摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
第一节 食用菌研究的重要意义 | 第12-13页 |
·食用菌的概念 | 第12页 |
·食用菌的营养价值 | 第12页 |
·食用菌的药用价值 | 第12页 |
·食用菌的经济价值和社会效益 | 第12-13页 |
第二节 食用菌传统育种方法及研究进展 | 第13-15页 |
·选择育种 | 第13页 |
·杂交育种 | 第13-14页 |
·诱变育种 | 第14-15页 |
第三节 食用菌现代新技术育种及进展 | 第15-21页 |
·原生质体技术育种 | 第15-21页 |
·原生质体的概念 | 第15页 |
·原生质体的制备与再生 | 第15-16页 |
·原生质体单核化技术 | 第16页 |
·原生质体再生无性系 | 第16-17页 |
·原生质体转化技术 | 第17页 |
·原生质体诱变技术 | 第17页 |
·原生质体融合技术 | 第17-21页 |
·基因工程育种 | 第21页 |
第四节 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 亲本选择及原生质体的制备、再生 | 第22-47页 |
第一节 亲本的选择 | 第22-29页 |
1 材料与方法 | 第22-23页 |
·供试菌株 | 第22页 |
·培养基及试剂 | 第22-23页 |
·试验方法 | 第23页 |
·菌丝生长速度的测定 | 第23页 |
·原生质制备及产量的比较 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-27页 |
·杏鲍菇及其单孢菌株菌丝生长速度 | 第23-24页 |
·秀珍菇及其单孢菌株菌丝生长速度 | 第24-25页 |
·杏鲍菇及其单孢菌株菌原生质的制备 | 第25-26页 |
·秀珍菇及其单孢菌株菌原生质的制备 | 第26-27页 |
3 结论与讨论 | 第27-29页 |
第二节 原生质体制备条件的优化 | 第29-38页 |
1 材料与方法 | 第29-31页 |
·供试菌株 | 第29页 |
·试验试剂 | 第29页 |
·仪器与设备 | 第29页 |
·试验方法 | 第29-31页 |
·培养基制备 | 第29页 |
·稳渗液制备 | 第29-30页 |
·酶液制备 | 第30页 |
·菌丝培养及收集 | 第30页 |
·原生质体制备及计数 | 第30页 |
·原生质体释放过程与方式的观察 | 第30页 |
·原生质体制备的酶解时间优化试验 | 第30页 |
·原生质制备的酶液浓度优化试验 | 第30-31页 |
·原生质制备的其它条件优化试验 | 第31页 |
·原生质体的纯化 | 第31页 |
·原生质体活性检测 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-37页 |
·原生质体释放过程与方式 | 第31-32页 |
·原生质体制备的酶解时间优化 | 第32-33页 |
·原生质体制备的酶液浓度优化 | 第33页 |
·原生质体制备最佳条件的确定 | 第33-36页 |
·原生质体纯化效果 | 第36页 |
·原生质活性检测结果 | 第36-37页 |
3 结论与讨论 | 第37-38页 |
第三节 原生质体再生及其条件优化 | 第38-47页 |
1 材料与方法 | 第38-39页 |
·供试菌株 | 第38页 |
·培养基 | 第38页 |
·试验方法 | 第38-39页 |
·亲本原生质体的制备 | 第38页 |
·原生质体纯化及计数 | 第38页 |
·原生质体再生方式选择 | 第38-39页 |
·原生质体再生培养基选择 | 第39页 |
·再生培养基渗透压稳定剂的选择 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-44页 |
·不同再生方式对原生质体再生的影响 | 第39-41页 |
·原生质体萌发 | 第41-42页 |
·不同再生培养基对原生质体再生的影响 | 第42-43页 |
·不同渗透压稳定剂对原生质体再生的影响 | 第43-44页 |
3 结论与讨论 | 第44-47页 |
第三章 原生质体融合育种 | 第47-78页 |
第一节 原生质体灭活条件的研究 | 第47-52页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
·供试菌株 | 第47页 |
·培养基 | 第47-48页 |
·试验方法 | 第48页 |
·原生质体的制备 | 第48页 |
·原生质体热灭活 | 第48页 |
·原生质体紫外灭活 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-51页 |
·原生质体热灭活条件的研究 | 第48-49页 |
·原生质体紫外灭活条件的研究 | 第49-51页 |
3 结论与讨论 | 第51-52页 |
第二节 原生质体融合条件的研究 | 第52-58页 |
1 材料与方法 | 第52-53页 |
·供试菌株 | 第52页 |
·主要试剂与仪器 | 第52页 |
·试验方法 | 第52-53页 |
·融合剂的配置 | 第52-53页 |
·原生质体的制备 | 第53页 |
·融合剂筛选 | 第53页 |
·原生质体融合观察 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-57页 |
·不同分子量的 PEG 及其浓度对原生质体融合的影响 | 第53-55页 |
·原生质体融合过程的观察 | 第55-57页 |
3 结论与讨论 | 第57-58页 |
第三节 原生质体融合 | 第58-64页 |
1 材料与方法 | 第58-59页 |
·供试菌株 | 第58页 |
·主要试剂与仪器 | 第58页 |
·试验方法 | 第58-59页 |
·亲本原生质体的制备 | 第58页 |
·pl.e0091菌株原生质体灭活 | 第58页 |
·原生质体融合 | 第58-59页 |
·融合子的检出 | 第59页 |
·融合子形态观察及纯化 | 第59页 |
2 结果与分析 | 第59-63页 |
·亲本原生质体获得 | 第59页 |
·灭活效果检测 | 第59-60页 |
·融合子筛选 | 第60-61页 |
·融合子R1的菌落形态 | 第61页 |
·融合子纯化 | 第61-63页 |
3 结论与讨论 | 第63-64页 |
第四节 融合子的验证 | 第64-78页 |
1 材料与方法 | 第64-68页 |
·供试菌株 | 第64页 |
·主要仪器 | 第64页 |
·试验方法 | 第64-68页 |
·平板拮抗试验 | 第64-65页 |
·融合子分子标记验证 | 第65-68页 |
2 结果与分析 | 第68-76页 |
·拮抗试验鉴定 | 第68-69页 |
·DNA检测结果 | 第69-70页 |
·RAPD标记分析 | 第70-72页 |
·ISSR标记分析 | 第72-73页 |
·SRAP标记分析 | 第73-74页 |
·SCAR标记分析 | 第74-76页 |
3 结论与讨论 | 第76-78页 |
第四章 融合子特性及遗传分析 | 第78-89页 |
第一节 融合子的生物学特性 | 第78-82页 |
1 材料与方法 | 第78-79页 |
·供试菌株 | 第78页 |
·培养基 | 第78页 |
·试验方法 | 第78-79页 |
·融合子与亲本菌株在PDA上菌丝生长速度比较 | 第78页 |
·融合子稳定性检验 | 第78页 |
·融合子出菇试验 | 第78-79页 |
2 结果与分析 | 第79-81页 |
·融合子R1-16与亲本菌丝生长速度比较 | 第79-80页 |
·融合子稳定性检验结果 | 第80页 |
·融合子子实体观察 | 第80-81页 |
3 结论与讨论 | 第81-82页 |
第二节 融合子遗传分析 | 第82-89页 |
1 材料与方法 | 第82-84页 |
·供试菌株 | 第82页 |
·主要仪器 | 第82页 |
·试验方法 | 第82-84页 |
·融合子及亲本 ITS-RFLP 分析 | 第82-83页 |
·遗传距离 RAPD、ISSR、SRAP 综合聚类分析 | 第83-84页 |
·特异标记在融合子单孢中的分离情况 | 第84页 |
2 结果与分析 | 第84-88页 |
·ITS-RFLP分析 | 第84-86页 |
·融合子R1-16与亲本聚类结果分析 | 第86-87页 |
·特异标记在融合子单孢中的分离情况 | 第87-88页 |
3 结论与讨论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-93页 |
致谢 | 第93页 |