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Ccd1基因发育表达谱和初步功能研究

目录第1-5页
英文缩写词表第5-6页
中文摘要第6-7页
英文摘要第7-9页
前言第9-12页
生物信息学分析第12-20页
 1.染色体定位分析第15页
 2.转录本大小分析和编码蛋白分析第15-16页
 3.同源蛋白分析第16-18页
 4.电子表达谱分析第18-20页
材料和方法第20-36页
 1.Ccd-N的原核表达第20页
 2.抗体制备第20-21页
 3.酶联免疫吸附实验(ELISA)测定抗体滴度第21-22页
 4.抗体纯化第22页
 5.Western Blot分析第22-23页
 6.P19细胞向神经元分化模型第23-24页
 7.原位杂交第24-30页
 8.免疫细胞和组织化学第30页
 9.酵母双杂交第30-35页
 10.定位实验第35-36页
结果第36-58页
 1.融合蛋白的原核表达和抗体制备第36-38页
 2.Ccd1基因发育表达谱研究结果第38-42页
   ·多组织RT-PCR第38页
     ·整体胚胎原位杂交第38-39页
     ·胚胎切片免疫组织化学第39-40页
     ·组织切片原位杂交第40-41页
     ·mCcd1蛋白在多组织表达的western分析第41-42页
 3.Ccd1过表达促进P19向神经元分化第42-48页
   ·维甲酸诱导4天,不能分化成神经元和神经胶质细胞第42-43页
   ·无维甲酸诱导条件下过表达细胞不能进行神经分化第43-44页
   ·维甲酸诱导2天,过表达细胞能分化成神经元第44-46页
   ·在Ccd1过表达P19细胞向神经元分化过程中Wnt/JNK通路中的基因表达第46-48页
 4.Ccd1的细胞内定位和共定位研究结果第48-50页
   ·Ccd1的细胞内定位结果第48-49页
   ·Ccd1和细胞骨架蛋白共定位结果第49-50页
 5.酵母双杂交筛选结果第50-54页
 6.Ccd1与SH3BP5的相互作用分析第54-58页
讨论第58-66页
 1.Ccd1通过调节Wnt/JNK信号通路参与了脊椎动物神经系统的发育第58-59页
 2.Ccd1的表达模式表明它参与了神经系统的发育第59-60页
 3.Ccd1在体外和体内都促进神经元分化第60-66页
   ·过表达Ccd1促进神经分化而RNA干涉Ccd1抑制神经分化第60-61页
   ·Ccd1通过调节细胞骨架促进神经分化第61-62页
   ·神经分化相关的基因表达模式表明Ccd1促进神经分化第62-63页
   ·Ccd1可能通过Wnt/JNK通路调节P19细胞向神经元分化第63-66页
总结第66-67页
参考文献第67-73页
附录第73-76页
在读期间发表和投稿的文章第76-83页
致谢第83页

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