |
| ·转化烟草 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| ·工程菌的鉴定 | 第44-45页 |
| ·烟草转化 | 第45-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 个人简介 | 第54-55页 |
| 导师简介 | 第55-56页 |
