| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-20页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·国内外研究进展 | 第11-17页 |
| ·昆虫病原真菌孢子萌发和附着胞附着的机制研究 | 第11-12页 |
| ·昆虫病原真菌穿透寄主表皮的机制研究 | 第12-14页 |
| ·病原真菌穿透昆虫体壁后的杀虫分子机制 | 第14-17页 |
| ·病原真菌侵染寄主昆虫的过程 | 第17-18页 |
| ·研究目的 | 第18页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第18-19页 |
| ·PCR 分析蝗虫和绿僵菌引物的灵敏度 | 第18页 |
| ·分析水洗涤对蝗虫血细胞破裂的影响 | 第18页 |
| ·正交试验优化蝗虫血细胞裂解和DNA 降解的条件 | 第18页 |
| ·从感病蝗虫体内分离纯化绿僵菌菌体及纯度验证 | 第18-19页 |
| ·本研究的创新点 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·供试菌株与昆虫 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·提取蝗虫(Locusta migratoria)基因组DNA 所用试剂 | 第21页 |
| ·提取绿僵菌基因组DNA 所用试剂 | 第21页 |
| ·蝗虫血细胞裂解及核酸降解所用试剂 | 第21-22页 |
| ·PCR 和RT-PCR 所用试剂 | 第22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳与凝胶染色所用试剂 | 第22页 |
| ·基因组DNA 的制备与定量 | 第22-24页 |
| ·东亚飞蝗基因组DNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·绿僵菌基因组DNA 的提取 | 第23页 |
| ·基因组DNA 的定量 | 第23-24页 |
| ·引物设计及PCR 灵敏度分析 | 第24-25页 |
| ·东亚飞蝗引物设计 | 第24-25页 |
| ·绿僵菌引物设计 | 第25页 |
| ·PCR 灵敏度分析 | 第25页 |
| ·渗透压对血细胞破裂率的影响分析 | 第25-26页 |
| ·蝗虫血细胞的裂解及DNA 和RNA 降解技术路线 | 第26页 |
| ·正交试验 | 第26-27页 |
| ·确定影响蝗虫血细胞裂解及DNA 和RNA 降解的因素及其水平 | 第26-27页 |
| ·确定正交表 | 第27页 |
| ·用极差法对正交结果进行直观分析 | 第27页 |
| ·作出各因素水平趋势图 | 第27页 |
| ·对正交结果进行方差分析 | 第27页 |
| ·绿僵菌侵染飞蝗及绿僵菌菌体的分离和验证 | 第27-29页 |
| ·东亚飞蝗饲养 | 第27页 |
| ·供试菌株培养及分生孢子悬浮液制备 | 第27-28页 |
| ·东亚飞蝗局部接种绿僵菌 | 第28页 |
| ·东亚飞蝗血淋巴收集及处理 | 第28页 |
| ·感病蝗虫绿僵菌菌体的分离过程 | 第28页 |
| ·提取分离到的绿僵菌菌体的DNA 并进行纯度分析 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-42页 |
| ·PCR 灵敏度分析结果 | 第29-30页 |
| ·蝗虫特异性引物PCR 灵敏度分析结果 | 第29页 |
| ·绿僵菌特异性引物PCR 灵敏度分析结果 | 第29-30页 |
| ·水洗涤对蝗虫血细胞破裂的影响 | 第30-32页 |
| ·蝗虫血细胞经水洗涤后的形态变化 | 第30-31页 |
| ·不同体积洗涤水对蝗虫血细胞影响效果 | 第31-32页 |
| ·正交实验分析结果 | 第32-38页 |
| ·直观法分析正交实验结果 | 第32-33页 |
| ·各因素水平趋势图 | 第33-37页 |
| ·方差分析正交试验结果 | 第37-38页 |
| ·感病蝗虫绿僵菌菌体的分离及验证结果 | 第38-42页 |
| ·感病蝗虫绿僵菌菌体分离过程 | 第38-40页 |
| ·从感病蝗虫血淋巴中分离纯化到的绿僵菌菌体提取基因组DNA 后进行纯度分析 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| ·超纯水洗涤对蝗虫血细胞破裂的影响 | 第42页 |
| ·引物的灵敏度对从感病蝗虫体内获得绿僵菌菌体纯度分析的影响 | 第42页 |
| ·处理细胞的温度对最终结果的影响 | 第42-43页 |
| 5 结论与后续工作 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 独创性声明 | 第51页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第51页 |
