| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-26页 |
| ·植物抗旱的分子生理基础 | 第11-19页 |
| ·渗透调节物质与植物抗旱性的关系 | 第12-14页 |
| ·Lea蛋白与植物抗旱性的关系 | 第14-15页 |
| ·植物对水分胁迫的感知与信号传递 | 第15-17页 |
| ·干旱胁迫诱导基因的表达与调控 | 第17-19页 |
| ·基因芯片技术及其在表达谱中的应用 | 第19-20页 |
| ·DNA芯片技术的基本原理 | 第19-20页 |
| ·DNA芯片技术在表达谱中的应用 | 第20页 |
| ·RACE技术 | 第20-22页 |
| ·RACE技术在水稻基因克隆上的应用 | 第20-21页 |
| ·RACE的原理 | 第21-22页 |
| ·RACE在植物基因克隆上的技术优势 | 第22页 |
| ·RACE在植物基因克隆上的应用现状 | 第22页 |
| ·植物组织培养及农杆菌介导转化技术在育种上的应用 | 第22-25页 |
| ·植物组织培养的应用 | 第22-23页 |
| ·农杆菌介导转化技术 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-43页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·材料处理 | 第26页 |
| ·细菌培养基 | 第26页 |
| ·感受态细胞制备、蓝白斑筛选溶液 | 第26页 |
| ·常用缓冲液 | 第26页 |
| ·抗生素母液 | 第26-27页 |
| ·用于烟草转化的培养基 | 第27页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·载体 | 第27页 |
| ·酶和其他试剂 | 第27页 |
| ·常用实验仪器 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-43页 |
| ·目的基因的选取 | 第27-28页 |
| ·IRAT109总RNA的小量提取 | 第28页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR扩增保守片段 | 第29页 |
| ·DNA片段的回收 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第30-31页 |
| ·5’及3’-RACE扩增 | 第31-33页 |
| ·全长cDNA的扩增 | 第33页 |
| ·对获得的目的片断进行生物信息学分析 | 第33页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·植物表达载体pBI121-OSI2导入根癌农杆菌 | 第35-36页 |
| ·叶盘法转化烟草(无菌操作) | 第36页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第36-37页 |
| ·OSI2基因Southern杂交 | 第37-40页 |
| ·OSI2基因的表达分析 | 第40页 |
| ·水稻组织培养 | 第40-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-52页 |
| ·OSI2基因克隆 | 第43-45页 |
| ·保守片段的扩增 | 第43页 |
| ·3’-RACE扩增得到3’-端序列 | 第43页 |
| ·5’-RACE扩增得到5’-端序列 | 第43-44页 |
| ·全长cDNA的获得 | 第44-45页 |
| ·OSI2基因的序列同源性分析 | 第45页 |
| ·OSI2序列编码分析 | 第45-47页 |
| ·pBI121-OSI2载体鉴定 | 第47页 |
| ·农杆菌介导pBI121-OSI2转基因烟草分析 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草的生长 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草中OSI2基因的PCR验证 | 第48页 |
| ·OSI2基因在水稻和转基因烟草中的拷贝数分析 | 第48-49页 |
| ·OSI2基因的表达分析 | 第49-50页 |
| ·Picloram在水稻组培中的应用 | 第50-52页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第50-51页 |
| ·愈伤组织的分化 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-62页 |
| ·RACE技术 | 第52页 |
| ·OSI2基因结构 | 第52页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·OSI2基因转化烟草分析 | 第53页 |
| ·Southern杂交分析 | 第53页 |
| ·OSI2基因的小结 | 第53-54页 |
| ·Picloram对水稻愈伤组织生长的影响 | 第54页 |
| ·挑取愈伤组织不同处理的比较 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |