声波对菊花基因差异表达影响的初步研究
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-16页 |
| ·植物整体抗逆性研究的兴起 | 第10-11页 |
| ·植物抗逆性分子机理的研究进展 | 第11-13页 |
| ·逆境下植物基因表达的变化 | 第11页 |
| ·逆境下基因水平的信号传导 | 第11-13页 |
| ·本文的研究目的和意义 | 第13-14页 |
| ·本文的主要工作和技术路线 | 第14页 |
| ·实验材料的准备 | 第14页 |
| ·分离受声波诱导的差异表达片段 | 第14页 |
| ·证实差异表达片段 | 第14页 |
| ·本文的创新点 | 第14-16页 |
| 2 差异显示PCR | 第16-23页 |
| ·差异显示技术的原理 | 第16-17页 |
| ·差异显示技术的方法和策略 | 第17页 |
| ·mRNA差异显示的不足之 | 第17-19页 |
| ·较高频率的假阳性 | 第18页 |
| ·差别条带的短小且大多显示’-UTR信息 | 第18-19页 |
| ·DD-PCR对高拷贝mRNA有很强的倾向性 | 第19页 |
| ·差别条带的重现性与低丰度mRNA的鉴定 | 第19页 |
| ·mRNA差异显示技术的改进及发展 | 第19-20页 |
| ·局部改进和实验参数的优化 | 第19-20页 |
| ·差异显示技术在植物研究中的应用 | 第20-22页 |
| ·基因表达差异 | 第20-21页 |
| ·基因的鉴定与克隆 | 第21页 |
| ·植物抗逆性机理的研究 | 第21页 |
| ·探索激素调控机理 | 第21-22页 |
| ·对差异表达片段的后续研究 | 第22-23页 |
| 3 实验材料 | 第23-26页 |
| ·实验材料的培育 | 第23-24页 |
| ·菊花苗的组织培养 | 第23-24页 |
| ·声波加载菊花苗 | 第24-26页 |
| ·声波加载装置 | 第24页 |
| ·实验材料的处理 | 第24-26页 |
| 4 菊花总RNA提取 | 第26-33页 |
| ·菊花总RNA提取 | 第26-28页 |
| ·原理及流程 | 第26-27页 |
| ·提取方案 | 第27-28页 |
| ·分光光度法测定RNA质量和纯度 | 第28页 |
| ·RNA完整性鉴定 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-32页 |
| ·声波刺激组和对照组菊花总RNA质量 | 第29-30页 |
| ·声波刺激组和对照组菊花总RNA纯度 | 第30-31页 |
| ·声波刺激组和对照组菊花总RNA完整性 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 5 声波刺激菊花差异表达基因的筛选 | 第33-49页 |
| ·试验步骤 | 第33-39页 |
| ·模板 | 第33页 |
| ·引物 | 第33页 |
| ·反转录RNA | 第33-34页 |
| ·PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-37页 |
| ·银染 | 第37页 |
| ·分离差异表达基因片段 | 第37-38页 |
| ·回收差异条带 | 第38页 |
| ·重扩增 | 第38页 |
| ·重扩增产物电泳 | 第38页 |
| ·重扩增产物的回收和纯化 | 第38-39页 |
| ·Northern点杂交 | 第39-40页 |
| ·杂交膜的制备 | 第39页 |
| ·探针标记 | 第39页 |
| ·预杂交和杂交 | 第39-40页 |
| ·严紧洗膜 | 第40页 |
| ·胶片曝光 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·引物的筛选 | 第40-42页 |
| ·分离差异条带 | 第42-44页 |
| ·回收差异条带及重扩增 | 第44-45页 |
| ·Northern点杂交 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-49页 |
| 6 结论及后续工作建议 | 第49-51页 |
| ·主要结论 | 第49页 |
| ·后续工作建议 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录: | 第57-58页 |
| A 攻读硕士学位期间曾参与的研究项目 | 第57页 |
| B 攻读硕士学位期间发表论文 | 第57-58页 |
