致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-18页 |
前言 | 第18-21页 |
第一部分 文献综述 | 第21-39页 |
第一章 畸形细胞在寄生蜂生长和发育中的作用 | 第21-32页 |
1 畸形细胞的特性 | 第21-23页 |
1.1 畸形细胞的起源及存在范围 | 第21-22页 |
1.2 畸形细胞的发育方式 | 第22页 |
1.3 畸形细胞超微形态结构 | 第22-23页 |
2 畸形细胞的生理作用 | 第23-26页 |
2.1 对幼蜂的营养作用 | 第23-26页 |
2.1.1 合成、分泌蛋白质 | 第24-25页 |
2.1.2 分泌酶类 | 第25-26页 |
2.2 抑制寄主免疫、保证幼蜂发育 | 第26页 |
3 对寄主生长和发育的影响 | 第26-27页 |
3.1 对寄主保幼激素酯酶、保幼激素的调节作用 | 第27页 |
3.2 对寄主蜕皮甾类的调节作用 | 第27页 |
4 与寄生蜂其它寄生因子的协同作用 | 第27-28页 |
5 畸形细胞体外培养 | 第28-29页 |
6 其它功能 | 第29页 |
7 畸形细胞的分子生物学研究 | 第29-30页 |
8 结语 | 第30-32页 |
第二章 多分DNA病毒基因组及基因表达 | 第32-39页 |
1 PDV生活史 | 第32-33页 |
2 PDV基因组 | 第33-35页 |
3 PDV基因表达 | 第35-37页 |
3.1 免疫抑制 | 第35-36页 |
3.2 发育调控 | 第36-37页 |
4 结语 | 第37-39页 |
第二部分 研究内容 | 第39-128页 |
第一章 基本材料与方法 | 第39-44页 |
1 养虫设备 | 第39页 |
1.1 人工气候室 | 第39页 |
1.2 光照培养箱 | 第39页 |
1.3 大养虫笼 | 第39页 |
1.4 小养虫笼 | 第39页 |
1.5 产卵笼 | 第39页 |
1.6 保蜂盒 | 第39页 |
2 实验仪器 | 第39-40页 |
3 供试材料与方法 | 第40-42页 |
3.1 供试蔬菜 | 第40页 |
3.2 供试昆虫 | 第40-41页 |
3.2.1 小菜蛾 | 第40页 |
3.2.2 菜蛾盘绒茧蜂 | 第40页 |
3.2.3 半闭弯尾姬蜂 | 第40页 |
3.2.4 菜蛾啮小蜂 | 第40页 |
3.2.5 单头寄生 | 第40-41页 |
3.2.6 假寄生 | 第41页 |
3.3 电泳方法 | 第41页 |
3.3.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41页 |
3.3.2 Western blot印迹分析 | 第41页 |
3.3.3 IEF、SDS-PAGE蛋白质双向电泳 | 第41页 |
3.3.4 金属蛋白酶电泳 | 第41页 |
3.4 血清学方法 | 第41-42页 |
3.4.1 抗原的制备 | 第41页 |
3.4.2 多克隆抗体的制备 | 第41页 |
3.4.3 抗体效价测定与目标蛋白检测 | 第41-42页 |
3.4.3.1 间接ELISA法 | 第41页 |
3.4.3.2 免疫双扩散法 | 第41-42页 |
4 试剂配制 | 第42页 |
5 实验数据统计分析 | 第42页 |
6 凝胶电泳谱带分析 | 第42-44页 |
第二章 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞发育及其超微形态结构 | 第44-52页 |
1 材料与方法 | 第44-45页 |
1.1 供试昆虫 | 第44页 |
1.2 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞和幼蜂在小菜蛾体内发育 | 第44页 |
1.2.1 畸形细胞测量 | 第44页 |
1.2.2 畸形细胞计数 | 第44页 |
1.2.3 菜蛾盘绒茧蜂幼虫在寄主体内的发育 | 第44页 |
1.3 畸形细胞的超微形态结构 | 第44-45页 |
1.3.1 扫描电镜(Scan electron morphology SEM)观察 | 第45页 |
1.3.2 透射电镜(Transmission electron morphology TEM)观察 | 第45页 |
2 结果与分析 | 第45-47页 |
2.1 畸形细胞的发生来源 | 第45页 |
2.2 畸形细胞及幼蜂的发育 | 第45-46页 |
2.3 畸形细胞的超微形态结构 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-52页 |
第三章 过寄生、寄主状态等对菜蛾盘绒茧蜂和畸形细胞发育的影响 | 第52-60页 |
1 材料与方法 | 第52-53页 |
1.1 供试昆虫 | 第52页 |
1.2 被寄生寄主的获得 | 第52页 |
1.3 寄主不同状态下,体内畸形细胞和幼蜂的发育 | 第52页 |
1.4 不同温度下幼蜂和畸形细胞的发育 | 第52-53页 |
1.5 取食不同寄主植物的小菜蛾,体内幼蜂和畸形细胞的发育 | 第53页 |
1.6 饥饿处理 | 第53页 |
1.7 感染病毒后,小菜蛾体内畸形细胞的发育 | 第53页 |
1.8 数据统计与分析 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-58页 |
2.1 取食不同寄主植物的小菜蛾对体内菜蛾盘绒茧蜂幼虫和畸形细胞发育的影响 | 第53-54页 |
2.2 寄主龄期对菜蛾盘绒茧幼虫及畸形细胞发育的影响 | 第54-55页 |
2.3 过寄生后,寄主体内畸形细胞和幼蜂的发育 | 第55页 |
2.4 不同温度下幼蜂和畸形细胞的发育 | 第55-56页 |
2.5 寄主--寄生蜂和畸形细胞发育的相关性 | 第56-57页 |
2.6 病毒感染后,寄主体内畸形细胞的发育 | 第57-58页 |
3 讨论 | 第58-60页 |
第四章 菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒的特性及其对小菜蛾的生理效应 | 第60-68页 |
1 材料与方法 | 第60-61页 |
1.1 供试昆虫 | 第60页 |
1.2 被寄生寄主的获得 | 第60页 |
1.3 Co~(60)辐射处理雌蜂 | 第60-61页 |
1.4 透射电镜观察 | 第61页 |
2 结果与分析 | 第61-62页 |
2.1 小菜蛾两种寄生蜂PDV的形态 | 第61页 |
2.2 PDV在雌蜂卵巢内分布的特点 | 第61-62页 |
2.3 被寄生寄主中的PDV | 第62页 |
2.4 假寄生对寄主幼虫发育的影响 | 第62页 |
3 讨论 | 第62-68页 |
第五章 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞对寄主小菜蛾生长和发育的影响 | 第68-75页 |
1 材料与方法 | 第68-69页 |
1.1 供试昆虫 | 第68页 |
1.2 被寄生寄主的获得 | 第68-69页 |
1.3 畸形细胞的收集 | 第69页 |
1.4 畸形细胞的注射 | 第69页 |
1.5 过寄生对寄主生长和发育的影响 | 第69页 |
1.6 数据统计与分析 | 第69页 |
2 结果与分析 | 第69-72页 |
2.1 假寄生、正常寄生对寄主生长和发育的影响 | 第69-70页 |
2.2 过寄生对寄主生长和发育的影响 | 第70-71页 |
2.2.1 1次假寄生与多次假寄生对寄主生长和发育的影响 | 第70-71页 |
2.2.2 1次正常寄生与多次正常寄生对寄主生长和发育的影响 | 第71页 |
2.3 注射畸形细胞对寄主生长和发育的影响 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72-75页 |
第六章 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞的分泌功能 | 第75-82页 |
1 材料与方法 | 第75-77页 |
1.1 供试昆虫 | 第75页 |
1.2 畸形细胞收集和匀浆液制备 | 第75页 |
1.3 寄主血淋巴的提取和脂肪体、幼蜂的收集 | 第75页 |
1.4 畸形细胞与幼蜂,畸形细胞与脂肪体的共培养 | 第75-76页 |
1.5 电泳 | 第76页 |
1.5.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第76页 |
1.5.2 畸形细胞双向电泳 | 第76页 |
1.6 金属蛋白酶电泳 | 第76页 |
1.7 Western blot印迹 | 第76-77页 |
2 结果与分析 | 第77-79页 |
2.1 畸形细胞合成蛋白和分泌功能 | 第77-78页 |
2.2 畸形细胞与幼蜂、脂肪体的共培养 | 第78-79页 |
2.3 寄主血淋巴金属蛋白酶电泳 | 第79页 |
2.4 Western blot印迹分析 | 第79页 |
3 讨论 | 第79-82页 |
第七章 菜蛾盘绒茧蜂--小菜蛾寄生体系其它寄生因子特性 | 第82-93页 |
1 材料与方法 | 第82-84页 |
1.1 供试昆虫 | 第82页 |
1.2 雌蜂卵巢内卵、寄主体内初产卵和即将孵化卵的获得 | 第82页 |
1.3 寄主体内2龄幼蜂的获得及体外培养 | 第82-83页 |
1.4 雌蜂萼液和毒液的收集,畸形细胞匀浆液的制备 | 第83页 |
1.5 PDV抗体的制备 | 第83页 |
1.6 抗原、抗体检测 | 第83页 |
1.7 电镜观察 | 第83页 |
1.8 体外包囊 | 第83页 |
1.9 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第83-84页 |
2 结果与分析 | 第84-87页 |
2.1 类病毒样纤丝(Vires-like Filament VLF)特性 | 第84页 |
2.2 羊膜 | 第84-85页 |
2.3 卵巢蛋白、幼蜂分泌蛋白和毒液蛋白 | 第85页 |
2.4 不同寄生时期寄主血淋巴蛋白组分 | 第85-86页 |
2.5 体外包囊 | 第86页 |
2.6 PDV抗体与毒液、畸形细胞匀浆液的免疫反应 | 第86-87页 |
3 讨论 | 第87-93页 |
第八章 菜蛾盘绒茧蜂主要寄生因子对小菜蛾的免疫抑制 | 第93-103页 |
1 材料与方法 | 第93-95页 |
1.1 供试昆虫 | 第93页 |
1.2 血细胞总数的测定及浆血胞和假寄生后寄主中蜂卵的观察 | 第93页 |
1.3 血淋巴的体外黑化反应 | 第93-94页 |
1.4 血浆的制备 | 第94页 |
1.5 畸形细胞、萼液和毒液的提取和制备 | 第94页 |
1.6 酚氧化酶(PO)活性测定 | 第94页 |
1.7 蜂卵、畸形细胞及Sephadex G-100 beads体外包囊观察 | 第94-95页 |
1.8 数据统计与分析 | 第95页 |
2 结果与分析 | 第95-97页 |
2.1 不同寄生状态对寄主血细胞数目及浆血胞延展能力的影响 | 第95页 |
2.2 血淋巴黑化观察 | 第95-96页 |
2.3 寄生对寄主血淋巴PO活性的影响 | 第96-97页 |
2.4 假寄生后寄主体内蜂卵的包囊及黑化 | 第97页 |
2.5 Sephadex G-100 Beads的体外包囊 | 第97页 |
2.6 畸形细胞的黑化与包囊 | 第97页 |
2.7 畸形细胞在非适合性寄主血淋巴中的发育 | 第97页 |
3 讨论 | 第97-103页 |
第九章 菜蛾盘绒茧蜂三种主要寄生因子对小菜蛾的发育调控 | 第103-116页 |
1 材料与方法 | 第103-106页 |
1.1 供试昆虫 | 第103页 |
1.2 被寄生寄主的获得 | 第103页 |
1.3 寄主血淋巴的收集 | 第103-104页 |
1.4 血淋巴蛋白测定 | 第104页 |
1.5 精巢的发育 | 第104页 |
1.6 脂肪体收集及电镜样品的制备 | 第104页 |
1.7 中肠的观察 | 第104页 |
1.8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第104页 |
1.9 蛋白质样品制备及双向电泳 | 第104-106页 |
1.9.1 蛋白样品制备 | 第104-105页 |
1.9.2 蛋白质双向电泳 | 第105页 |
1.9.3 等电点及分子量测定 | 第105-106页 |
2 结果与分析 | 第106-112页 |
2.1 血淋巴蛋白含量 | 第106页 |
2.2 血淋巴蛋白组成 | 第106-108页 |
2.3 精巢的发育 | 第108页 |
2.4 脂肪体形态结构 | 第108-111页 |
2.5 脂肪体蛋白组成 | 第111-112页 |
2.6 寄主小菜蛾中肠的形态 | 第112页 |
3 讨论 | 第112-116页 |
第十章 三种内寄生蜂寄生因子对寄主小菜蛾的调控 | 第116-128页 |
1 材料与方法 | 第116-117页 |
1.1 供试昆虫 | 第116页 |
1.2 三种寄生蜂寄生对寄主生长、发育,精巢及脂肪体等的影响 | 第116页 |
1.3 三种寄生蜂寄生对寄主血淋巴蛋白组分的影响 | 第116-117页 |
1.4 共同寄生对三种寄生蜂生长发育的影响 | 第117页 |
1.5 经Co~(60)辐射处理的菜蛾啮小蜂雌蜂寄生3龄小菜蛾 | 第117页 |
1.6 经Co~(60)辐射处理的菜蛾盘绒茧蜂雌蜂寄生小菜蛾3d后,供菜蛾啮小蜂再寄生 | 第117页 |
1.7 数据统计与分析 | 第117页 |
2 结果与分析 | 第117-123页 |
2.1 三种寄生蜂寄生对寄主小菜蛾生长和发育、精巢及脂肪体等的影响 | 第117-119页 |
2.2 三种寄生蜂寄生对寄主血淋巴蛋白组分的影响 | 第119页 |
2.3 共同寄生对三种寄生蜂生长和发育的影响 | 第119-122页 |
2.4 经Co~(60)辐射处理过的菜蛾盘绒茧蜂雌蜂寄生小菜蛾后,菜蛾啮小蜂再寄生,对菜蛾啮小蜂发育的影响 | 第122-123页 |
3 讨论 | 第123-128页 |
第三部分 总讨论 | 第128-134页 |
参考文献 | 第134-153页 |
英文摘要 | 第153-159页 |
附录一: 博士期间已发表和待发表的论文 | 第159页 |