| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第一篇:文献综述 | 第11-39页 |
| 第一章 梨火疫病菌 | 第12-26页 |
| 1.梨火疫病的历史、危害及生物学 | 第12-16页 |
| ·梨火疫病的简史 | 第12页 |
| ·梨火疫病菌的形态特征及病原生物学 | 第12-13页 |
| ·梨火疫病菌的分布 | 第13页 |
| ·梨火疫病菌的寄主植物 | 第13-14页 |
| ·梨火疫病菌的危害情况 | 第14-15页 |
| ·梨火疫病菌的传播途径 | 第15-16页 |
| 2.梨火疫病菌的检测技术研究进展 | 第16-18页 |
| ·传统的检测技术 | 第16页 |
| ·核酸探针技术 | 第16页 |
| ·多聚酶链式反应(PCR)技术 | 第16-18页 |
| 3.梨火疫病菌的致病因子 | 第18-26页 |
| ·E.amylovora的hrp致病岛 | 第18-20页 |
| ·hrp/dsp基因簇 | 第18-20页 |
| ·Hrp—相关酶(HAE)区 | 第20页 |
| ·岛转移(IT)区 | 第20页 |
| ·Hrp T3SS泌出蛋白 | 第20-23页 |
| ·Harpins、HrpN和HrpW | 第20-22页 |
| ·DspA/E | 第22-23页 |
| ·EopB | 第23页 |
| ·其他蛋白 | 第23-24页 |
| ·其他致病性和毒性因子 | 第24-26页 |
| ·EPS(extracellular polysaccharide):梨火疫菌素和果聚糖 | 第24页 |
| ·山梨糖醇代谢 | 第24-25页 |
| ·蛋白酶 | 第25页 |
| ·噬铁素 | 第25-26页 |
| 第二章 Quorum-sensing调控系统 | 第26-39页 |
| 1.群体感应的定义 | 第26页 |
| 2.群体感应现象的发现 | 第26-27页 |
| 3.几种不同的QS调控系统 | 第27-31页 |
| ·G~-细菌的群体感应 | 第27-28页 |
| ·G~+细菌的寡肽语言 | 第28-29页 |
| ·不同种细菌之间的信号交流 | 第29-30页 |
| ·细菌的通用语言 | 第30页 |
| ·细菌与寄主之间的"语言" | 第30-31页 |
| 4.Quorum-sensing系统的生物功能 | 第31-34页 |
| 5.细菌群体效应研究的意义及展望 | 第34-39页 |
| ·信号干扰机制的种类 | 第34-36页 |
| ·革兰氏阴性细菌QS信号干扰 | 第34页 |
| ·革兰氏阳性细菌QS信号干扰 | 第34-35页 |
| ·AI-2群体感应的信号干扰 | 第35页 |
| ·AI-3群体感应的信号干扰 | 第35-36页 |
| ·细菌QS信号干扰和寄主的防御 | 第36页 |
| ·细菌QS信号干扰机制在病害防治中的应用 | 第36-38页 |
| ·天然QS信号干扰物质的研究及其应用 | 第36-37页 |
| ·人造QS信号干扰物质的研究及其应用 | 第37-38页 |
| ·发展前景 | 第38-39页 |
| 第二篇:研究内容 梨火疫病菌(Erwinia amylovora)群体感应相关基因luxS的功能分析 | 第39-76页 |
| 第一节 E.amylovora luxS突变体(Ea△luxS)的构建以及突变体表型的初步研究 | 第40-67页 |
| 1.材料和方法 | 第41-53页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·菌株 | 第41-42页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-53页 |
| ·E.amylovora菌株Era NCPPB1665基因组DNA的提取 | 第43页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备和转化(Samebrook and Russell,2001) | 第43-45页 |
| ·无细胞的培养上清(CFMs)的制备以及V.harveyi生物发光检测系统 | 第45-46页 |
| ·突变体构建 | 第46-49页 |
| ·V.harveyi生物发光检测突变体生物发光情况 | 第49-50页 |
| ·功能互补菌株Ea△luxS(pPRO-luxS)的构建及验证 | 第50-51页 |
| ·luxS基因的突变对一些表型的影响 | 第51-53页 |
| 2 结果 | 第53-66页 |
| ·Era NCPPB1665的luxS突变体的构建及验证 | 第53-58页 |
| ·pCAM-MCS-luxSsx-Km自杀载体的构建 | 第53-55页 |
| ·Era NCPPB1665的luxS突变体的构建 | 第55-56页 |
| ·Era NCPPB1665的luxS突变体的Southern杂交检测 | 第56-57页 |
| ·测序验证 | 第57页 |
| ·Era NCPPB1665的luxS突变体产生AI-2的情况 | 第57-58页 |
| ·pPRO-luxS表达载体的构建及验证 | 第58-59页 |
| ·pPRO-luxS表达载体的构建及验证 | 第58-59页 |
| ·功能互补菌株Ea△luxS(pPRO-luxS)恢复产生AI-2的情况 | 第59页 |
| ·luxS基因的突变对一些表型的影响 | 第59-66页 |
| ·luxS突变体不影响Era NCPPB1665对烟草的过敏性反应 | 第59-61页 |
| ·luxS基因的突变不影响Era NCPPB1665生物膜的生成 | 第61-62页 |
| ·luxS基因的突变影响Era NCPPB1665的胞外多糖的分泌 | 第62-63页 |
| ·luxS基因的突变影响Era NCPPB1665耐H_2O_2的能力 | 第63页 |
| ·luxS基因的突变影响Era NCPPB1665的致病性 | 第63-66页 |
| 3.讨论 | 第66-67页 |
| 第二节 luxS基因调控hrp基因表达的研究 | 第67-76页 |
| 1.材料和方法 | 第67-70页 |
| ·供试菌株 | 第67页 |
| ·培养基 | 第67-68页 |
| ·Era NCPPB1665和Ea△luxS菌株总RNA的提取 | 第68页 |
| ·cDNA的合成 | 第68-69页 |
| ·hrp相关基因、功能及引物序列 | 第69页 |
| ·内参基因的选用以及对条件的摸索 | 第69页 |
| ·RT-PCR扩增反应 | 第69-70页 |
| 2.结果 | 第70-73页 |
| ·总RNA的提取 | 第70页 |
| ·内参基因对实验条件的摸索 | 第70-71页 |
| ·luxS基因调控hrp基因表达 | 第71-73页 |
| 3.讨论 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-89页 |
| 附录 | 第89-90页 |
| 攻读硕士期间发表和待发表的论文 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
