| 表格目录 | 第1-7页 |
| LIST OF TABLES | 第7-8页 |
| 插图目录 | 第8-10页 |
| LIST OF FIGURE | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章：文献综述—侵染葱属植物病毒病的研究进展 | 第16-41页 |
| 1.侵染葱属植物的马铃薯Y病毒属病毒 | 第16-26页 |
| ·洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarf virus，OYDV) | 第17-21页 |
| ·韭葱黄条病毒(Leek yellow stripe virus，LYSV) | 第21-24页 |
| ·葱黄条病毒(Shallot yellow stripe virus，SYSV) | 第24-26页 |
| ·薤花叶病毒(Scallion mosaic virus，ScaMV) | 第26页 |
| 2.侵染葱属植物的香石竹潜隐病毒属病毒 | 第26-29页 |
| ·青葱潜隐病毒(Shallot latent virus，ShLV) | 第27-29页 |
| ·大蒜普通潜隐病毒(Garlic common latent virus，GarCLV) | 第29页 |
| 3.侵染葱属植物的马铃薯X病毒属病毒 | 第29-30页 |
| ·薤X病毒(Scallion virus X，ScaVX) | 第29-30页 |
| 4.侵染葱属植物的葱X病毒属病毒 | 第30-36页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 第二章：葱属X病毒属主要成员外壳蛋白基因克隆表达、抗血清制备及其血清学研究 | 第41-64页 |
| 材料与方法 | 第42-51页 |
| 1 实验材料 | 第42-43页 |
| ·病样 | 第42页 |
| ·菌株和载体 | 第42页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第42页 |
| ·PCR引物 | 第42-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-51页 |
| ·用RNeasy Plant mini(QIAGEN)试剂盒提取大蒜病叶总RNA | 第43页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第43页 |
| ·CP基因的PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·PCR产物的切胶纯化 | 第44页 |
| ·克隆载体pGEM-CP的构建 | 第44-46页 |
| ·PCR产物与pGEM-T载体的连接 | 第44页 |
| ·感受态细胞制备(CaCl_2法) | 第44页 |
| ·转化 | 第44-45页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第45-46页 |
| ·阳性克隆质粒DNA的制备 | 第45页 |
| ·阳性克隆PCR检测 | 第45页 |
| ·DNA序列测定 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体pSBET-CP的构建 | 第46-47页 |
| ·酶切与回收目的基因和表达载体片段 | 第46页 |
| ·目的基因片段与表达载体的连接 | 第46页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第46-47页 |
| ·IPTG诱导表达 | 第47页 |
| ·SDS-PAGE检测目的基因的表达 | 第47-48页 |
| ·抗血清制备 | 第48-49页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第48-49页 |
| ·免疫小鼠制备抗血清 | 第49页 |
| ·吸附去除非目的蛋白产生的抗体 | 第49页 |
| ·Western blot检测抗血清纯度 | 第49-51页 |
| ·SDS-PAGE | 第49页 |
| ·Western blot | 第49-51页 |
| ·现有葱X病毒属成员CP抗血清间的血清学关系测定 | 第51页 |
| 结果与分析 | 第51-62页 |
| 1 PCR扩增GarV-A、GarV-B、GarV-C、GarV-D、GarV-E、GarV-X的CP基因 | 第51-53页 |
| ·PCR扩增GarV-A、GarV-B、GarV-D、GarV-E、GarV-X的CP基因 | 第51-52页 |
| ·GarV-C CP基因的扩增 | 第52-53页 |
| 2 CP基因的克隆和鉴定 | 第53-54页 |
| 3 CP基因的序列测定及分析 | 第54页 |
| 4 原核表达载体的构建与鉴定 | 第54-56页 |
| 5 原核表达产物的SDS-PAGE分析 | 第56页 |
| 6 抗血清的western blot检测 | 第56-59页 |
| 7 GarVA-CP、GarVB-CP、GarVC-CP、GarVD-CP、GarVE-CP、GarVX-CP的血清学关系研究 | 第59-62页 |
| 讨论 | 第62-64页 |
| 第三章:洋葱黄矮病毒和韭葱黄条病毒外壳蛋白基因的原核表达、抗血清制备及其血清学关系研究 | 第64-71页 |
| 材料与方法 | 第64-67页 |
| 1.实验材料 | 第64-65页 |
| ·样品 | 第64页 |
| ·菌株和载体 | 第64页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第64-65页 |
| ·引物 | 第65页 |
| 2.实验方法 | 第65-67页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第65页 |
| ·抗血清的制备和Western blot分析 | 第65-66页 |
| ·田间样品的间接ELISA法检测 | 第66-67页 |
| 结果与分析 | 第67-69页 |
| 1 原核表达载体的构建和鉴定 | 第67页 |
| 2 OYDV和LYSV外壳蛋白基因的原核表达 | 第67-68页 |
| 3 抗血清的Western blot检测 | 第68-69页 |
| 4 间接ELISA法检测大蒜病样 | 第69页 |
| 讨论 | 第69-71页 |
| 第四章: 大蒜X病毒(GarV-X)全长cDNA克隆的构建 | 第71-78页 |
| 材料与方法 | 第71-75页 |
| 1.实验材料 | 第71-72页 |
| 2.实验方法 | 第72-73页 |
| 1.全长cDNA片段获得策略 | 第72页 |
| 2.P1、P2、P3、P4片段的获得 | 第72-73页 |
| ·PCR扩增 | 第72-73页 |
| ·克隆载体pGEM-P1、pGFM-P2、pGEM-P3、pGEM-P4的构建 | 第73页 |
| ·PCR产物与pGEM-T载体的连接 | 第73页 |
| ·感受态细胞制备(CaCl_2法) | 第73页 |
| ·转化 | 第73页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第73页 |
| ·阳性克隆质粒DNA的制备 | 第73页 |
| ·4.2 阳性克隆PCR检测 | 第73页 |
| ·DNA序列测定 | 第73页 |
| ·双酶切获得P1、P2、P3、P4片段 | 第73页 |
| 3 全长cDNA片段的拼接克隆 | 第73-75页 |
| 结果与分析 | 第75-77页 |
| 1 GVX-P1、GVX-P2、GVX-P3、GVX-P4片段的获得 | 第75页 |
| 2 全长cDNA片段的拼接克隆 | 第75-77页 |
| 讨论 | 第77-78页 |
| 第五章：主要结论与进一步研究建议 | 第78-79页 |
| 1.主要结论 | 第78页 |
| 2.进一步研究建议 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 硕士期间形成的论文 | 第82页 |
