中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
中英文对照词 | 第8-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-50页 |
1.G 蛋白与植物的生长发育 | 第15-23页 |
·G 蛋白概述 | 第15-18页 |
·G 蛋白的组成及三维结构 | 第15-17页 |
·G 蛋白的生物学定位 | 第17页 |
·G-蛋白的信号转导通路 | 第17-18页 |
·植物 G-蛋白功能的研究进展 | 第18-23页 |
·G 蛋白在脱落酸和生长素信号转导途径中的作用 | 第18-20页 |
·G 蛋白在脱落酸(Abscisic acid, ABA)信号转导途径中的作用 | 第18-19页 |
·G 蛋白在生长素(Auxin)信号转导中的作用 | 第19-20页 |
·G 蛋白在光信号转导途径中的作用 | 第20页 |
·G 蛋白在抗真菌防御机制中的作用 | 第20页 |
·G 蛋白在调控细胞分裂周期进程中的作用 | 第20-21页 |
·G 蛋白在植物的生长发育过程中的作用 | 第21-23页 |
·G 蛋白与植物种子的萌发 | 第21页 |
·G 蛋白在根系生长发育中的作用 | 第21-22页 |
·G 蛋白在茎叶生长发育中的作用 | 第22页 |
·G 蛋白在植物生殖生长中的作用 | 第22-23页 |
2 生长素的极性运输与信号转导 | 第23-30页 |
·植物体内的生长素极性运输 | 第23-26页 |
·AUX 蛋白与生长素的极性运输 | 第25页 |
·PIN 蛋白与生长素的极性运输 | 第25-26页 |
·影响生长素极性运输的其它因子 | 第26页 |
·植物体内的生长素信号转导 | 第26-30页 |
·生长素受体 | 第27-28页 |
·ARFs 蛋白和Aux/IAA 蛋白 | 第28-29页 |
·SCF~(TIR1)泛素途径 | 第29-30页 |
3. 侧根发育研究进展 | 第30-37页 |
·侧根发育过程 | 第30-33页 |
·侧根原基的发生 | 第31-32页 |
·侧根的发生位置 | 第32-33页 |
·影响侧根发育的因素 | 第33-37页 |
·营养元素对侧根发育的影响 | 第33页 |
·激素对侧根发育的调节 | 第33-37页 |
·生长素与侧根发育 | 第33-36页 |
·其它激素与侧根发育 | 第36-37页 |
4. 本研究的目的及研究内容 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-50页 |
第二章 G 蛋白对生长素介导的拟南芥侧根发育的影响 | 第50-68页 |
1 引言 | 第50页 |
2 材料与方法 | 第50-55页 |
·植物材料及培养条件 | 第50-51页 |
·突变体的鉴定 | 第51-52页 |
·侧根原基发生的组织学观察 | 第52-53页 |
·根冠比的测定 | 第53页 |
·生长素处理及根系生长发育指标的测定 | 第53-54页 |
·生长素及生长素运输抑制剂处理 | 第53-54页 |
·无菌苗的根系生长发育指标测定 | 第54页 |
·去茎尖、根尖实验 | 第54页 |
·去茎尖处理 | 第54页 |
·去根尖处理 | 第54页 |
·根系生长素含量的测定 | 第54-55页 |
3 结果与分析 | 第55-64页 |
·拟南芥 G 蛋白 α 亚基和 β 亚基缺失突变体的 RT-PCR 鉴定 | 第55页 |
·G 蛋白突变体的根系发育特征 | 第55-56页 |
·生长素及生长素运输抑制剂对拟南芥G 蛋白突变体根系发育的影响 | 第56-59页 |
·生长素及生长素运输抑制剂对主根伸长的影响 | 第56-58页 |
·生长素及生长素运输抑制剂对侧根发育的影响 | 第58-59页 |
·不同基因型侧根原基发生过程的形态学特征分析 | 第59-61页 |
·不同基因型幼苗的侧根发生过程分析 | 第59-60页 |
·不同基因型的侧根原基发育时期分布特征比较 | 第60-61页 |
·根尖、茎尖端的生长素极性运输对侧根发生的影响 | 第61-63页 |
·茎端生长素的向顶运输对侧根发生的影响 | 第62页 |
·根端生长素的向基运输对侧根发生的影响 | 第62-63页 |
·不同基因型拟南芥根部生长素含量比较 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-65页 |
·茎端合成的生长素是促进 agb1-2 侧根大量发生的主要因素 | 第64页 |
·根部生长素的向基运输是影响 G-蛋白突变体侧根发生差异的主要原因 | 第64页 |
·GPA1 突变影响主根伸长生长对生长素的敏感性 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
第三章 G-蛋白过表达植株的根系发育特征 | 第68-84页 |
1 引言 | 第68页 |
2 材料与方法 | 第68-71页 |
·实验材料 | 第68页 |
·菌株、载体及生化试剂 | 第68-69页 |
·实验方法 | 第69-71页 |
·拟南芥 GPA1、AGB1 基因的克隆与转化 | 第69-70页 |
·转基因拟南芥种子的抗性筛选及鉴定 | 第70-71页 |
·转基因植株中融合蛋白的组织水平定位 | 第71页 |
·转基因植株中 GPA1/AGB1 基因的半定量 RT-PCR 分析 | 第71页 |
·转基因植株侧根原基的观察与计数 | 第71页 |
·转基因植株根系生长发育指标的测定 | 第71页 |
3 结果与分析 | 第71-81页 |
·转基因植株的获得 | 第71-75页 |
·GPA1 基因和 AGB1 基因全长 cDNA 序列的获得 | 第71-72页 |
·GPA1 和 AGB1 基因的 TOPO 克隆与鉴定 | 第72-73页 |
·农杆菌介导转化拟南芥植株 | 第73页 |
·转基因植株的筛选 | 第73-75页 |
·转基因植株根部的 GPA1/AGB1-GFP 融合蛋白的表达定位 | 第75-77页 |
·转基因植株根尖部位的 GFP 融合蛋白定位 | 第75-76页 |
·转基因植株幼根成熟区中的 GFP 定位 | 第76页 |
·GPA1/AGB1-GFP 在新形成侧根中的表达定位 | 第76-77页 |
·转基因植株的叶片及根系表型特征 | 第77页 |
·转基因植株的根系发育特征 | 第77-81页 |
·转基因植株的根系发育 | 第77-78页 |
·生长素及生长素运输抑制剂对转基因植株侧根发育的影响 | 第78-81页 |
4 讨论 | 第81-83页 |
·AGB1 负调节拟南芥侧根发育过程 | 第81-82页 |
·AGB1 通过抑制生长素的极性运输途径负调节侧根发育 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-84页 |
第四章 G 蛋白在拟南芥悬浮细胞分裂和伸长中的作用 | 第84-103页 |
1 引言 | 第84-85页 |
2 材料与方法 | 第85-89页 |
·悬浮培养细胞系的建立 | 第85-86页 |
·悬浮细胞研究方法 | 第86-87页 |
·细胞处理 | 第86页 |
·鲜重的称量 | 第86页 |
·显微观察 | 第86页 |
·细胞分裂指数的荧光观察 | 第86-87页 |
·悬浮细胞的Western-blot 分析 | 第87-88页 |
·膜蛋白的提取 | 第87页 |
·蛋白质浓度测定及SDS-PAGE | 第87页 |
·Western Blotting | 第87-88页 |
·过表达悬浮细胞系的构建 | 第88页 |
·质粒构建 | 第88页 |
·农杆菌的转化培养 | 第88页 |
·农杆菌介导的细胞转化 | 第88页 |
·转化细胞的GFP-PCR 鉴定 | 第88页 |
·悬浮细胞中相关基因的半定量RT-PCR | 第88-89页 |
3 结果与分析 | 第89-98页 |
·2,4-D 和 NAA 在拟南芥 Col 悬浮细胞中的作用 | 第89-93页 |
·2,4-D 和 NAA 对拟南芥悬浮细胞生长发育的影响 | 第89-90页 |
·2,4-D 和 NAA 对 Col 悬浮细胞分裂的影响 | 第90-92页 |
·2,4-D 和 NAA 对 Col 悬浮细胞伸长的影响 | 第92-93页 |
·2,4-D 和 NAA 处理 Col 细胞中 GPA1 的表达量变化 | 第93页 |
·过表达细胞系的构建及鉴定 | 第93-94页 |
·过表达悬浮细胞系中融合蛋白的荧光定位 | 第94-95页 |
·突变体、野生型、过表达悬浮细胞的形态特征 | 第95页 |
·不同基因型细胞对2,4-D 和NAA 处理的响应分析 | 第95-98页 |
·不同基因型细胞对 NAA 诱导伸胞伸长的响应 | 第95-97页 |
·不同基因型细胞对 2,4-D 诱导的细胞分裂的响应 | 第97-98页 |
4 讨论 | 第98-100页 |
·AGB1的突变促进了悬浮细胞中NAA的极性输出过程 | 第98-100页 |
·GPA1对细胞分裂过程具有促进作用 | 第100页 |
参考文献 | 第100-103页 |
第五章 G 蛋白在生长素调节侧根发育过程中的作用机理 | 第103-111页 |
1 引言 | 第103页 |
2 材料与方法 | 第103-105页 |
·植物材料 | 第103页 |
·种子的无菌处理与萌发 | 第103-104页 |
·生长素处理设置 | 第104页 |
·根系生长发育指标的测定 | 第104页 |
·根尖的重力刺激响应 | 第104页 |
·Real-time PCR | 第104-105页 |
3 结果与分析 | 第105-108页 |
·G 蛋白突变体及过表达植株的根系发育对 2,4-D 和 NAA 处理的响应 | 第105-106页 |
·不同基因型的根尖向重性反应 | 第106-107页 |
·AGB1负调节生长素介导侧根发育过程的分子机制探讨 | 第107-108页 |
·生长素极性输出蛋白基因 PIN1 在不同基因型根系中 mRNA 水平的表达 | 第107页 |
·周期素基因AtCYCD4;1在不同基因型根系中mRNA水平的表达 | 第107-108页 |
4 讨论 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-111页 |
第六章 结论与展望 | 第111-115页 |
1. 结论 | 第111-113页 |
2. 展望 | 第113-115页 |
附录 | 第115-129页 |
附录一 G-蛋白对拟南芥其它生长发育过程的调节 | 第115-122页 |
附录二 | 第122-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
攻读学位期间发表的主要学术论文目录 | 第130-131页 |