| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-20页 |
| 第一节 乳腺癌的生物学研究 | 第8-11页 |
| （一） 乳腺癌的流行病学发病原因 | 第8-9页 |
| （二） 乳腺癌的组织学分类及常规诊断方法 | 第9页 |
| （三） 乳腺癌诊断标志物的基因水平研究 | 第9-11页 |
| 第二节 蛋白质组学技术及其应用现状 | 第11-12页 |
| （一） 蛋白质组学及其内容 | 第11页 |
| （二） 蛋白质组学主要技术 | 第11-12页 |
| 第三节 肿瘤蛋白质组学的应用和研究现状 | 第12-13页 |
| 第四节 乳腺癌的蛋白质组学研究 | 第13-18页 |
| （一） 乳腺癌蛋白质组学研究进展 | 第14-17页 |
| （二） 乳腺癌蛋白质组学的研究意义 | 第17-18页 |
| 第五节 本研究的立题目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料和方法 | 第20-44页 |
| 第一节 实验材料和仪器 | 第20-30页 |
| （一） 乳腺组织样品 | 第20页 |
| （二） 主要试剂与溶液 | 第20-30页 |
| 1. 主要试剂 | 第20-29页 |
| 2. 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 第二节 实验方法 | 第30-44页 |
| （一） 样品制备 | 第30-33页 |
| 1. 乳腺癌组织样品的收集、制备前处理、组织样品保存 | 第30页 |
| 2. 乳腺癌旁组织及实体瘤组织的全蛋白提取方法 | 第30-31页 |
| 3. 全蛋白的浓度测定 | 第31-32页 |
| 4. 蛋白质电泳上样量标准 | 第32-33页 |
| （二） 凝胶电泳操作步骤 | 第33-37页 |
| 1. 垂直板SDS-PAGE | 第33页 |
| 2. 双向凝胶电泳 | 第33-37页 |
| （三） 双向凝胶电泳图像扫描 | 第37-38页 |
| （四） 双向凝胶电泳ImageMaster 2D 图像软件分析 | 第38-40页 |
| 1. 创建工作区（workspace） | 第38页 |
| 2. 蛋白点检定 | 第38-39页 |
| 3. 蛋白点配对 | 第39页 |
| 4. 成对和蛋白点群的报告 | 第39-40页 |
| （五） 双向凝胶电泳结果分析 | 第40页 |
| （六） 质谱鉴定差异蛋白质点 | 第40-44页 |
| 1. 质谱样品制备 | 第40-42页 |
| 2. 肽混合物的PMF 分析 | 第42页 |
| 3. 胰酶解肽段混合物的MALDI-TOF-TOF MS 检测 | 第42页 |
| 4. 数据库查询 | 第42-44页 |
| 第三章 实验结果 | 第44-69页 |
| （一） 组织材料来源病人情况及其病理报告结果 | 第44页 |
| （二） 样品制备方法的比较结果 | 第44-49页 |
| 1. 蛋白裂解液的比较结果 | 第45-46页 |
| 2. 沉淀方法的比较结果 | 第46-49页 |
| （三） 建立并优化双向凝胶电泳实验条件 | 第49-51页 |
| （四） 癌旁正常乳腺组织和实体瘤组织全蛋白的双向凝胶电泳图谱结果 | 第51-54页 |
| （五） 双向凝胶电泳图像分析结果 | 第54-61页 |
| 1. ImageMaster 2D 软件对2-DE 凝胶图谱的分析结果 | 第54-57页 |
| 2. 癌旁正常乳腺组织与乳腺癌实体瘤组织全蛋白2-DE 凝胶差异点的结果统计 | 第57-58页 |
| 3. 凝胶共同差异点的确定 | 第58-61页 |
| （六） 双向电泳图谱共同差异点分析 | 第61-62页 |
| （七） 制备型凝胶图谱及差异点选取 | 第62-64页 |
| （八） 质谱检测结果 | 第64-69页 |
| 第四章 讨论 | 第69-86页 |
| （一） 样品制备 | 第69-78页 |
| 1. 特定病理类型组织样品的选取 | 第70-71页 |
| 2. 组织样品的保存 | 第71页 |
| 3. 组织细胞的破碎 | 第71-72页 |
| 4. 样品缓冲液的选择 | 第72-76页 |
| 5. 沉淀方法的比较 | 第76-78页 |
| （二） 2-DE 参数设置的优化 | 第78-79页 |
| 1. 上样量的选择 | 第78页 |
| 2. 第一向pH 梯度等电聚焦 | 第78-79页 |
| （三） 图像软件分析 | 第79-81页 |
| （四） 质谱鉴定结果分析 | 第81-86页 |
| 第五章 结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 摘要 | 第92-95页 |
| Abstract | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
