| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 上篇 研究综述 | 第14-58页 |
| 第一章 PCV2流行病学研究进展 | 第14-28页 |
| 1. PCV的发现与分类地位 | 第14-15页 |
| 2. PCV的分子生物学特征 | 第15-18页 |
| ·生物学特性与基因组结构 | 第15-16页 |
| ·编码蛋白与功能 | 第16-18页 |
| 3. 流行病学 | 第18-22页 |
| ·PCV的全球流行情况 | 第18-19页 |
| ·PCV的遗传与进化 | 第19-21页 |
| ·PCV的传播及共公卫生学 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-28页 |
| 第二章 PCV2致病机理研究进展 | 第28-45页 |
| 1. PCV2引起的疾病 | 第28-31页 |
| 2. 致病机理 | 第31-36页 |
| ·病毒在体内的分布与复制 | 第31-32页 |
| ·病毒与机体免疫系统的相互影响 | 第32-35页 |
| ·PCV2与其它病原的相互作用 | 第35-36页 |
| 3. 防治进展 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-45页 |
| 第三章 RNA干扰技术研究进展 | 第45-58页 |
| 1. RNAi的发现 | 第45页 |
| 2. RNAi的原理 | 第45-47页 |
| 3. RNAi的特点 | 第47-48页 |
| 4. RNAi的实验技术 | 第48-51页 |
| ·靶序列的选择 | 第48页 |
| ·SiRNA的获得 | 第48-50页 |
| ·SiRNA的导入 | 第50-51页 |
| 5. RNAi的应用 | 第51-53页 |
| ·研究基因功能 | 第51-52页 |
| ·抗病毒与抗肿瘤 | 第52-53页 |
| 6. RNAi的前景与问题 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 下篇 研究内容 | 第58-168页 |
| 第四章 猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株分子遗传特性研究 | 第58-76页 |
| 1 材料与试剂 | 第59-60页 |
| 2 方法 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-63页 |
| ·临床症状与病理学 | 第62页 |
| ·PCV2检测及全基因序列扩增 | 第62页 |
| ·序列分析 | 第62页 |
| ·基因进化树分析 | 第62-63页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第63页 |
| 4. 讨论 | 第63-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 第五章 猪圆环病毒2型TaqMan实时PCR检测方法的建立 | 第76-86页 |
| 1 材料与方法 | 第77-78页 |
| 2 结果 | 第78-79页 |
| ·敏感性 | 第78页 |
| ·特异性 | 第78-79页 |
| ·重复性 | 第79页 |
| ·与常规PCR的比较 | 第79页 |
| ·PMWS临床样品的检测 | 第79页 |
| 3 讨论 | 第79-83页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 第六章 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒SYBR Green实时RT-PCR检测方法的建立 | 第86-95页 |
| 1 材料与方法 | 第86-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89页 |
| ·特异性 | 第89页 |
| ·敏感性 | 第89页 |
| ·重复性 | 第89页 |
| ·PRRS疑似猪组织样品的检测 | 第89页 |
| 3 讨论 | 第89-93页 |
| 参考文献 | 第93-95页 |
| 第七章 猪细胞因子SYBR Green实时RT-PCR检测方法的建立 | 第95-105页 |
| 1 材料与方法 | 第96-97页 |
| 2 结果与分析 | 第97-98页 |
| ·特异性 | 第97页 |
| ·敏感性 | 第97页 |
| ·重复性 | 第97页 |
| ·外周血淋巴细胞中细胞因子的检测 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98页 |
| 4 结论 | 第98-102页 |
| 参考文献 | 第102-105页 |
| 第八章 PRRSV与PCV2体外共感染对猪肺泡巨噬细胞免疫学功能的影响 | 第105-121页 |
| 1 材料与方法 | 第106-108页 |
| 2 结果 | 第108-109页 |
| ·PAM细胞变病与存活率检测 | 第108页 |
| ·PCV2检测 | 第108页 |
| ·PRRSV检测 | 第108页 |
| ·INF-α和INF-γ mRNA定量检测 | 第108-109页 |
| ·IL-8和IL-10 mRNA定量检测 | 第109页 |
| ·TNF-α mRNA定量检测 | 第109页 |
| 3. 讨论 | 第109-118页 |
| 参考文献 | 第118-121页 |
| 第九章 靶向PCV2 ORF1和ORF2 shRNA的重组腺病毒的构建与鉴定 | 第121-139页 |
| 1 材料与方法 | 第122-129页 |
| 2 结果 | 第129-130页 |
| ·重组pSUPER质粒的酶切鉴定 | 第129页 |
| ·重组pSUPER质粒的序列测定 | 第129页 |
| ·重组穿梭质粒的构建与鉴定 | 第129页 |
| ·腺病毒重组质粒的构建与鉴定 | 第129页 |
| ·重组腺病毒的收获与滴度测定 | 第129-130页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第130页 |
| 3 讨论 | 第130-137页 |
| 参考文献 | 第137-139页 |
| 第十章 重组腺病毒介导的shRNA抑制PCV2在PK15细胞中复制 | 第139-159页 |
| 1 材料与方法 | 第140-143页 |
| 2 结果 | 第143-145页 |
| ·半定量RT-PCR反应条件的确定 | 第143页 |
| ·重组腺病毒感染PK15细胞条件优化 | 第143页 |
| ·重组腺病毒抑制PCV2在PK15细胞上的复制 | 第143-144页 |
| ·重组腺病毒抑制PCV2复制具有剂量依赖性 | 第144页 |
| ·重组腺病毒抑制PCV2复制的持续性 | 第144页 |
| ·重组腺病毒抑制PCV2复制的协同性 | 第144页 |
| ·重组腺病毒表达的shRNA抑制PCV2 mRNA的转录 | 第144-145页 |
| ·重组腺病毒表达的shRNA抑制PCV2蛋白的合成 | 第145页 |
| ·重组腺病毒表达的shRNA抑制PCV2 DNA的复制 | 第145页 |
| ·重组腺病毒清除PK-15细胞中的PCV2 | 第145页 |
| 3 讨论 | 第145-155页 |
| 参考文献 | 第155-159页 |
| 第十一章 重组腺病毒介导的shRNA抑制PCV2在小鼠体内复制 | 第159-168页 |
| 1 材料与方法 | 第160-161页 |
| 2 结果 | 第161页 |
| ·临床症状与肉眼病变的观察 | 第161页 |
| ·组织中病毒含量的检测 | 第161页 |
| ·病毒血症的检测 | 第161页 |
| 3 讨论 | 第161-165页 |
| 参考文献 | 第165-168页 |
| 全文总结 | 第168-169页 |
| 致谢 | 第169-170页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第170页 |
