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喜温硫杆菌遗传转移系统的建立及抗砷基因工程菌的构建

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略语第11-13页
第一章 绪论第13-28页
 1.1 生物冶金技术第13-16页
  1.1.1 生物冶金技术简介第13-14页
  1.1.2 浸矿微生物第14-16页
 1.2 硫杆菌遗传学研究概论第16-24页
  1.2.1 硫杆菌质粒的分离第17页
  1.2.2 硫杆菌基因的克隆与分析第17-21页
  1.2.3 硫杆菌基因转移系统的研究第21-23页
  1.2.4 硫杆菌的遗传学改良第23-24页
   1.2.4.1 抗毒性离子基因工程菌的构建第23页
   1.2.4.2 代谢途径改造第23-24页
 1.3 细菌抗砷机制研究进展第24-27页
  1.3.1 革兰氏阴性菌抗砷基因第24-25页
  1.3.2 革兰氏阳性菌抗砷基因第25页
  1.3.3 细菌抗砷基因的抗砷机制第25-27页
   1.3.3.1 抗砷调节基因arsR、arsD第25-26页
   1.3.3.2 抗砷结构基因arsA、arsB、arsC第26-27页
 1.4 本论文的研究目的第27页
 1.5 本论文的创新点第27-28页
第二章 嗜酸性喜温硫杆菌接合转移系统的建立第28-41页
 2.1 材料与方法第29-35页
  2.1.1 菌株与质粒第29页
  2.1.2 培养基第29-30页
   2.1.2.1 大肠杆菌第29-30页
   2.1.2.2 喜温硫杆菌第30页
   2.1.2.3 大肠杆菌一氧化硫硫杆菌接合培养基及菌体洗涤液第30页
  2.1.3 DNA操作技术第30-33页
   2.1.3.1 质粒DNA的提取第30-31页
   2.1.3.2 琼脂搪凝胶电泳第31-32页
   2.1.3.3 限制性核酸内切酶酶切第32页
   2.1.3.4 质粒 DNA的转化第32-33页
  2.1.4 抗生素使用浓度第33页
  2.1.5 大肠杆菌和喜温硫杆菌的接合转移第33-34页
   2.1.5.1 供体菌及受体菌的准备第33页
   2.1.5.2 大肠杆菌与喜温硫杆菌的接合第33-34页
   2.1.5.3 接合转移子的鉴定第34页
    2.1.5.3.1 提取质粒鉴定第34页
    2.1.5.3.2 反向接合转移第34页
  2.1.6 质粒稳定性测定第34页
  2.1.7 菌种保藏第34-35页
   2.1.7.1 大肠杆菌的保藏第34-35页
   2.1.7.2 喜温硫杆菌的保藏第35页
 2.2 实验结果第35-40页
  2.2.1 菌体生长条件和生长状态的选定第35-36页
  2.2.2 接合转移结果第36-39页
  2.2.3 质粒在喜温硫杆菌中稳定性测定第39-40页
 2.3 讨论第40-41页
第三章 喜温硫杆菌的接合转移及抗砷质粒的表达研究第41-54页
 3.1 材料和方法第42-47页
  3.1.1 菌株和质粒第42-43页
  3.1.2 培养基和培养条件第43-44页
   3.1.2.1 大肠杆菌第43页
   3.1.2.2 喜温硫杆菌第43-44页
  3.1.3 DNA操作技术第44-45页
   3.1.3.1 质粒 DNA的提取第44页
   3.1.3.2 琼脂糖凝胶电泳第44页
   3.1.3.3 限制性核酸内切酶酶切第44页
   3.1.3.4 质粒DNA的转化第44-45页
  3.1.4 抗生素使用浓度第45页
  3.1.5 大肠杆菌和喜温硫杆菌的接合转移第45-46页
   3.1.5.1 供体菌及受体菌的准备第45页
   3.1.5.2 大肠杆菌与喜温硫杆菌的接合第45页
   3.1.5.3 接合转移子的鉴定第45-46页
    3.1.5.3.1 提取质粒鉴定第45-46页
    3.1.5.3.2 反向接合转移第46页
  3.1.6 质粒稳定性测定第46页
  3.1.7 重组菌抗砷性能检测第46-47页
  3.1.8 菌种保藏第47页
   3.1.8.1 大肠杆菌的保藏第47页
   3.1.8.2 喜温硫杆菌的保藏第47页
 3.2 实验结果第47-52页
  3.2.1 质粒 pSDRA1从大肠杆菌到喜温硫杆菌中的转移第47-49页
  3.2.2 质粒 pSDRA1在喜温硫杆菌中稳定性测定第49页
  3.2.3 抗砷质粒 pSDRA1在喜温硫杆菌中的表达及抗砷能力测定结果第49-52页
 3.3 讨论第52-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
攻读学位期间发表论文目录第60-61页
学位论文评阅及答辩情况表第61页

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