中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-14页 |
第一章 鸡传染性支气管炎的研究进展 | 第14-26页 |
·鸡传染性支气管炎的发生史 | 第14-16页 |
·IBV 的基因特点 | 第16-18页 |
·基因组结构与功能 | 第16-17页 |
·IBV 的复制机制 | 第17-18页 |
·IBV 的诊断 | 第18-24页 |
·流行病学 | 第18页 |
·症状 | 第18-19页 |
·病理变化 | 第19页 |
·IBV 的分离和鉴定 | 第19-21页 |
·IBV 血清学诊断 | 第21-23页 |
·分子生物学技术 | 第23-24页 |
·IBV 的分型 | 第24-25页 |
·IBV 的变异机制 | 第25-26页 |
第二章 鸡传染性支气管炎病毒M 基因的研究进展 | 第26-31页 |
·IBV M 蛋白的分子结构 | 第26-27页 |
·M 蛋白与IBV 出芽位置 | 第27-29页 |
·M 蛋白的免疫保护性 | 第29页 |
·M 蛋白与疫苗的研制 | 第29页 |
·M 蛋白单克隆抗体研制 | 第29-30页 |
·M 蛋白的变异性 | 第30-31页 |
第三章 陕西省鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定 | 第31-37页 |
·材料 | 第31-32页 |
·病料来源 | 第31页 |
·SPF 种蛋 | 第31页 |
·非免疫鸡及鸡胚 | 第31页 |
·参考病毒及阳性血清 | 第31页 |
·RT-PCR 主要试剂 | 第31-32页 |
·M 基因序列分析参考毒株 | 第32页 |
·方法 | 第32-33页 |
·病料处理 | 第32页 |
·鸡胚接种及病变观察 | 第32页 |
·血清学试验 | 第32-33页 |
·分子生物学试验 | 第33页 |
·动物回归试验 | 第33页 |
·鸡胚接种及 EID50测定 | 第33页 |
·结果 | 第33-36页 |
·HA 及 HI 试验 | 第33-34页 |
·鸡胚发育情况 | 第34页 |
·干扰NDV 试验 | 第34页 |
·鸡胚中和试验 | 第34-35页 |
·RT-PCR 结果 | 第35页 |
·M 基因序列分析结果 | 第35页 |
·动物回归试验 | 第35页 |
·分离毒对鸡胚的致病力及 EID50测定 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第四章 IBV 分离株 M 基因的克隆与遗传变异分析 | 第37-46页 |
·材料 | 第37-38页 |
·毒株 | 第37页 |
·宿主菌与载体 | 第37页 |
·试剂 | 第37页 |
·主要实验仪器 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-42页 |
·引物设计与合成 | 第38页 |
·IBV 总RNA 的提取 | 第38页 |
·IBV RNA cDNA 链的合成与 M 蛋白基因 PCR 扩增 | 第38页 |
·PCR 产物回收 | 第38-39页 |
·克隆载体的构建 | 第39-40页 |
·重组质粒的抽提 | 第40-41页 |
·阳性质粒的筛选 | 第41页 |
·阳性质粒M 基因测序 | 第41页 |
·测序结果分析 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-45页 |
·IBV 分离株 RNA 的 RT-PCR | 第42页 |
·阳性质粒筛选结果 | 第42-43页 |
·IBV M 蛋白的同源性分析 | 第43-44页 |
·IBV M 蛋白二级结构和跨膜区分析 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第五章 IBV 陕西分离株 M 蛋白 B 细胞抗原表位稳定性的分析 | 第46-52页 |
·材料与方法 | 第46页 |
·试验毒株及其M 蛋白核苷酸和氨基酸序列 | 第46页 |
·M 蛋白同源性、二级结构和 B 细胞抗原表位的预测分析 | 第46页 |
·结果 | 第46-50页 |
·M 蛋白同源性分析结果 | 第46-47页 |
·M 蛋白二级结构预测结果 | 第47-48页 |
·M 蛋白 B 细胞抗原表位预测结果 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
第六章 IBV 分离株 G5 的 M 蛋白原核表达及鉴定 | 第52-65页 |
·试验试剂与材料 | 第52-54页 |
·主要试剂 | 第52-53页 |
·主要试验材料 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·普通试剂的配制 | 第53页 |
·SDS-PAGE 常用试剂配制 | 第53-54页 |
·Western-blotting 常用试剂的配制 | 第54页 |
·试验方法与步骤 | 第54-57页 |
·引物的设计与合成 | 第54-55页 |
·表达载体的构建 | 第55页 |
·表达条件优化 | 第55页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第55-56页 |
·表达产物鉴定 | 第56-57页 |
·试验结果 | 第57-62页 |
·克隆载体的构建 | 第57-58页 |
·表达载体的构建 | 第58-59页 |
·表达条件优化 | 第59-62页 |
·Western-blotting 鉴定结果 | 第62页 |
·讨论 | 第62-65页 |
·M 蛋白表达系统的选择 | 第62-63页 |
·表达条件的优化 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
附录 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简介 | 第76页 |