引言 | 第1-18页 |
1 小尾寒羊繁殖性能的简介 | 第11页 |
2 小尾寒羊高繁殖力候选基因 | 第11-15页 |
·抑制素α亚基基因——INHA | 第12-13页 |
·骨形态发生蛋白4(BMP4)和骨形态发生蛋白7(BMP7) | 第13-15页 |
3 PCR-SSCP | 第15-16页 |
·PCR-SSCP的建立与发展 | 第15页 |
·PCR-SSCP方法的原理 | 第15页 |
·PCR-SSCP的特点 | 第15-16页 |
·PCR-SSCP方法的应用 | 第16页 |
4 一种简单的提高PCR扩增特异性的方法—AuNPs-PCR | 第16-17页 |
5 本研究的主要内容和目的 | 第17-18页 |
材料与方法 | 第18-32页 |
1 试验材料 | 第18-21页 |
·试验绵羊来源及采样方法: | 第18页 |
·药品和酶 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·分析工具软件 | 第19-20页 |
·溶液试剂配制 | 第20-21页 |
2 试验方法 | 第21-29页 |
·羊血液DNA的提取 | 第21-22页 |
·DNA浓度和纯度的检测 | 第22页 |
·SSCP分析方法的一般程序 | 第22-29页 |
·基因型的判定 | 第29页 |
3 统计分析方法 | 第29-32页 |
·群体基因频率和基因型频率的计算 | 第29-30页 |
·INHA、BMP4和BMP7三种基因不同位点Hardy-Weinberg平衡状态的检验 | 第30页 |
·群体内遗传变异的度量指标——杂合度 | 第30-31页 |
·有效等位基因数 | 第31页 |
·多态信息含量(polymorphic information content,PIC)值的计算 | 第31页 |
·INHA、BMP4和BMP7三个基因位点与小尾寒羊产羔数关系的研究 | 第31-32页 |
结果与分析 | 第32-45页 |
1 绵羊基因组DNA和PCR产物结果 | 第32-33页 |
·基因组DNA提取结果、 | 第32页 |
·PCR产物的扩增结果 | 第32-33页 |
2 绵羊INHA、BMP4和BMP7三个基因SSCP结果 | 第33-35页 |
·INHA基因PCR-SSCP检测结果 | 第33-34页 |
·BMP4基因PCR-SSCP检测结果 | 第34页 |
·BMP7基因PCR-SSCP检测结果 | 第34-35页 |
3 序列分析 | 第35-36页 |
·INHA基因的测序图分析 | 第35-36页 |
·BMP4基因的测序图分析 | 第36页 |
·BMP7基因的测序图分析 | 第36页 |
4 多态性位点的序列比较、氨基酸序列比较和氨基酸二级结构的预测 | 第36-40页 |
·INHA引物2位点的DNA序列比较 | 第36-37页 |
·INHA基因引物2位点的序列比较、氨基酸序列比较和氨基酸二级结构的预测 | 第37页 |
·BMP4基因引物4位点的序列比较、氨基酸序列比较和氨基酸二级结构的预测 | 第37-40页 |
5 群体遗传学分析 | 第40-45页 |
·不同绵羊品种各位点基因型频率和等位基因频率分析 | 第40-42页 |
·Hardy-Weinberg平衡状态的检验 | 第42页 |
·INHA和BMP4基因的遗传特性分析 | 第42-43页 |
·有多态的基因位点与小尾寒羊产羔数的相关性分析 | 第43-45页 |
讨论 | 第45-56页 |
1 血液样品的采样、保存及其DNA的提取 | 第45页 |
2 影响PCR扩增反应的因素 | 第45-48页 |
·模板的质量 | 第45页 |
·引物的设计、选择和保存 | 第45-46页 |
·引物和dNTP的浓度 | 第46-47页 |
·退火温度 | 第47页 |
·镁离子的浓度 | 第47-48页 |
·退火时间 | 第48页 |
·循环数 | 第48页 |
3 用AuNPs-PCR来提高DNA扩增的特异性 | 第48-50页 |
4 关于PCR产物的污染及对策 | 第50-51页 |
5 影响SSCP的因素 | 第51-53页 |
·PCR扩增产物的质量 | 第51页 |
·点突变 | 第51-52页 |
·聚丙烯酰胺凝胶成分和浓度 | 第52页 |
·上样缓冲液与变性 | 第52页 |
·电泳条件 | 第52-53页 |
6 SSCP结果的分析 | 第53页 |
7.群体遗传学分析 | 第53-54页 |
8 INHA基因与绵羊高繁殖力的关系 | 第54-55页 |
9 BMP4基因与小尾寒羊高繁殖力的关系 | 第55页 |
10 BMP7基因与小尾寒羊高繁殖力的关系 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
在读期间发表论文 | 第64-65页 |
作者简历 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |