引言 | 第1-16页 |
第一部分 分离株的分离与鉴定 | 第16-23页 |
材料与方法 | 第16-18页 |
1 材料 | 第16页 |
·病料 | 第16页 |
·病毒 | 第16页 |
·鸡胚及雏鸡 | 第16页 |
·试剂 | 第16页 |
2 方法 | 第16-18页 |
·病料的处理 | 第16页 |
·鸡胚接种与传代 | 第16页 |
·病毒的红细胞凝集活性 | 第16-17页 |
·干扰试验 | 第17页 |
·动物回归试验 | 第17页 |
·电镜观察 | 第17页 |
·乙醚、氯仿敏感性试验 | 第17-18页 |
结果与分析 | 第18-20页 |
1 病毒分离与病毒形态 | 第18页 |
2 分离株的血凝特性 | 第18-19页 |
3 分离株对新城疫病毒增值的干扰 | 第19页 |
4 动物回归试验 | 第19-20页 |
5 乙醚、氯仿敏感性试验 | 第20页 |
讨论 | 第20-22页 |
1 病毒的分离鉴定 | 第20-21页 |
2 IBV的血凝活性 | 第21页 |
3 IBV干扰NDV的增值 | 第21-22页 |
4 IBV的组织嗜性 | 第22页 |
5 IBV的防制 | 第22页 |
小结 | 第22-23页 |
第二部分 分离株主要结构基因克隆与序列分析 | 第23-70页 |
材料与方法 | 第23-29页 |
1 材料 | 第23-25页 |
·毒株 | 第23页 |
·菌株、质粒载体 | 第23页 |
·主要试剂及配制 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-29页 |
·引物的设计 | 第25页 |
·病毒的增值 | 第25页 |
·病毒总RNA的抽提 | 第25页 |
·RT-PCR | 第25-26页 |
·PCR产物的回收... | 第26页 |
·PCR产物的连接 | 第26-27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
·转化 | 第27页 |
·重组质粒的提取 | 第27-28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
·目的基因的序列测定 | 第29页 |
·结构基因序列测定结果的鉴定 | 第29页 |
·分离株结构基因的核苷酸序列及所编码的氨基酸序列 | 第29页 |
·分离株结构基因的核苷酸序列及所编码的氨基酸序列系统进化关分析 | 第29页 |
·分离株结构蛋白的特性分析 | 第29页 |
结果与分析 | 第29-65页 |
1 结果 | 第29-46页 |
·引物设计 | 第29-30页 |
·分离株S1基因的克隆及其序列 | 第30-34页 |
·分离株S2基因的克隆及其序列 | 第34-40页 |
·分离株M基因的克隆及其序列 | 第40-42页 |
·分离株N基因的克隆及其序列 | 第42-46页 |
·分离株各个结构基因序列测定结果的鉴定 | 第46页 |
2 分析 | 第46-65页 |
·关于分离株S1基因及S1蛋白的分析 | 第46-53页 |
·关于分离株S2基因及S2蛋白的分析 | 第53-57页 |
·关于分离株 M基因及M蛋白的分析 | 第57-61页 |
·关于分离株N基因及N蛋白的分析 | 第61-65页 |
讨论 | 第65-70页 |
1 有关S1基因及S1蛋白的讨论 | 第65-66页 |
·引物的设计 | 第65页 |
·重组质粒的筛选 | 第65页 |
·S1基因的酶切位点 | 第65页 |
·分离株的血清型 | 第65-66页 |
·S1与S2亚单位裂解位点 | 第66页 |
·有关半胱氨酸 | 第66页 |
2 有关S2基因及S2蛋白的讨论 | 第66-67页 |
·分离株S2基因的保守性 | 第66页 |
·分离株S2蛋白与囊膜结合的区域 | 第66-67页 |
·分离株S2亚单位对S1亚单位的影响 | 第67页 |
·分离株S2蛋白内的特殊位点 | 第67页 |
3 有关M基因及M蛋白的讨论 | 第67-68页 |
·分离株M蛋白的糖基化位点 | 第67页 |
·分离株M蛋白的变异形式 | 第67-68页 |
·分离株M基因与S1基因的进化关系 | 第68页 |
4 有关N基因及N蛋白的讨论 | 第68-70页 |
·N蛋白的免疫原性 | 第68页 |
·半胱氨酸与N蛋白结构与功能的关系 | 第68页 |
·分离株N蛋白的变异特点 | 第68页 |
·N蛋白的碱性氨基酸 | 第68-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简介 | 第78-79页 |
附分离株各结构基因序列与标准毒株序列比较图 | 第79-92页 |