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构建精子特异CATSPER1 DNA避孕疫苗的初步研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
第一部分 前言第8-18页
 一、避孕疫苗研究的基本概况第8-13页
  1 激素类避孕疫苗的研究概况第8-9页
  2 卵透明带避孕疫苗研究概况第9页
  3 精子特异抗原避孕疫苗的研究概况第9-13页
   ·受精抗原1(fertilization antigen 1,FA-1)第10页
   ·精子蛋白17(sperm protein 17,Sp17)第10-11页
   ·透明质酸酶(hyaluronidase PH-20,PH-20)第11页
   ·乳酸脱氢酶C4同功酶第11-12页
   ·受精素β(Fertilin β)第12-13页
 二、CATSPER1的研究概况第13-15页
  1 CATSPER1基因及其蛋白质结构第13-14页
  2 CATSPER1在精子表面的定位第14页
  3 CATSPER1在受精过程中的作用第14-15页
  4 CATSPER1是免疫避孕疫苗研究中重要的候选靶分子第15页
 三、C3d分子免疫佐剂的研究概况第15-17页
 四、本研究的目的及意义第17-18页
第二部分 实验材料与方法第18-30页
   ·实验材料与仪器第18-20页
     ·主要材料与试剂第18-19页
     ·主要仪器设备第19-20页
   ·本研究技术路线第20页
   ·pVAX1-Catsper1_(S1-S6)和pVAX1-Catsper1_(S1-S6)-C3d3真核表达载体的构建第20-28页
     ·pVAX1质粒的获得第20页
     ·引物设计第20-21页
     ·基因扩增第21-22页
     ·构建重组质粒pVAX1-Catsper1_(S1-S6)第22-23页
     ·重组质粒鉴定第23-25页
     ·重组质粒pVAX1-Catsper1_(S1-S6)-C3d3的构建第25-28页
   ·动物免疫实验第28页
   ·DNA疫苗免疫的抗体检测第28-30页
     ·全精子抗原检测抗体第28-29页
     ·间接免疫荧光法检测兔抗精子抗体与小鼠精子的反应第29-30页
第三部分 实验结果第30-37页
   ·RT-PCR法获得目的基因片段第30-31页
   ·pVAX1-Catsper1_(S1-S6)和pVAX1-Catsper1_(S1-S6)-C3d3真核表达载体的构建结果第31-33页
   ·两种DNA疫苗的免疫研究结果第33-37页
     ·免疫新西兰兔的抗体反应结果第33-34页
     ·免疫小鼠的抗体反应结果第34-35页
     ·间接免疫荧光检测兔抗精子抗体与小鼠精子的反应结果第35-37页
第四部分 讨论第37-43页
   ·pVAX1-Catsper1_(S1-S6)和pVAX1-Catsper1_(S1-S6)-C3d3真核表达载体构建第37-39页
   ·免疫效能的分析第39-42页
     ·全精子抗原ELISA法检测抗精子抗体反应第39-40页
     ·间接免疫荧光法检测抗精子抗体与小鼠精子的反应第40页
     ·C3d3分子免疫佐剂效能分析第40-42页
   ·结论第42-43页
第五部分 参考文献第43-48页
附录第48-61页
 附录Ⅰ 本研究中所用常规实验方法第48-51页
 附录Ⅱ 本研究中所用试剂配方第51-55页
 附录Ⅲ 质粒pVAX1、pSG5.C3d3.YL图谱第55-56页
 附录Ⅳ 重组质粒测序结果第56-60页
 附录Ⅴ 英文缩略词索引第60-61页
致谢第61页

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