| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-26页 |
| 1．1 果实生理性软化相关基因研究进展 | 第9-16页 |
| 1．1．1 乙烯产生相关基因 | 第9-11页 |
| 1．1．2 细胞壁降解相关基因 | 第11-15页 |
| 1．1．3 软化相关细胞内物质代谢基因 | 第15-16页 |
| 1．2 果实病理性软化相关基因研究进展 | 第16-18页 |
| 1．2．1 PG基因 | 第17页 |
| 1．2．2 PL基因 | 第17-18页 |
| 1．2．3 其他相关基因 | 第18页 |
| 1．3 PGIP基因研究进展 | 第18-20页 |
| 1．4 果实软化相关基因启动子 | 第20-26页 |
| 1．4．1 植物启动子一般特征 | 第20-22页 |
| 1．4．2 已克隆启动子及其表达特性 | 第22页 |
| 1．4．3 启动子分离方法 | 第22-23页 |
| 1．4．4 果实成熟和软化相关启动子 | 第23-26页 |
| 前言 | 第26页 |
| 2 材料方法 | 第26-34页 |
| 2．1 材料 | 第26页 |
| 2．2 方法 | 第26-34页 |
| 2．2．1 基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 2．2．2 总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2．2．3 mRNA纯化 | 第28页 |
| 2．2．4 PGIP基因扩增引物设计 | 第28页 |
| 2．2．5 iPCR、嵌套PCR模板制备 | 第28-29页 |
| 2．2．6 PCR反应体系及程序 | 第29-32页 |
| 2．2．7 目的片段回收 | 第32页 |
| 2．2．8 感受态细胞制备 | 第32页 |
| 2．2．9 目的片段连接及重组质粒筛选 | 第32-33页 |
| 2．2．10 叶盘转化体系 | 第33页 |
| 2．2．11 转化方法 | 第33页 |
| 2．2．12 GUS染色 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-62页 |
| 3．1 DNA、RNA提取 | 第34-35页 |
| 3．1．1 基因组DNA提取及纯化 | 第34页 |
| 3．1．2 总RNA提取方法比较 | 第34-35页 |
| 3．2 PGIP DNA及cDNA克隆测序 | 第35-47页 |
| 3．2．1 PGIP cDNA克隆测序 | 第35-42页 |
| 3．2．2 PGIP DNA克隆测序 | 第42-44页 |
| 3．2．3 PGIP DNA、cDNA序列比较分析 | 第44-47页 |
| 3．3 PGIP启动子克隆和测序 | 第47-54页 |
| 3．3．1 启动子克隆的接头式嵌套PCR设计 | 第47-48页 |
| 3．3．2 PGIP基因启动子克隆引物设计 | 第48-49页 |
| 3．3．3 启动子克隆方法研究 | 第49-51页 |
| 3．3．4 重组质粒鉴定 | 第51-53页 |
| 3．3．5 目的片断序列测定及分析 | 第53-54页 |
| 3．4 PGIP启动子介导的报告基因转化 | 第54-62页 |
| 3．4．1 表达载体构建 | 第54-56页 |
| 3．4．2 对烟草和樱桃叶盘的转化 | 第56-59页 |
| 3．4．3 启动子启动下的报告基因表达 | 第59-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 4．1 PGIP基因 | 第62页 |
| 4．2 PGIP启动子 | 第62-63页 |
| 4．3 启动子克隆方法 | 第63-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 6 英文摘要 | 第65-67页 |
| 7 参考文献 | 第67-77页 |