目录 | 第1-5页 |
英文缩写词表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-12页 |
生物信息学分析 | 第12-20页 |
1.染色体定位分析 | 第15页 |
2.转录本大小分析和编码蛋白分析 | 第15-16页 |
3.同源蛋白分析 | 第16-18页 |
4.电子表达谱分析 | 第18-20页 |
材料和方法 | 第20-36页 |
1.Ccd-N的原核表达 | 第20页 |
2.抗体制备 | 第20-21页 |
3.酶联免疫吸附实验(ELISA)测定抗体滴度 | 第21-22页 |
4.抗体纯化 | 第22页 |
5.Western Blot分析 | 第22-23页 |
6.P19细胞向神经元分化模型 | 第23-24页 |
7.原位杂交 | 第24-30页 |
8.免疫细胞和组织化学 | 第30页 |
9.酵母双杂交 | 第30-35页 |
10.定位实验 | 第35-36页 |
结果 | 第36-58页 |
1.融合蛋白的原核表达和抗体制备 | 第36-38页 |
2.Ccd1基因发育表达谱研究结果 | 第38-42页 |
·多组织RT-PCR | 第38页 |
·整体胚胎原位杂交 | 第38-39页 |
·胚胎切片免疫组织化学 | 第39-40页 |
·组织切片原位杂交 | 第40-41页 |
·mCcd1蛋白在多组织表达的western分析 | 第41-42页 |
3.Ccd1过表达促进P19向神经元分化 | 第42-48页 |
·维甲酸诱导4天,不能分化成神经元和神经胶质细胞 | 第42-43页 |
·无维甲酸诱导条件下过表达细胞不能进行神经分化 | 第43-44页 |
·维甲酸诱导2天,过表达细胞能分化成神经元 | 第44-46页 |
·在Ccd1过表达P19细胞向神经元分化过程中Wnt/JNK通路中的基因表达 | 第46-48页 |
4.Ccd1的细胞内定位和共定位研究结果 | 第48-50页 |
·Ccd1的细胞内定位结果 | 第48-49页 |
·Ccd1和细胞骨架蛋白共定位结果 | 第49-50页 |
5.酵母双杂交筛选结果 | 第50-54页 |
6.Ccd1与SH3BP5的相互作用分析 | 第54-58页 |
讨论 | 第58-66页 |
1.Ccd1通过调节Wnt/JNK信号通路参与了脊椎动物神经系统的发育 | 第58-59页 |
2.Ccd1的表达模式表明它参与了神经系统的发育 | 第59-60页 |
3.Ccd1在体外和体内都促进神经元分化 | 第60-66页 |
·过表达Ccd1促进神经分化而RNA干涉Ccd1抑制神经分化 | 第60-61页 |
·Ccd1通过调节细胞骨架促进神经分化 | 第61-62页 |
·神经分化相关的基因表达模式表明Ccd1促进神经分化 | 第62-63页 |
·Ccd1可能通过Wnt/JNK通路调节P19细胞向神经元分化 | 第63-66页 |
总结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
附录 | 第73-76页 |
在读期间发表和投稿的文章 | 第76-83页 |
致谢 | 第83页 |