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陕西省鸡IBV的分离鉴定及其M蛋白基因的遗传变异研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-14页
第一章 鸡传染性支气管炎的研究进展第14-26页
   ·鸡传染性支气管炎的发生史第14-16页
   ·IBV 的基因特点第16-18页
     ·基因组结构与功能第16-17页
     ·IBV 的复制机制第17-18页
   ·IBV 的诊断第18-24页
     ·流行病学第18页
     ·症状第18-19页
     ·病理变化第19页
     ·IBV 的分离和鉴定第19-21页
     ·IBV 血清学诊断第21-23页
     ·分子生物学技术第23-24页
   ·IBV 的分型第24-25页
   ·IBV 的变异机制第25-26页
第二章 鸡传染性支气管炎病毒M 基因的研究进展第26-31页
   ·IBV M 蛋白的分子结构第26-27页
   ·M 蛋白与IBV 出芽位置第27-29页
   ·M 蛋白的免疫保护性第29页
   ·M 蛋白与疫苗的研制第29页
   ·M 蛋白单克隆抗体研制第29-30页
   ·M 蛋白的变异性第30-31页
第三章 陕西省鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定第31-37页
   ·材料第31-32页
     ·病料来源第31页
     ·SPF 种蛋第31页
     ·非免疫鸡及鸡胚第31页
     ·参考病毒及阳性血清第31页
     ·RT-PCR 主要试剂第31-32页
     ·M 基因序列分析参考毒株第32页
   ·方法第32-33页
     ·病料处理第32页
     ·鸡胚接种及病变观察第32页
     ·血清学试验第32-33页
     ·分子生物学试验第33页
     ·动物回归试验第33页
     ·鸡胚接种及 EID50测定第33页
   ·结果第33-36页
     ·HA 及 HI 试验第33-34页
     ·鸡胚发育情况第34页
     ·干扰NDV 试验第34页
     ·鸡胚中和试验第34-35页
     ·RT-PCR 结果第35页
     ·M 基因序列分析结果第35页
     ·动物回归试验第35页
     ·分离毒对鸡胚的致病力及 EID50测定第35-36页
   ·讨论第36-37页
第四章 IBV 分离株 M 基因的克隆与遗传变异分析第37-46页
   ·材料第37-38页
     ·毒株第37页
     ·宿主菌与载体第37页
     ·试剂第37页
     ·主要实验仪器第37-38页
   ·方法第38-42页
     ·引物设计与合成第38页
     ·IBV 总RNA 的提取第38页
     ·IBV RNA cDNA 链的合成与 M 蛋白基因 PCR 扩增第38页
     ·PCR 产物回收第38-39页
     ·克隆载体的构建第39-40页
     ·重组质粒的抽提第40-41页
     ·阳性质粒的筛选第41页
     ·阳性质粒M 基因测序第41页
     ·测序结果分析第41-42页
   ·结果与分析第42-45页
     ·IBV 分离株 RNA 的 RT-PCR第42页
     ·阳性质粒筛选结果第42-43页
     ·IBV M 蛋白的同源性分析第43-44页
     ·IBV M 蛋白二级结构和跨膜区分析第44-45页
   ·讨论第45-46页
第五章 IBV 陕西分离株 M 蛋白 B 细胞抗原表位稳定性的分析第46-52页
   ·材料与方法第46页
     ·试验毒株及其M 蛋白核苷酸和氨基酸序列第46页
     ·M 蛋白同源性、二级结构和 B 细胞抗原表位的预测分析第46页
   ·结果第46-50页
     ·M 蛋白同源性分析结果第46-47页
     ·M 蛋白二级结构预测结果第47-48页
     ·M 蛋白 B 细胞抗原表位预测结果第48-50页
   ·讨论第50-52页
第六章 IBV 分离株 G5 的 M 蛋白原核表达及鉴定第52-65页
   ·试验试剂与材料第52-54页
     ·主要试剂第52-53页
     ·主要试验材料第53页
     ·主要仪器第53页
     ·普通试剂的配制第53页
     ·SDS-PAGE 常用试剂配制第53-54页
     ·Western-blotting 常用试剂的配制第54页
   ·试验方法与步骤第54-57页
     ·引物的设计与合成第54-55页
     ·表达载体的构建第55页
     ·表达条件优化第55页
     ·表达产物的 SDS-PAGE 检测第55-56页
     ·表达产物鉴定第56-57页
   ·试验结果第57-62页
     ·克隆载体的构建第57-58页
     ·表达载体的构建第58-59页
     ·表达条件优化第59-62页
     ·Western-blotting 鉴定结果第62页
   ·讨论第62-65页
     ·M 蛋白表达系统的选择第62-63页
     ·表达条件的优化第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-74页
附录第74-75页
致谢第75-76页
作者简介第76页

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