| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 材料和方法 | 第17-35页 |
| 一、技术路线 | 第17-18页 |
| 二、实验材料 | 第18-25页 |
| 1．提取CaM及CaMKⅡ | 第18页 |
| 2．细胞、细胞培养及试剂 | 第18-19页 |
| 3．受体激动剂、拮抗剂、工具药 | 第19页 |
| 4．CAMP,CaM活性,CaMKⅡ活性测定 | 第19-20页 |
| 5．Western blot | 第20-21页 |
| 6．NOS测定 | 第21页 |
| 7．质粒和菌株 | 第21-22页 |
| 8．分子生物学试剂 | 第22-23页 |
| 9．RT-PCR | 第23页 |
| 10．主要仪器 | 第23-25页 |
| 三、实验方法 | 第25-35页 |
| 1．氟奋乃静-sepharose的制备 | 第25页 |
| 2．CaM的制备 | 第25页 |
| 3．制备CaM-Sepharose 4B交联物 | 第25-26页 |
| 4．DEAE-cellulose的制备 | 第26页 |
| 5．CaMKⅡ的提取 | 第26页 |
| 6．提取CaMKⅡ激酶活性测定 | 第26-27页 |
| 7．药理实验分组 | 第27页 |
| 8．细胞培养 | 第27页 |
| 9．CaM活性测定 | 第27-28页 |
| 10．CaMKⅡ活性测定 | 第28页 |
| 11．CaMKⅡ含量测定 | 第28-29页 |
| 12．环磷酸腺苷激酶提取和纯化 | 第29-30页 |
| 13．cAMP水平测定 | 第30页 |
| 14．NOS活性测定 | 第30-31页 |
| 15．大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31页 |
| 16．质粒DNA小量制备 | 第31-32页 |
| 17．细胞总RNA的提取 | 第32页 |
| 18．甲醛变性电泳法 | 第32页 |
| 19．RT-PCR反应 | 第32-33页 |
| 20．蛋白质浓度测定 | 第33-34页 |
| 21．统计方法 | 第34-35页 |
| 第一部分：钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的制备与活性测定 | 第35-42页 |
| 实验结果 | 第35-39页 |
| 一、CaM的提取与纯化 | 第35-36页 |
| 二、CaMKⅡ的提取与纯化 | 第36-37页 |
| 三、CaMKⅡ的SDS-PAGE结果 | 第37-38页 |
| 四、CaMKⅡ提取物的活性测定 | 第38-39页 |
| 讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 第二部分：阿片类药物对NG108-15细胞Ca~(2+)／钙调蛋白依赖的蛋白激酶信息通路的作用 | 第42-56页 |
| 实验结果 | 第42-51页 |
| 1．DPDPE长时程作用于NG108-15细胞,对cAMP水平的作用 | 第42-43页 |
| 2．DPDPE长时程作用于NG108-15细胞,对CaM活性的作用 | 第43-44页 |
| 3．DPDPE长时程作用于NG108-15细胞,加入10~(-5)mol·L~(-1)纳洛酮,对CaM活性的作用 | 第44-46页 |
| 4．DPDPE长时程作用于NG108-15细胞,对CaMK Ⅱ活性的作用 | 第46-47页 |
| 5．DPDPE长时程作用于NG108-15细胞,加入10~(-5)mol·L~(-1)纳洛酮,对CaMKⅡ活性的作用 | 第47-49页 |
| 6．DPDPE长时程作用于NG108-15细胞,对CaMKⅡ含量的作用 | 第49-51页 |
| 讨论 | 第51-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 第三部分 Ca~(2+)／CaMK信息通路与其他信息通路之间的关系 | 第56-64页 |
| 实验结果 | 第56-60页 |
| 1．DPDPE、DPDPE+W-7、DPDPE+KN-62作用于不同细胞株cAMP活性的变化 | 第56-57页 |
| 2．DPDPE长时程作用于不同细胞系CaM活性的改变 | 第57-58页 |
| 3．DPDPE长时程作用于不同细胞系CaMKⅡ活性的改变 | 第58-59页 |
| 4．DPDPE、DPDPE+W-7、DPDPE+KN-62作用于不同细胞株NOS活性的变化 | 第59-60页 |
| 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 第四部分：阿片耐受依赖过程中Ca~(2+)／Calmodulin dependent protein kinase通路对阿片受体水平的调节 | 第64-70页 |
| 实验结果 | 第64-68页 |
| 1．细胞总RNA的提取与鉴定 | 第64页 |
| 2．RT-PCR检测NG108-15细胞内mDOR mRNA的表达 | 第64-68页 |
| 讨论 | 第68页 |
| 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 综述一 | 第79-116页 |
| 综述二 | 第116-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
