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hstK基因家族的pkn44和pkn30在鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞特异性糖脂合成中的作用

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩略语表第12-14页
1.文献综述第14-53页
   ·鱼腥蓝细菌PCC 7120的异形胞发育调控第14-38页
     ·鱼腥蓝细菌PCC 7120简介第14-15页
     ·异形胞的特点第15-16页
     ·异形胞的发育第16-27页
       ·异形胞发育的起始第16-19页
       ·异形胞发育的早期调控和模式建立第19-23页
         ·异形胞发育早期的关键基因第19-21页
         ·异形胞发育的调控网络和模式形成第21-23页
       ·参与异形胞分化的其它基因第23-24页
       ·其它影响异形胞分化模式的因素第24-25页
       ·组蛋白类似蛋白HU在异形胞分化过程中可能的作用第25-27页
         ·大肠杆菌中的HU蛋白第25-26页
         ·鱼腥蓝细菌PCC 7120中的HU蛋白第26-27页
     ·异形胞包被形成第27-33页
       ·鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞特异性多糖合成相关基因第28页
       ·鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞特异性糖脂成分及合成途经第28-33页
         ·鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞特异性糖脂成分第28-29页
         ·鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞特异性糖脂合成途径第29-30页
         ·异形胞特异性糖脂合成及调控相关基因第30-33页
     ·固氮酶行使功能第33-38页
       ·固氮酶系统第34-35页
       ·异形胞特异性染色体重排第35-36页
       ·固氮酶基因表达的调控第36-38页
       ·适合固氮酶系统行使功能的环境第38页
   ·信号传导系统简介第38-44页
     ·双组分信号传导系统第39-42页
       ·组蛋白激酶第40-41页
       ·反应调控蛋白第41-42页
     ·丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶与蛋白磷酸酶第42-44页
       ·丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶第42-43页
       ·蛋白磷酸酶第43-44页
   ·鱼腥蓝细菌PCC 7120中的信号传导系统第44-51页
     ·蓝细菌中的信号传导系统第44-46页
     ·鱼腥蓝细菌PCC 7120中的信号传导系统简介第46-47页
     ·鱼腥蓝细菌PCC 7120中的双组分信号转导系统第47页
     ·鱼腥蓝细菌PCC 7120中的丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶与蛋白磷酸酶第47-51页
       ·鱼腥蓝细菌PCC 7120中的丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶第47-49页
       ·鱼腥蓝细菌PCC 7120中的蛋白磷酸酶第49-50页
       ·HstK家族第50-51页
   ·研究目的与意义第51-53页
2.材料与方法第53-70页
   ·菌株和质粒第53页
   ·培养基配方以及培养条件第53-54页
   ·主要分子生物学试剂第54-55页
   ·实验方法第55-70页
     ·质粒DNA的制备及其基本操作第55页
     ·质粒DNA的其它有关操作第55页
     ·粘性末端的平端化第55页
     ·转化第55-56页
       ·大肠杆菌的常规转化第55-56页
       ·大肠杆菌表达宿主细胞的转化第56页
     ·大肠杆菌超表达外源蛋白质的纯化第56-57页
     ·EMSA(Electrophoretic Mobility Shift Assay)第57-59页
     ·鱼腥蓝细菌异形胞的诱导第59页
     ·鱼腥蓝细菌PCC 7120总DNA的抽提第59-60页
     ·蓝细菌结合转移(三亲本杂交)第60-62页
     ·接合转移转化子的验证第62页
     ·固氮酶活性的测定第62-63页
     ·鱼腥蓝细菌RNA提取和纯化第63-64页
     ·RT-PCR和Real-Time RT-PCR第64-65页
       ·RNA定量和浓度调整第64页
       ·半定量反转录PCR(RT-PCR)第64-65页
       ·实时定量反转录PCR(Real-Time RT-PCR)第65页
     ·鱼腥蓝细菌PCC 7120细胞中蛋白质的提取第65-66页
     ·蛋白定量——BradFord法第66-67页
     ·Western Blotting第67-70页
3 结果与分析第70-106页
   ·pkn44和pkn30参与了鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞特异性糖脂1-(α-D-葡萄糖)-3-酮基-25-二十六烷醇的合成第70-92页
     ·突变体D4.3第70-71页
     ·突变体D4.3在缺氮环境中的生长曲线和异形胞发育第71-73页
     ·突变体D4.3缺氮诱导后HetR表达量的变化第73-74页
     ·突变体D4.3在不同条件下的固氮酶活性第74-75页
     ·突变体D4.3中nifD因子重排的检测第75-76页
     ·突变体D4.3中不同条件下NifH的表达水平第76-77页
     ·突变体D4.3在不同条件下nifH的转录水平第77-79页
     ·突变体D4.3的超微结构第79-80页
     ·突变体D4.3异形胞特异性糖脂分析第80-81页
     ·突变体D4.3中糖脂合成相关基因的转录第81-83页
     ·突变体D4.3中多糖合成相关基因hepK和hepA的转录第83-84页
     ·对突变体D4.3的遗传互补第84-92页
   ·PrpJ2参与了鱼腥蓝细菌PCC 7120的异形胞分化第92-97页
     ·NtcA蛋白对prpJ2启动子片段的结合第92-95页
       ·NtcA蛋白质的纯化第92-94页
       ·NtcA蛋白对prpJ2启动子片段的结合第94-95页
     ·prpJ2在缺氮诱导后的转录水平第95-96页
     ·S19/S20中hetR的转录水平第96-97页
   ·组蛋白类似蛋白HU参与了鱼腥蓝细菌PCC 7120的异形胞分化第97-106页
     ·组蛋白类似蛋白HU(HanA)在鱼腥蓝细菌PCC 7120中的定位第97-98页
     ·异位表达HanA对异形胞分化的影响第98-101页
     ·NtcA蛋白对hanA启动子片段的结合第101页
     ·hanA在缺氮诱导后的转录水平第101-102页
     ·NtcA与hanA启动子相互作用的体外实验第102-106页
4 讨论与展望第106-112页
   ·HstK家族的功能第106-107页
   ·异形胞特异性糖脂合成的调控第107-109页
   ·PrpJ2在异形胞的早期发育中的作用第109页
   ·组蛋白类似蛋白HU在异形胞早期发育中所受的调控第109-111页
   ·小结第111-112页
参考文献第112-130页
附录 本研究所用引物第130-136页
博士期间主要学术成果第136-138页
致谢第138页

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