| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 引言 | 第13-25页 |
| 1 动物生长激素轴的概况 | 第13页 |
| 2 生长激素轴的成员及其促鱼类生长的作用机理 | 第13-19页 |
| ·GH、GHR 和GHBPs 及其作用机理 | 第13-16页 |
| ·类胰岛素样生长因子系统及其作用机理 | 第16-19页 |
| 3 胰岛素的概况及其对鱼类代谢的作用 | 第19-20页 |
| 4 环境因素对生长激素轴及胰岛素的影响 | 第20-23页 |
| ·环境因素对生长激素轴的影响 | 第20-23页 |
| ·营养状况对生长激素轴的影响 | 第20-22页 |
| ·生活环境对生长激素轴的影响 | 第22-23页 |
| ·营养状况对胰岛素的影响 | 第23页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第一章 大口黑鲈胰岛素基因全序列的克隆及其编码蛋白的结构分析 | 第25-38页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| ·动物材料 | 第25页 |
| ·菌种和载体 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-31页 |
| ·大口黑鲈肝脏总RNA 的提取 | 第26页 |
| ·胰岛素部分cDNA 的扩增、克隆和序列测定 | 第26-29页 |
| ·反转录 | 第26-27页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测及割胶回收 | 第27-28页 |
| ·PCR 回收产物与pMD19-T 载体连接 | 第28页 |
| ·目的DNA 转化入感受态细胞 | 第28页 |
| ·重组克隆筛选和菌液扩大培养 | 第28-29页 |
| ·重组DNA 核苷酸序列测定分析 | 第29页 |
| ·cDNA 末端快速扩增（RACE）PCR | 第29-31页 |
| ·胰岛素cDNA 全序列分析 | 第31页 |
| 3 实验结果与分析 | 第31-36页 |
| ·肝脏RNA 和前胰岛素原基因RT-PCR 产物电泳结果 | 第31-32页 |
| ·前胰岛素原基因cDNA 序列及其特征分析 | 第32页 |
| ·前胰岛素原氨基酸的序列分析及其与其他鱼类前胰岛素原氨基酸序列的比对 | 第32-34页 |
| ·前胰岛素原蛋白的结构预测分析 | 第34-35页 |
| ·前胰岛素原氨基酸序列同源性及分子进化分析 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 饲料中精氨酸水平对大口黑鲈GH、IGF-Ι和胰岛素MRNA 表达的影响 | 第38-51页 |
| 1 实验材料 | 第38页 |
| ·动物材料 | 第38页 |
| ·实验饲料 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-43页 |
| ·养殖试验 | 第38-39页 |
| ·取样 | 第39页 |
| ·大口黑鲈脑垂体和肝脏总RNA 提取 | 第39页 |
| ·反转录 | 第39页 |
| ·实时荧光定量PCR 引物的设计 | 第39-40页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第40-42页 |
| ·内参基因的筛选 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及割胶回收，标准曲线制备 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及割胶回收 | 第42页 |
| ·制备标准曲线 | 第42页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第42页 |
| ·数据处理 | 第42-43页 |
| 3 实验结果 | 第43-49页 |
| ·目的基因和内参基因实时荧光定量PCR 产物电泳结果 | 第43-45页 |
| ·实时荧光定量PCR 的标准曲线和融解曲线分析 | 第45页 |
| ·饲料中精氨酸水平对大口黑鲈GH、IGF-Ι和胰岛素mRNA 表达的影响 | 第45-49页 |
| ·精氨酸对大口黑鲈生长的影响 | 第45-46页 |
| ·精氨酸对大口黑鲈脑垂体GH mRNA 表达的影响 | 第46-47页 |
| ·精氨酸对大口黑鲈肝脏IGF-ΙmRNA 表达的影响 | 第47页 |
| ·精氨酸对大口黑鲈肝脏胰岛素mRNA 表达的影响 | 第47-48页 |
| ·饲料精氨酸水平，基因表达以及生长之间的关系 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·饲料中精氨酸水平对大口黑鲈脑垂体GH mRNA 表达的影响 | 第49页 |
| ·饲料中精氨酸水平对大口黑鲈肝脏IGF-ΙmRNA 表达的影响 | 第49页 |
| ·饲料中精氨酸水平对大口黑鲈肝脏胰岛素m RNA 表达的影响 | 第49-50页 |
| ·大口黑鲈肝脏IGF-ΙmRNA水平与其生长的关系 | 第50-51页 |
| 第三章 饲料中糖脂比对大口黑鲈GH、IGF-Ι和胰岛素MRNA 表达的影响 | 第51-58页 |
| 1 实验材料 | 第51页 |
| ·动物材料 | 第51页 |
| ·实验饲料 | 第51页 |
| ·实验试剂 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| 2 实验方法 | 第51-52页 |
| ·养殖试验 | 第51页 |
| ·取样 | 第51页 |
| ·大口黑鲈脑垂体和肝脏总RNA 提取 | 第51-52页 |
| ·反转录 | 第52页 |
| ·实时荧光定量PCR 引物的设计 | 第52页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第52页 |
| ·内参基因的筛选 | 第52页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及割胶回收，标准曲线制备 | 第52页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及割胶回收 | 第52页 |
| ·制备标准曲线 | 第52页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第52页 |
| ·数据处理 | 第52页 |
| 3 实验结果 | 第52-56页 |
| ·糖脂比对大口黑鲈生长的影响 | 第52-53页 |
| ·糖脂比对大口黑鲈脑垂体GH mRNA 表达的影响 | 第53页 |
| ·糖脂比对大口黑鲈肝脏IGF-ΙmRNA 表达的影响 | 第53-54页 |
| ·糖脂比对大口黑鲈肝脏胰岛素mRNA 表达的影响 | 第54-55页 |
| ·饲料糖脂比，基因表达与生长之间的关系 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| ·饲料中糖脂比对大口黑鲈脑垂体GH mRNA 表达的影响 | 第56-57页 |
| ·饲料中糖脂比对大口黑鲈肝脏IGF-ΙmRNA 表达的影响 | 第57页 |
| ·饲料中糖脂比对大口黑鲈肝脏胰岛素mRNA 表达的影响 | 第57页 |
| ·大口黑鲈肝脏IGF-Ι和脑垂体GH mRNA水平与其生长的关系 | 第57-58页 |
| 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
