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杏鲍菇与秀珍菇融合育种技术研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第12-22页
 第一节 食用菌研究的重要意义第12-13页
   ·食用菌的概念第12页
   ·食用菌的营养价值第12页
   ·食用菌的药用价值第12页
   ·食用菌的经济价值和社会效益第12-13页
 第二节 食用菌传统育种方法及研究进展第13-15页
   ·选择育种第13页
   ·杂交育种第13-14页
   ·诱变育种第14-15页
 第三节 食用菌现代新技术育种及进展第15-21页
   ·原生质体技术育种第15-21页
     ·原生质体的概念第15页
     ·原生质体的制备与再生第15-16页
     ·原生质体单核化技术第16页
     ·原生质体再生无性系第16-17页
     ·原生质体转化技术第17页
     ·原生质体诱变技术第17页
     ·原生质体融合技术第17-21页
   ·基因工程育种第21页
 第四节 研究目的和意义第21-22页
第二章 亲本选择及原生质体的制备、再生第22-47页
 第一节 亲本的选择第22-29页
  1 材料与方法第22-23页
   ·供试菌株第22页
   ·培养基及试剂第22-23页
   ·试验方法第23页
     ·菌丝生长速度的测定第23页
     ·原生质制备及产量的比较第23页
  2 结果与分析第23-27页
   ·杏鲍菇及其单孢菌株菌丝生长速度第23-24页
   ·秀珍菇及其单孢菌株菌丝生长速度第24-25页
   ·杏鲍菇及其单孢菌株菌原生质的制备第25-26页
   ·秀珍菇及其单孢菌株菌原生质的制备第26-27页
  3 结论与讨论第27-29页
 第二节 原生质体制备条件的优化第29-38页
  1 材料与方法第29-31页
   ·供试菌株第29页
   ·试验试剂第29页
   ·仪器与设备第29页
   ·试验方法第29-31页
     ·培养基制备第29页
     ·稳渗液制备第29-30页
     ·酶液制备第30页
     ·菌丝培养及收集第30页
     ·原生质体制备及计数第30页
     ·原生质体释放过程与方式的观察第30页
     ·原生质体制备的酶解时间优化试验第30页
     ·原生质制备的酶液浓度优化试验第30-31页
     ·原生质制备的其它条件优化试验第31页
     ·原生质体的纯化第31页
     ·原生质体活性检测第31页
  2 结果与分析第31-37页
   ·原生质体释放过程与方式第31-32页
   ·原生质体制备的酶解时间优化第32-33页
   ·原生质体制备的酶液浓度优化第33页
   ·原生质体制备最佳条件的确定第33-36页
   ·原生质体纯化效果第36页
   ·原生质活性检测结果第36-37页
  3 结论与讨论第37-38页
 第三节 原生质体再生及其条件优化第38-47页
  1 材料与方法第38-39页
   ·供试菌株第38页
   ·培养基第38页
   ·试验方法第38-39页
     ·亲本原生质体的制备第38页
     ·原生质体纯化及计数第38页
     ·原生质体再生方式选择第38-39页
     ·原生质体再生培养基选择第39页
     ·再生培养基渗透压稳定剂的选择第39页
  2 结果与分析第39-44页
   ·不同再生方式对原生质体再生的影响第39-41页
   ·原生质体萌发第41-42页
   ·不同再生培养基对原生质体再生的影响第42-43页
   ·不同渗透压稳定剂对原生质体再生的影响第43-44页
  3 结论与讨论第44-47页
第三章 原生质体融合育种第47-78页
 第一节 原生质体灭活条件的研究第47-52页
  1 材料与方法第47-48页
   ·供试菌株第47页
   ·培养基第47-48页
   ·试验方法第48页
     ·原生质体的制备第48页
     ·原生质体热灭活第48页
     ·原生质体紫外灭活第48页
  2 结果与分析第48-51页
   ·原生质体热灭活条件的研究第48-49页
   ·原生质体紫外灭活条件的研究第49-51页
  3 结论与讨论第51-52页
 第二节 原生质体融合条件的研究第52-58页
  1 材料与方法第52-53页
   ·供试菌株第52页
   ·主要试剂与仪器第52页
   ·试验方法第52-53页
     ·融合剂的配置第52-53页
     ·原生质体的制备第53页
     ·融合剂筛选第53页
     ·原生质体融合观察第53页
  2 结果与分析第53-57页
   ·不同分子量的 PEG 及其浓度对原生质体融合的影响第53-55页
   ·原生质体融合过程的观察第55-57页
  3 结论与讨论第57-58页
 第三节 原生质体融合第58-64页
  1 材料与方法第58-59页
   ·供试菌株第58页
   ·主要试剂与仪器第58页
   ·试验方法第58-59页
     ·亲本原生质体的制备第58页
     ·pl.e0091菌株原生质体灭活第58页
     ·原生质体融合第58-59页
     ·融合子的检出第59页
     ·融合子形态观察及纯化第59页
  2 结果与分析第59-63页
   ·亲本原生质体获得第59页
   ·灭活效果检测第59-60页
   ·融合子筛选第60-61页
   ·融合子R1的菌落形态第61页
   ·融合子纯化第61-63页
  3 结论与讨论第63-64页
 第四节 融合子的验证第64-78页
  1 材料与方法第64-68页
   ·供试菌株第64页
   ·主要仪器第64页
   ·试验方法第64-68页
     ·平板拮抗试验第64-65页
     ·融合子分子标记验证第65-68页
  2 结果与分析第68-76页
   ·拮抗试验鉴定第68-69页
   ·DNA检测结果第69-70页
   ·RAPD标记分析第70-72页
   ·ISSR标记分析第72-73页
   ·SRAP标记分析第73-74页
   ·SCAR标记分析第74-76页
  3 结论与讨论第76-78页
第四章 融合子特性及遗传分析第78-89页
 第一节 融合子的生物学特性第78-82页
  1 材料与方法第78-79页
   ·供试菌株第78页
   ·培养基第78页
   ·试验方法第78-79页
     ·融合子与亲本菌株在PDA上菌丝生长速度比较第78页
     ·融合子稳定性检验第78页
     ·融合子出菇试验第78-79页
  2 结果与分析第79-81页
   ·融合子R1-16与亲本菌丝生长速度比较第79-80页
   ·融合子稳定性检验结果第80页
   ·融合子子实体观察第80-81页
  3 结论与讨论第81-82页
 第二节 融合子遗传分析第82-89页
  1 材料与方法第82-84页
   ·供试菌株第82页
   ·主要仪器第82页
   ·试验方法第82-84页
     ·融合子及亲本 ITS-RFLP 分析第82-83页
     ·遗传距离 RAPD、ISSR、SRAP 综合聚类分析第83-84页
     ·特异标记在融合子单孢中的分离情况第84页
  2 结果与分析第84-88页
   ·ITS-RFLP分析第84-86页
   ·融合子R1-16与亲本聚类结果分析第86-87页
   ·特异标记在融合子单孢中的分离情况第87-88页
  3 结论与讨论第88-89页
参考文献第89-93页
致谢第93页

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