| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第一部分 β-分泌酶小分子抑制剂发现 | 第13-58页 |
| 第一章 引言 | 第13-31页 |
| ·研究背景 | 第13-25页 |
| ·概述 | 第13-14页 |
| ·老年痴呆的表现及分期表现 | 第14-17页 |
| ·老年痴呆的病理特征 | 第17-20页 |
| ·老年痴呆的病因学探究 | 第20-22页 |
| ·老年痴呆的分类 | 第22-25页 |
| ·老年痴呆的治疗现状 | 第25-28页 |
| ·我们的研究策略 | 第28-31页 |
| 第二章 抑制剂筛选评价系统建立 | 第31-45页 |
| ·菌种和质粒 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-39页 |
| ·β-分泌酶克隆的构建 | 第31-39页 |
| ·PCR扩增β-分泌酶（1-454） | 第31-32页 |
| ·全基因合成6×His－tag核甘酸序列 | 第32-33页 |
| ·双酶切载体pFast Bac1、β-分泌酶（1-454）和6×His－tag片段 | 第33-35页 |
| ·连接载体pFast Bac1、BACE1（1-454）6×His－tag片段 | 第35-36页 |
| ·转化连接产物到DH5α感受态细胞中 | 第36页 |
| ·鉴定阳性BACE1－pFastBac1 克隆 | 第36-37页 |
| ·转座 | 第37-38页 |
| ·分离鉴定重组的Bacmid DNA | 第38-39页 |
| ·转染TN细胞 | 第39页 |
| ·β-分泌酶的表达及纯化 | 第39-41页 |
| ·β-分泌酶的表达 | 第39-40页 |
| ·β-分泌酶的纯化 | 第40-41页 |
| ·β-分泌酶酶活测定 | 第41-44页 |
| ·测活原理 | 第41-42页 |
| ·测活体系 | 第42-43页 |
| ·测活结果 | 第43-44页 |
| ·β-分泌酶抑制剂筛选方法建立 | 第44-45页 |
| 第三章 β-分泌酶小分子抑制剂筛选及评价 | 第45-54页 |
| ·β-分泌酶小分子抑制剂筛选 | 第45-49页 |
| ·动物水平评价 | 第49-53页 |
| ·水迷宫实验评价 | 第49-51页 |
| ·避暗试验评价 | 第51-52页 |
| ·动物水平实验总结 | 第52-53页 |
| ·β-分泌酶小分子抑制剂筛选评价及结果讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 第二部分 葡萄糖激酶激动剂筛选和相应作用机理探讨 | 第58-98页 |
| 第一章 引言 | 第58-63页 |
| ·葡萄糖激酶的定位和结构 | 第58-59页 |
| ·葡萄糖激酶在糖代谢中的功能 | 第59-60页 |
| ·葡萄糖激酶与糖尿病的关系 | 第60-63页 |
| 第二章 葡萄糖激酶激动剂筛选评价系统的建立 | 第63-81页 |
| ·葡萄糖激酶的克隆、表达和纯化 | 第63-67页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·LGK2 原核表达质粒pQE30-LGK2 的构建 | 第63-64页 |
| ·LGK2 的表达与纯化 | 第64-67页 |
| ·LGK2 的酶活测定 | 第67-70页 |
| ·葡萄糖激酶激动剂筛选评价系统建立 | 第70-79页 |
| ·基于SPR技术（BIAcore 551）的化合物结合活性筛选 | 第70-75页 |
| ·测活原理 | 第70-72页 |
| ·测活方法 | 第72页 |
| ·测活结果 | 第72-75页 |
| ·酶活筛选 | 第75-79页 |
| ·酶活筛选评价系统的建立 | 第75-78页 |
| ·化合物在酶活水平的筛选 | 第78-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-81页 |
| 第三章 影响葡萄糖激酶活性的关键氨基酸残基研究 | 第81-93页 |
| ·关键氨基酸残基研究背景 | 第81-82页 |
| ·定点突变 | 第82-87页 |
| ·定点突变克隆 | 第82-84页 |
| ·定点突变表达与纯化 | 第84-87页 |
| ·突变体结构检测 | 第87-90页 |
| ·荧光检测 | 第87-89页 |
| ·CD检测 | 第89-90页 |
| ·酶活及酶动力学检测 | 第90-91页 |
| ·结果与讨论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-98页 |
| 发表文章、申请专利以及获奖情况 | 第98-100页 |
| 一、论文发表和专利申请 | 第98-99页 |
| 二、获奖情况 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
