| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 十足目甲壳动物卵黄蛋白原(Vg)和卵黄磷蛋白(Vn)合成及其调控机制的研究进展 | 第14-33页 |
| 前言 | 第14页 |
| 1. 甲壳动物Vg 的结构, 理化性质和合成位点 | 第14-18页 |
| ·甲壳动物 Vg 的结构, 理化性质 | 第14-16页 |
| ·甲壳动物Vg/Vn 合成位点 | 第16-18页 |
| 2. Vg 含量的测定方法 | 第18-19页 |
| 3. Vg 的合成内分泌和分子调控机制, 合成基因的序列比较等 | 第19-21页 |
| ·Vg 的合成内分泌机制 | 第19-20页 |
| ·Vg 合成的分子机制 | 第20-21页 |
| 4.常见甲壳动物的不同卵巢发育阶段 Vg 含量及其 mRNA 丰度的变化 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-33页 |
| 第二章 三疣梭子蟹卵黄磷蛋白纯化及其ELISA 方法 | 第33-51页 |
| 1. 材料与方法 | 第34-37页 |
| ·实验用蟹和解剖 | 第34页 |
| ·试剂配置 | 第34页 |
| ·卵黄磷蛋白分离和纯化 | 第34-35页 |
| ·卵黄磷蛋亚基数量和分子量确定 | 第35页 |
| ·抗体制备和免疫印迹 | 第35-36页 |
| ·样品直接包被法和抗体夹心法ELISA 比较 | 第36页 |
| ·ELISA 反应条件优化 | 第36-37页 |
| ·标准曲线制备 | 第37页 |
| ·验证性实验 | 第37页 |
| ·数据分析 | 第37页 |
| 2. 结果与分析 | 第37-45页 |
| ·Vn 纯化和亚基数量 | 第37-39页 |
| ·样品直接包被法和抗体夹心法ELISA 效果 | 第39-40页 |
| ·ELISA 反应条件优化 | 第40-43页 |
| ·标准曲线 | 第43-44页 |
| ·验证性试验 | 第44-45页 |
| 3. 讨论 | 第45-48页 |
| ·不同蟹类Vn 特性比较 | 第45页 |
| ·样品(抗原)直接包被法和抗体夹心法 | 第45-46页 |
| ·影响ELISA 测定的因素及标准曲线制作 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 第三章 三疣梭子蟹卵巢发育期间组织中卵黄磷蛋白含量的变化 | 第51-61页 |
| 1. 材料与方法 | 第52-53页 |
| ·实验用蟹和解剖 | 第52-53页 |
| ·卵黄磷蛋白和总蛋白含量测定 | 第53页 |
| ·数据分析 | 第53页 |
| 2. 结果与分析 | 第53-55页 |
| ·卵巢指数和肝胰腺指数 | 第53-54页 |
| ·组织中可溶性蛋白含量的变化 | 第54页 |
| ·组织中Vn 和Vg 含量的变化 | 第54-55页 |
| 3. 讨论 | 第55-58页 |
| ·蟹类卵黄合成位点 | 第55页 |
| ·卵巢发育期间组织中Vg/Vn 含量的变化原因和规律 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 第四章 三疣梭子蟹不同发育时期卵黄蛋白原mRNA 表达分析 | 第61-73页 |
| 1. 材料 | 第61-62页 |
| ·实验用蟹和解剖 | 第61页 |
| ·试剂 | 第61-62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| 2. 方法 | 第62-65页 |
| ·抽提 | 第62-63页 |
| ·RNA 电泳 | 第63页 |
| ·引物设计 | 第63页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第63页 |
| ·聚合酶链反应(PCR) | 第63-64页 |
| ·电泳检测PCR 产物条带大小 | 第64页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第64-65页 |
| ·实时荧光定量PCR 数据处理 | 第65页 |
| 3. 实验结果 | 第65-68页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第65页 |
| ·聚合酶链反应(PCR)结果 | 第65-66页 |
| ·标准曲线 | 第66-68页 |
| ·卵巢和肝胰腺中VgmRNA 表达的变化 | 第68页 |
| 4. 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 小结 | 第73-75页 |
| 1. 本研究的主要结论 | 第73页 |
| 2. 本研究的创新点 | 第73-74页 |
| 3. 本研究的不足之处 | 第74页 |
| 4 研究展望 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
