摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
缩略语 | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-28页 |
1.1 生物冶金技术 | 第13-16页 |
1.1.1 生物冶金技术简介 | 第13-14页 |
1.1.2 浸矿微生物 | 第14-16页 |
1.2 硫杆菌遗传学研究概论 | 第16-24页 |
1.2.1 硫杆菌质粒的分离 | 第17页 |
1.2.2 硫杆菌基因的克隆与分析 | 第17-21页 |
1.2.3 硫杆菌基因转移系统的研究 | 第21-23页 |
1.2.4 硫杆菌的遗传学改良 | 第23-24页 |
1.2.4.1 抗毒性离子基因工程菌的构建 | 第23页 |
1.2.4.2 代谢途径改造 | 第23-24页 |
1.3 细菌抗砷机制研究进展 | 第24-27页 |
1.3.1 革兰氏阴性菌抗砷基因 | 第24-25页 |
1.3.2 革兰氏阳性菌抗砷基因 | 第25页 |
1.3.3 细菌抗砷基因的抗砷机制 | 第25-27页 |
1.3.3.1 抗砷调节基因arsR、arsD | 第25-26页 |
1.3.3.2 抗砷结构基因arsA、arsB、arsC | 第26-27页 |
1.4 本论文的研究目的 | 第27页 |
1.5 本论文的创新点 | 第27-28页 |
第二章 嗜酸性喜温硫杆菌接合转移系统的建立 | 第28-41页 |
2.1 材料与方法 | 第29-35页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第29页 |
2.1.2 培养基 | 第29-30页 |
2.1.2.1 大肠杆菌 | 第29-30页 |
2.1.2.2 喜温硫杆菌 | 第30页 |
2.1.2.3 大肠杆菌一氧化硫硫杆菌接合培养基及菌体洗涤液 | 第30页 |
2.1.3 DNA操作技术 | 第30-33页 |
2.1.3.1 质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
2.1.3.2 琼脂搪凝胶电泳 | 第31-32页 |
2.1.3.3 限制性核酸内切酶酶切 | 第32页 |
2.1.3.4 质粒 DNA的转化 | 第32-33页 |
2.1.4 抗生素使用浓度 | 第33页 |
2.1.5 大肠杆菌和喜温硫杆菌的接合转移 | 第33-34页 |
2.1.5.1 供体菌及受体菌的准备 | 第33页 |
2.1.5.2 大肠杆菌与喜温硫杆菌的接合 | 第33-34页 |
2.1.5.3 接合转移子的鉴定 | 第34页 |
2.1.5.3.1 提取质粒鉴定 | 第34页 |
2.1.5.3.2 反向接合转移 | 第34页 |
2.1.6 质粒稳定性测定 | 第34页 |
2.1.7 菌种保藏 | 第34-35页 |
2.1.7.1 大肠杆菌的保藏 | 第34-35页 |
2.1.7.2 喜温硫杆菌的保藏 | 第35页 |
2.2 实验结果 | 第35-40页 |
2.2.1 菌体生长条件和生长状态的选定 | 第35-36页 |
2.2.2 接合转移结果 | 第36-39页 |
2.2.3 质粒在喜温硫杆菌中稳定性测定 | 第39-40页 |
2.3 讨论 | 第40-41页 |
第三章 喜温硫杆菌的接合转移及抗砷质粒的表达研究 | 第41-54页 |
3.1 材料和方法 | 第42-47页 |
3.1.1 菌株和质粒 | 第42-43页 |
3.1.2 培养基和培养条件 | 第43-44页 |
3.1.2.1 大肠杆菌 | 第43页 |
3.1.2.2 喜温硫杆菌 | 第43-44页 |
3.1.3 DNA操作技术 | 第44-45页 |
3.1.3.1 质粒 DNA的提取 | 第44页 |
3.1.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
3.1.3.3 限制性核酸内切酶酶切 | 第44页 |
3.1.3.4 质粒DNA的转化 | 第44-45页 |
3.1.4 抗生素使用浓度 | 第45页 |
3.1.5 大肠杆菌和喜温硫杆菌的接合转移 | 第45-46页 |
3.1.5.1 供体菌及受体菌的准备 | 第45页 |
3.1.5.2 大肠杆菌与喜温硫杆菌的接合 | 第45页 |
3.1.5.3 接合转移子的鉴定 | 第45-46页 |
3.1.5.3.1 提取质粒鉴定 | 第45-46页 |
3.1.5.3.2 反向接合转移 | 第46页 |
3.1.6 质粒稳定性测定 | 第46页 |
3.1.7 重组菌抗砷性能检测 | 第46-47页 |
3.1.8 菌种保藏 | 第47页 |
3.1.8.1 大肠杆菌的保藏 | 第47页 |
3.1.8.2 喜温硫杆菌的保藏 | 第47页 |
3.2 实验结果 | 第47-52页 |
3.2.1 质粒 pSDRA1从大肠杆菌到喜温硫杆菌中的转移 | 第47-49页 |
3.2.2 质粒 pSDRA1在喜温硫杆菌中稳定性测定 | 第49页 |
3.2.3 抗砷质粒 pSDRA1在喜温硫杆菌中的表达及抗砷能力测定结果 | 第49-52页 |
3.3 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读学位期间发表论文目录 | 第60-61页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第61页 |