| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-18页 |
| 第1章 周期性张应变对血管平滑肌细胞表型转化的影响 | 第18-43页 |
| ·引言 | 第18-20页 |
| ·实验材料及仪器 | 第20-23页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·主要溶液成分及配制 | 第21-23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·原代VSMCs 培养 | 第23-24页 |
| ·α-actin 免疫细胞化学实验 | 第24-25页 |
| ·细胞张应变加载系统及实验分组 | 第25-27页 |
| ·细胞面积的测量 | 第27-28页 |
| ·蛋白提取 | 第28页 |
| ·蛋白免疫印迹检测 | 第28-29页 |
| ·RNA 的提取（TRIzol 法） | 第29页 |
| ·RT-PCR 实验 | 第29-30页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第30-31页 |
| ·统计学方法 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-39页 |
| ·VSMCs 原代培养 | 第31-33页 |
| ·不同频率张应变对VSMCs 形态和排列的影响 | 第33-34页 |
| ·不同频率张应变对VSMCs 面积的影响 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE 分离VSMCs 总蛋白 | 第34页 |
| ·不同频率张应变对α-actin 蛋白表达的影响 | 第34-36页 |
| ·不同频率张应变对h1-calponin 蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
| ·琼脂糖变性电泳检测VSMCs 总RNA 的完整性 | 第37页 |
| ·不同频率张应变对表型标志分子的m RNA 的影响 | 第37-38页 |
| ·不同频率张应变对VSMCs 细胞周期的影响 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第2章 p38 在周期性张应变诱导的血管平滑肌细胞表型转化中的调节作用 | 第43-59页 |
| ·引言 | 第43-44页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44-45页 |
| ·主要溶液成分与配制 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·蛋白提取 | 第45页 |
| ·蛋白免疫印迹检测 | 第45页 |
| ·条件培养基的收集和应用 | 第45页 |
| ·统计学方法 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-55页 |
| ·张应变时间依赖地刺激VSMCs 的p38、ERK1/2 和Akt 磷酸化 | 第46页 |
| ·不同频率张应变对p38、ERK1/2 和Akt 的磷酸化的影响 | 第46-48页 |
| ·抑制剂对张应变诱导的p38、ERK1/2 和Akt 活化的抑制作用 | 第48-49页 |
| ·SB 202190 对不同频率张应变诱导的VSMCs 排列的影响 | 第49-50页 |
| ·SB 202190 对不同频率张应变诱导的α-actin 蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
| ·SB 202190 对不同频率张应变诱导的h1-calponin 蛋白表达的影响 | 第51-52页 |
| ·SB 202190 对不同频率张应变诱导的表型标志分子m RNA 的影响 | 第52-53页 |
| ·SB 202190 浓度依赖地抑制张应变诱导的α-actin 的表达 | 第53页 |
| ·不同频率张应变的条件培养基对表型标志物的m RNA 的影响 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第3章 Rho-GDI alpha 在周期性张应变诱导的血管平滑肌细胞表型转化中的作用 | 第59-78页 |
| ·引言 | 第59-60页 |
| ·材料与仪器 | 第60-61页 |
| ·实验仪器 | 第60页 |
| ·试剂 | 第60页 |
| ·主要溶液及配制 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-63页 |
| ·实验分组 | 第61页 |
| ·含SDS 的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第61页 |
| ·Real-time RT-PCR 检测 | 第61-62页 |
| ·RNA 干扰检测Rho-GDI alpha 对h1-calponin 的影响 | 第62-63页 |
| ·统计学分析 | 第63页 |
| ·实验结果 | 第63-67页 |
| ·不同频率张应变对Rho-GDI alpha 表达的影响 | 第63-64页 |
| ·筛选有效的siRNA | 第64页 |
| ·siRNA1 作用时相点 | 第64-65页 |
| ·RNA 干扰Rho-GDI alpha 后对p38 活性的影响 | 第65-66页 |
| ·RNA 干扰Rho-GDI alpha 后对h1-calponin 表达的影响 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| ·小结 | 第71-78页 |
| 第4章 文献综述：力与血管壁细胞的分化 | 第78-95页 |
| ·引言 | 第78页 |
| ·血管壁细胞表型转化概述 | 第78-86页 |
| ·血管壁细胞表型转化的基本概念 | 第78-79页 |
| ·血管壁细胞表型标志蛋白 | 第79-82页 |
| ·血管壁细胞表型转化的影响因素及调节机制 | 第82-86页 |
| ·力对血管壁细胞表型转化的影响 | 第86-93页 |
| ·周向牵张和VSMCs 分化 | 第86-89页 |
| ·切应力与ECs 分化 | 第89-93页 |
| ·力与血管壁细胞的分化在组织工程中的应用 | 第93-94页 |
| ·存在的问题及展望 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 攻读博士学位期间已完成或发表的学术论文 | 第103-104页 |
