| 缩略词表 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一部分 甜菜夜蛾滞育激素和促前胸腺激素基因的克隆和表达分析 | 第12-39页 |
| 1.前言 | 第12-19页 |
| ·昆虫激素概述 | 第12-16页 |
| ·激脂激素 | 第12-13页 |
| ·利尿肽和抗利尿肽 | 第13页 |
| ·亲肌肽类神经肽 | 第13页 |
| ·促咽侧体素和抑咽侧体素 | 第13-15页 |
| ·羽化激素和蜕皮触发激素 | 第15-16页 |
| ·F类神经肽 | 第16页 |
| ·色素分散因子 | 第16页 |
| ·SI/LFamide神经肽 | 第16页 |
| ·遗忘素 | 第16页 |
| ·Pacifastins和Neuroparsins | 第16页 |
| ·促前胸腺激素(PTTH)及其研究进展 | 第16-17页 |
| ·FXPR/KLamde神经肽研究进展 | 第17-18页 |
| ·小结 | 第18-19页 |
| 2.材料与方法 | 第19-27页 |
| ·昆虫的饲养及组织材料收集 | 第19页 |
| ·总RNA的抽提 | 第19页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第19页 |
| ·PCR反应 | 第19-20页 |
| ·DNA电泳和胶回收 | 第20页 |
| ·感受态细胞制备和连接转化 | 第20页 |
| ·感受态细胞制备: | 第20页 |
| ·连接 | 第20页 |
| ·转化过程 | 第20页 |
| ·质粒DNA的少量制备 | 第20-21页 |
| ·RACE反应 | 第21-22页 |
| ·Northern杂交 | 第22-26页 |
| ·制备变性胶 | 第22页 |
| ·制样 | 第22-23页 |
| ·电泳 | 第23页 |
| ·转膜 | 第23页 |
| ·洗膜 | 第23页 |
| ·预杂交 | 第23页 |
| ·制备~(32)P标记探针 | 第23-24页 |
| ·杂交 | 第24页 |
| ·洗膜 | 第24-25页 |
| ·曝光、冲片 | 第25页 |
| ·洗膜 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·半定量RT-PCR | 第26页 |
| ·免疫组化 | 第26-27页 |
| 3 结果与讨论 | 第27-39页 |
| ·甜菜夜蛾DH-PBAN cDNA的克隆及其时空表达分析 | 第27-32页 |
| ·甜菜夜蛾DH-PBAN cDNA中间片段的获得 | 第27页 |
| ·快速扩增cDNA末端获得全长cDNA | 第27页 |
| ·甜菜夜蛾DH-PBAN cDNA序列结构及同源性分析 | 第27-28页 |
| ·甜菜夜蛾DH-PBAN mRNA的组织分布 | 第28-30页 |
| ·甜菜夜蛾DH-PBAN mRNA在蛹的不同发育时期的表达变化 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| ·甜菜夜蛾PTTH cDNA的克隆及其时空表达分析 | 第32-38页 |
| ·甜菜夜蛾PTTH cDNA中间片段的获得 | 第32页 |
| ·全长PTTH cDNA的获得 | 第32-33页 |
| ·甜菜夜蛾PTTH cDNA的序列结构及同源性分析 | 第33页 |
| ·Spe-PTTH mRNA的组织分布 | 第33页 |
| ·Spe-PTTH的发育变化 | 第33-37页 |
| ·Spe-PTTH蛋白的组织定位 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| ·本章总结与展望 | 第38-39页 |
| 第二部分 棉铃虫海藻糖合成酶基因的克隆和功能研究 | 第39-55页 |
| 1.前言 | 第39-42页 |
| ·多羟基化合物与昆虫滞育、抗寒的关系 | 第39-40页 |
| ·海藻糖的发现与功能 | 第40页 |
| ·海藻糖的合成与海藻糖合成酶基因研究进展 | 第40-42页 |
| 2 材料方法 | 第42-45页 |
| ·昆虫的饲养 | 第42页 |
| ·材料的收集和处理 | 第42页 |
| ·组织和血淋巴的收集 | 第42页 |
| ·血淋巴中蛋白质的除去 | 第42页 |
| ·多羟基化合物的衍生 | 第42页 |
| ·HPLC | 第42页 |
| ·6—磷酸海藻糖合成酶酶活测定 | 第42-43页 |
| ·简并引物扩增TPS中间片段 | 第43页 |
| ·全长TPS cDNA的获得 | 第43页 |
| ·RT-PCR检测TPS的发育表达 | 第43页 |
| ·利用家蚕杆状病毒表达体系表达TPS | 第43-45页 |
| ·PCR扩增用于表达到的全长TPS ORF | 第43页 |
| ·PCR条件 | 第43-44页 |
| ·TPS基因的亚克隆 | 第44页 |
| ·共转染与重组病毒的制备 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第44-45页 |
| 3 结果与讨论 | 第45-55页 |
| ·棉铃虫血淋巴中抗寒类物质的含量变化趋势 | 第45页 |
| ·棉铃虫血淋巴中海藻糖合成酶活性检测 | 第45-49页 |
| ·6—磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因中间片段的获得 | 第49页 |
| ·6—磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因全长cDNA的克隆 | 第49页 |
| ·6—磷酸海藻糖合成酶(TPS)cDNA开放阅读框的杆状病毒表达 | 第49-52页 |
| ·6—磷酸海藻糖合成酶(TPS)mRNA的组织分布 | 第52页 |
| ·6—磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因的发育表达分析 | 第52-54页 |
| ·小结与讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 博士期间已发表和待发表的论文 | 第65页 |
