| 图片目录 | 第1页 |
| 表格目录 | 第7-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 缩略语 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-34页 |
| 1 转基因技术在水稻上的应用 | 第13-19页 |
| ·PEG(聚乙二醇)介导法 | 第14页 |
| ·电激法 | 第14-15页 |
| ·基因枪法 | 第15-17页 |
| ·基因枪法的优缺点 | 第15-16页 |
| ·基因枪法在水稻上的应用 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导法 | 第17-19页 |
| ·农杆菌介导法的优缺点 | 第17-18页 |
| ·农杆菌介导法在水稻上的应用 | 第18-19页 |
| 2 RNA干涉(转录后基因沉默) | 第19-21页 |
| ·RNA干涉原理 | 第19页 |
| ·RNA干扰技术的特点 | 第19-21页 |
| ·RNA干涉技术在水稻基因研究上的应用 | 第21页 |
| 3 甜菜碱的功能、合成途径及其相关基因工程 | 第21-27页 |
| 参考文献 | 第27-34页 |
| 第二部分 水稻BADH2基因RNAi干涉表达载体的构建 | 第34-44页 |
| 1 引言 | 第34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·供试水稻品种 | 第34页 |
| ·质粒与转化载体 | 第34-35页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·植物材料的处理和RNA的提取 | 第36页 |
| ·植物材料的处理 | 第36页 |
| ·RNA的提取 | 第36页 |
| ·RT-PCR | 第36-37页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增 | 第37页 |
| ·克隆与测序 | 第37-39页 |
| ·PCR产物的回收 | 第37页 |
| ·连接 | 第37页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·转化 | 第38页 |
| ·重组子快速鉴定 | 第38-39页 |
| ·测序分析 | 第39页 |
| ·载体构建 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·BADH2基因片段的扩增 | 第39-40页 |
| ·植物表达载体的鉴定 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 第三部分 农杆菌介导水稻BADH2基因RNAi干涉表达载体的转化 | 第44-59页 |
| 1 引言 | 第44-45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-52页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·供试水稻品种 | 第45页 |
| ·质粒与转化载体 | 第45页 |
| ·转化材料 | 第45页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·农杆菌转化 | 第46-52页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第46页 |
| ·农杆菌感受态的转化 | 第46-47页 |
| ·农杆菌菌株的鉴定 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导法转化水稻 | 第48-50页 |
| ·培养基 | 第48-49页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导及继代 | 第49页 |
| ·愈伤组织的预培养 | 第49页 |
| ·农杆菌的培养及处理 | 第49页 |
| ·共培养 | 第49-50页 |
| ·洗除农杆菌 | 第50页 |
| ·愈伤组织的筛选 | 第50页 |
| ·抗性愈伤组织的继代与植株的再生 | 第50页 |
| ·转化率和分化率计算 | 第50页 |
| ·转基因水稻的种植管理 | 第50页 |
| ·转基因水稻T_0代叶片的潮霉素抗性检测和PCR检测 | 第50-52页 |
| ·转化植株叶片的潮霉素抗性鉴定 | 第50-51页 |
| ·阳性转化株的PCR检测 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-56页 |
| ·转化农杆菌的鉴定 | 第52页 |
| ·转BADH2基因RNA干涉表达载体水稻植株的获得 | 第52-54页 |
| ·比较不同材料转化效果 | 第52页 |
| ·除草剂basta作为筛选剂时的最适浓度 | 第52-54页 |
| ·转基因水稻T_0代叶片的潮霉素抗性检测和PCR检测 | 第54-56页 |
| ·转化植株叶片的潮霉素抗性鉴定 | 第54-55页 |
| ·阳性转化株的PCR检测 | 第55页 |
| ·上述两种方法检测结果的比较分析 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| ·农杆菌介导水稻遗传转化相关的讨论 | 第56-57页 |
| ·不同筛选剂作用下,抗性愈伤的分化再生差异 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第四部分 T_1代转基因水稻植株遗传分析及耐盐性鉴定 | 第59-67页 |
| 1 引言 | 第59页 |
| 2 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·主要设备与仪器 | 第59-60页 |
| ·主要药品试剂 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-61页 |
| ·种子预处理 | 第60页 |
| ·试验方法 | 第60-61页 |
| ·分离比检测 | 第60-61页 |
| ·NaCl溶液胁迫下幼苗生长试验 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-63页 |
| ·转基因水稻的潮霉素抗感比分析 | 第61-62页 |
| ·盐胁迫对水稻幼苗根和芽生长的影响 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| ·转基因种子和对照株种子在发芽率、发芽速度方面的比较 | 第63页 |
| ·盐胁迫对水稻幼苗根和芽生长的影响 | 第63-64页 |
| ·在盐胁迫条件下水稻转化株和对照株在根和芽的抑制率方面的比较 | 第64-65页 |
| 5 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-72页 |
| 已发表或待发表的文章 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
