农杆菌介导的蔗糖合成酶基因转化花生的研究
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-14页 |
| 一、SS 的基本特性和结构 | 第8-9页 |
| 二、SS 基因转化的研究进展 | 第9-10页 |
| 三、花生品质改良的重要意义及其遗传转化现状 | 第10-13页 |
| （一） 单纯筛选标记基因的转化 | 第10-11页 |
| （二） 抗逆性能的提高 | 第11-12页 |
| （三） 花生食用品质的改善 | 第12页 |
| （四） 生产疫苗的生物反应器 | 第12-13页 |
| 四、研究工作的意义和技术路线 | 第13-14页 |
| （一） 意义 | 第13页 |
| （二） 研究的主要内容 | 第13-14页 |
| 材料与方法 | 第14-23页 |
| 一、材料 | 第14页 |
| 二、实验方法 | 第14-23页 |
| （一） 表达载体p406ss-1 的鉴定与转化 | 第14-15页 |
| （二） 质粒载体p406ss-2 的构建与转化 | 第15-17页 |
| （三） 三亲杂交将载体质粒导入Ti 农杆菌 | 第17页 |
| （四） 农杆菌介导的花生转化 | 第17-18页 |
| （五） 再生植株的PCR 检测 | 第18-19页 |
| （六） 花生叶片中可溶性总糖和蔗糖含量的测定 | 第19-20页 |
| （七） SS 的提取和活性测定 | 第20-21页 |
| （八） 植物蛋白的SDS-聚丙烯酰氨垂直电泳分析 | 第21-23页 |
| 结果 | 第23-29页 |
| 一、表达载体的检测与转化 | 第23页 |
| 二、质粒载体 p406ss-2 的构建与转化 | 第23-24页 |
| 三、农杆菌介导的花生转化 | 第24-26页 |
| （一） 转化方法 | 第24-25页 |
| （二） 花生丛生芽对卡那霉素的耐受性测试 | 第25-26页 |
| 四、再生植株的PCR 检测 | 第26页 |
| 五、阳性再生植株叶片中可溶性总糖和蔗糖含量 | 第26-27页 |
| 六、SS 的活性测定 | 第27-28页 |
| 七、植物蛋白的SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳分析 | 第28-29页 |
| 讨论 | 第29-32页 |
| 一、农杆菌介导花生转化的技术问题 | 第29页 |
| （一） 转化用农杆菌浓度对外植体分化的影响 | 第29页 |
| （二） 农杆菌对花生子叶外植体侵染时间的确定 | 第29页 |
| 二、共培养阶段子叶外植体的变化与芽诱导率密切相关 | 第29-30页 |
| 三、花生再生系统中的问题 | 第30页 |
| 四、叶片组织糖含量的变化 | 第30页 |
| 五、花生转化再生植株果实产量不高的问题 | 第30-31页 |
| 六、叶片组织的SS 活性变化 | 第31-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-39页 |
| 致谢 | 第39页 |
